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灵芝免疫调节蛋白和荧光假单胞菌二乙酰基间苯酚水解酶的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第1章 中华灵芝免疫调节蛋白 LZ-8 结构和功能研究第9-26页
   ·引言第9-14页
     ·真菌免疫调节蛋白第9-10页
     ·真菌免疫调节蛋白活性研究第10-13页
     ·中华灵芝免疫调节蛋白LZ-8第13-14页
   ·实验材料与方法第14-18页
     ·基因克隆、质粒构建及蛋白质表达第14-17页
     ·重组蛋白质纯化及浓缩第17页
     ·蛋白质晶体筛选与优化及衍射数据收集第17-18页
     ·LZ-8 的结构解析、模型构建与结构修正第18页
     ·LZ-8、Fip-fve 对 HL60 细胞的杀伤实验第18页
   ·实验结果与讨论第18-24页
     ·LZ-8 重组蛋白表达与纯化第18页
     ·LZ-8 蛋白质晶体筛选与优化及衍射数据收集第18-21页
     ·LZ-8 的结构解析、模型构建与结构修正第21-22页
     ·LZ-8 的整体结构第22-23页
     ·LZ-8 与Fip-fve 结构上的比较第23-24页
     ·LZ-8、Fip-fve 对HL60 细胞的杀伤活性的差异第24页
   ·总结与展望第24-26页
第2章 荧光假单胞菌二乙酰基间苯酚水解酶结构的研究第26-54页
   ·引言第26-29页
     ·荧光假单胞菌2,4-二乙酰基间苯三酚(DAPG)的合成与代谢途径第26-27页
     ·DAPG 水解酶PhlG 的生物学功能第27-29页
   ·实验材料以及方法第29-37页
     ·PhlG 基因及其突变体基因的克隆及表达质粒构建第29-33页
     ·PhlG及其突变体重组蛋白的表达与纯化第33-34页
     ·PhlG 蛋白质晶体筛选与优化及衍射数据收集第34页
     ·PhlG 蛋白晶体的结构解析与结构修正第34-35页
     ·酶与底物DAPG 的分子对接第35页
     ·底物分子进入通道的计算分析第35页
     ·PhlG 水解酶及其突变体的蛋白定量第35-36页
     ·PhlG 水解酶及其突变体的活性检测第36-37页
     ·PhlG 的谷胱甘肽化修饰及LC-MS-MS 检测第37页
   ·实验结果与讨论第37-52页
     ·PhlG 基因及其突变体基因的克隆及表达质粒构建第37-38页
     ·PhlG 及其突变体重组蛋白的表达与纯化第38-39页
     ·PhlG 蛋白质晶体筛选与优化及衍射数据收集第39-41页
     ·PhlG 蛋白晶体的结构解析与结构修正第41-42页
     ·PhlG 的整体结构第42-47页
     ·酶与底物的分子对接和推测的活性机理第47-48页
     ·底物分子进入通道的计算分析第48页
     ·谷胱甘肽化修饰及活性中心残基突变对活性的影响第48-52页
   ·结论与展望第52-54页
参考文献第54-60页
附录第60-68页
致谢第68-69页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第69页

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