| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-28页 |
| ·棉花雄性生殖发育的研究进展 | 第15-21页 |
| ·棉花花药结构简介 | 第15页 |
| ·棉花花药发育的细胞学特征 | 第15-16页 |
| ·棉花花药发育的分子机理 | 第16-18页 |
| ·棉花雄性不育及其遗传研究 | 第18-21页 |
| ·体细胞胚发生受体类激酶基因的研究进展 | 第21-27页 |
| ·SERK 基因家族的发现 | 第21页 |
| ·SERK 基因家族的基因及蛋白结构特征 | 第21-22页 |
| ·SERK 基因的表达与调控 | 第22-23页 |
| ·SERK 基因及其蛋白功能 | 第23-26页 |
| ·展望 | 第26-27页 |
| ·研究内容和意义 | 第27页 |
| ·本文研究的策略和方法 | 第27-28页 |
| ·研究策略 | 第27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 棉花体细胞胚发生受体类激酶基因的克隆 | 第28-38页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·棉花基因组BAC 文库 | 第28页 |
| ·菌株及载体 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·引物及测序 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·提取棉花基因组 | 第29页 |
| ·同源克隆棉花SERK 基因家族 | 第29-31页 |
| ·筛选棉花基因组BAC 文库(PCR 直选法筛选BAC 文库的原理). | 第31页 |
| ·脉冲场电泳阳性BAC 质粒的酶切产物 | 第31-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·棉花SERK 基因片段分析 | 第33-35页 |
| ·SERK 基因阳性BAC 质粒的获得 | 第35-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第三章 GhSERK1 的基因组、启动子和CDNA 序列的获得与生物信息学分析 | 第38-60页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·植物材料 | 第38页 |
| ·菌株及载体 | 第38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·引物及测序 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-45页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·单引物测序法获得GhSERK1 基因全长基因组序列 | 第39-40页 |
| ·提取棉花RNA | 第40页 |
| ·3’和5’RACE 扩增GhSERK1 基因的cDNA 3’末端和5’末端 | 第40-45页 |
| ·生物信息分析软件及网络资源 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-59页 |
| ·GhSERK1 基因的全长基因组序列 | 第45-49页 |
| ·GhSERK1 基因的全长cDNA 序列 | 第49-50页 |
| ·GhSERK1 的生物信息学分析 | 第50-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第四章 GhSERK1 基因与GhSERK 基因家族的拷贝数分析 | 第60-67页 |
| ·材料 | 第60页 |
| ·植物材料 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60页 |
| ·引物及测序 | 第60页 |
| ·方法 | 第60-64页 |
| ·提取棉花基因组 | 第60-61页 |
| ·Southern Blot | 第61-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-66页 |
| ·GhSERK1 基因的拷贝数 | 第64-65页 |
| ·棉花中SERK 基因家族的拷贝数 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第五章 GhSERK1 基因的表达谱分析 | 第67-72页 |
| ·材料 | 第67页 |
| ·植物材料 | 第67页 |
| ·试剂 | 第67页 |
| ·载体和菌株 | 第67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·提取棉花RNA | 第67-68页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第68页 |
| ·RT-PCR 和Real-Time PCR. | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-71页 |
| ·GhSERK1 基因在棉花各组织与不同生长时期的表达情况 | 第69-70页 |
| ·GhSERK1 基因在棉花不育系与可育系中生殖器官表达情况 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第六章 转GhSERK1 基因干扰载体棉花的获得与分析 | 第72-91页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·植物材料 | 第72页 |
| ·菌株与载体 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72页 |
| ·引物合成及测序 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-80页 |
| ·提取棉花总RNA 及反转录PCR | 第72-73页 |
| ·PCR 扩增cDNA 干扰片段 | 第73-74页 |
| ·入门载体的构建 | 第74-76页 |
| ·植物稳定表达载体的构建 | 第76-77页 |
| ·花粉管通道法转化棉花 | 第77页 |
| ·农杆菌喷施法转化棉花 | 第77-78页 |
| ·卡那霉素筛选以及PCR 法鉴定转基因植株 | 第78-79页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第79页 |
| ·荧光定量PCR 分析 | 第79-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-89页 |
| ·干扰载体的构建 | 第80-84页 |
| ·转基因植株的筛选与获得 | 第84-85页 |
| ·转基因植株表型观察 | 第85-86页 |
| ·转基因植株荧光定量PCR 分析 | 第86-88页 |
| ·转基因植株花粉活力观察 | 第88-89页 |
| ·讨论 | 第89-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 全文结论 | 第91-93页 |
| 创新点 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 作者简历 | 第107页 |
