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拟南芥G蛋白信号转导调节蛋白(AtRGS1蛋白)的定位及在葡萄糖信号转导中的功能研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
中英文对照词第9-10页
第一章 文献综述第10-23页
 1 动物中G 蛋白信号转导系统第10-11页
 2 植物中G 蛋白信号转导系统第11-12页
 3 G 蛋白信号转导调节蛋白第12-14页
   ·RGS 蛋白家族及其结构第12-14页
     ·RGS 蛋白家族第12-13页
     ·RGS 蛋白的结构第13-14页
   ·RGS 作用的分子机理第14页
   ·RGS 蛋白的胞内定位第14页
 4 拟南芥中的RGS 蛋白第14-15页
 5 高等植物中的葡萄糖信号转导途径第15-18页
   ·高等植物细胞核中的葡萄糖信号受体第16页
   ·高等植物细胞核中其它可能的葡萄糖信号受体第16-17页
   ·高等植物细胞膜上的葡萄糖信号受体第17-18页
 6 本研究的目的及研究内容第18页
 参考文献第18-23页
第二章 AtRGS1蛋白的亚细胞定位第23-33页
 1 材料与方法第23-26页
   ·植物材料第23页
   ·菌株、质粒及生化试剂第23-24页
   ·实验方法第24-26页
 2 结果与分析第26-29页
   ·RNA 完整性检测第26页
   ·目的基因的获得第26页
   ·目的基因的克隆及鉴定第26-27页
   ·农杆菌的转化第27-28页
   ·AtRGS1 蛋白不同结构域的亚细胞定位第28-29页
     ·细胞转化第28页
     ·在胁迫处理下,AtRGS1 蛋白不同结构域的亚细胞分布变化第28-29页
 3 讨论第29-30页
 参考文献第30-33页
第三章 AtRGS1 蛋白介导的葡萄糖信号转导途径中的候选基因的获得第33-53页
 1 实验材料第34页
   ·材料第34页
   ·试剂第34页
 2 实验方法第34-40页
   ·无菌苗的培养及胁迫处理第34页
   ·RNA 提取及cDNA 第一链的合成第34-35页
   ·差异显示PCR第35页
     ·引物第35页
     ·差异显示PCR 反应条件第35页
   ·聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)的制备、电泳和银染第35-36页
     ·主要试剂第35-36页
     ·聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)的制备、电泳第36页
     ·硝酸银染色方法第36页
   ·差异条带的第一次回收第36-37页
   ·回收差异条带的二次扩增第37页
   ·二次PCR 扩增产物的回收第37页
   ·差异条带与pMD18-T 载体的连接第37页
   ·质粒转化第37-38页
     ·DH5α感受态细胞的制备第37页
     ·细菌转化第37-38页
   ·阳性菌的筛选及鉴定第38页
   ·测序及比对第38页
   ·将所得的差异片段的反向Northern 点杂交验证第38-40页
     ·标记cDNA 探针第38-39页
       ·主要试剂第38-39页
       ·实验步骤第39页
     ·反向(reverse)Northern 杂交第39-40页
       ·主要试剂第39-40页
       ·实验步骤第40页
   ·分析软件及网址第40页
 3 结果第40-46页
   ·RNA 完整性检测第40-41页
   ·葡萄糖处理下野生型Col 和突变体1951-2 基因表达的差异第41-42页
   ·差异表达片段的克隆和测序第42-44页
     ·基因差异表达片段的回收第42-43页
     ·差异表达片段的克隆和测序第43页
     ·差异表达条带的序列分析第43-44页
   ·差异表达片段的反向Northern 点杂交验证第44-46页
 4 讨论第46-49页
 参考文献第49-53页
第四章 AtRGS1在拟南芥种子萌发过程中对葡萄糖信号的响应第53-63页
 1 材料第54页
   ·实验材料第54页
   ·试剂第54页
 2 实验方法第54-56页
   ·土壤栽培第54页
   ·拟南芥的杂交第54-55页
   ·双突变体的鉴定第55页
   ·萌发实验第55页
   ·分析软件及网址第55-56页
 3 结果与分析第56-59页
   ·糖对种子萌发的影响第56-57页
   ·纯合双突变体的鉴定第57-58页
   ·葡萄糖对各突变体种子萌发的影响第58-59页
 4 讨论第59-61页
 参考文献第61-63页
第五章 结语第63-66页
 1 研究小结第63-64页
 2 本研究的创新点第64-65页
 3 深入研究设想第65-66页
附录第66-75页
致谢第75-76页

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