| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| ·植酸酶 | 第10-14页 |
| ·植酸酶分类 | 第11页 |
| ·植酸酶来源 | 第11-12页 |
| ·植酸酶作用机理 | 第12-13页 |
| ·植酸酶的理化特征 | 第13-14页 |
| ·植酸酶高产菌株的选育 | 第14-15页 |
| ·分离产酶天然菌株 | 第14-15页 |
| ·通过诱变改造天然菌株 | 第15页 |
| ·植酸酶的检测方法 | 第15-16页 |
| ·钒-钼酸铵法 | 第16页 |
| ·Vc-钼蓝法 | 第16页 |
| ·FeSO_4-钼蓝法 | 第16页 |
| ·丙酮-酸钼铵法 | 第16页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第16-18页 |
| ·硫酸铵沉淀及脱盐 | 第16-17页 |
| ·SephadexG-100分离 | 第17页 |
| ·DEAE52-cellulose离子交换层析 | 第17-18页 |
| ·植酸酶基因工程 | 第18-21页 |
| ·植酸酶基因在微生物中表达 | 第18-20页 |
| ·植酸酶基因在植物中表达 | 第20-21页 |
| ·植酸酶的应用 | 第21-22页 |
| ·植酸酶在食品工业的应用 | 第21页 |
| ·植酸酶在饲料工业的应用 | 第21页 |
| ·生产肌醇磷酸盐或肌醇 | 第21-22页 |
| ·农业生产 | 第22页 |
| ·目前植酸酶的研究热点 | 第22-23页 |
| ·本试验的目的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-33页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·样品 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·主要化学药品及试剂 | 第25-26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·产植酸酶菌株的筛选 | 第26页 |
| ·产植酸酶菌株的初步鉴定 | 第26-27页 |
| ·植酸酶活力的测定 | 第27页 |
| ·培养基对产酶的影响 | 第27-28页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第28-29页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第29-30页 |
| ·植酸酶性质的测定 | 第30页 |
| ·植酸酶phy A基因在毕赤酵母GS-115系统中的表达 | 第30-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-50页 |
| ·植酸酶产生菌的筛选结果 | 第33-34页 |
| ·标准磷曲线的绘制 | 第34页 |
| ·培养基条件对产酶的影响 | 第34-39页 |
| ·不同碳源对产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·不同氮源对产酶的影响 | 第35-36页 |
| ·无机元素对产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·正交试验 | 第37-38页 |
| ·培养基起始pH对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第39-42页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第39-40页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第40页 |
| ·种子菌龄对产酶的影响 | 第40-41页 |
| ·培养基接种量对产酶的影响 | 第41页 |
| ·三角瓶装液量对产酶的影响 | 第41-42页 |
| ·遗传稳定性试验 | 第42页 |
| ·植酸酶的分离纯化 | 第42-44页 |
| ·不同浓度CaCl_2对酶提取的影响 | 第42-43页 |
| ·提取次数与酶的得率的关系 | 第43页 |
| ·植酸酶纯化结果 | 第43-44页 |
| ·植酸酶性质的测定 | 第44-46页 |
| ·植酸酶最适反应温度 | 第44页 |
| ·植酸酶的热稳定性 | 第44-45页 |
| ·植酸酶的最适反应pH | 第45页 |
| ·植酸酶的pH稳定性 | 第45-46页 |
| ·干燥酶耐高温实验 | 第46页 |
| ·植酸酶米氏常数(Km)的测定 | 第46页 |
| ·植酸酶PHY A基因在毕赤酵母GS-115系统中的表达 | 第46-50页 |
| ·phy A基因PCR扩增结果 | 第46-47页 |
| ·phy A基因的克隆及重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组酵母的转化和筛选鉴定 | 第48页 |
| ·重组酵母诱导表达条件的优化 | 第48-49页 |
| ·重组植酸酶的纯化和SDS-PAGE的鉴定 | 第49页 |
| ·重组植酸酶与之前分离纯化的植酸酶酶学性质的比较 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| ·植酸酶产生菌的筛选方法 | 第50页 |
| ·植酸酶活力测定方法 | 第50页 |
| ·培养基和发酵条件的优化 | 第50页 |
| ·植酸酶的分离纯化和酶学性质测定 | 第50-51页 |
| ·植酸酶基因克隆表达研究 | 第51-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57页 |