| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-30页 |
| 一 细胞凋亡及其调控机理的研究意义及其问题 | 第13-16页 |
| 二 细胞核基质在细胞生命活动中的重要作用 | 第16-18页 |
| 三 细胞核基质在细胞凋亡中的变化研究 | 第18-21页 |
| 四 成骨细胞及其凋亡研究的重要理论与实践意义 | 第21-26页 |
| ·成骨细胞的生物学特性 | 第21-23页 |
| ·成骨细胞凋亡的研究 | 第23-25页 |
| ·成骨细胞凋亡研究中所存在的问题 | 第25-26页 |
| 五 姜黄素及其在细胞凋亡研究中的应用 | 第26-27页 |
| 六 本研究拟解决的具体科学问题及其意义 | 第27-30页 |
| 材料与方法 | 第30-37页 |
| 一 细胞培养与诱导凋亡处理 | 第30页 |
| ·细胞培养 | 第30页 |
| ·诱导凋亡物与诱导凋亡处理 | 第30页 |
| 二 生长曲线测定 | 第30-31页 |
| 三 细胞周期测定 | 第31页 |
| 四 HE 染色细胞形态光镜样品制备 | 第31页 |
| 五 透射电子显微镜观察样品制备 | 第31-32页 |
| 六 Hoechst 染色 | 第32页 |
| 七 DNA 电泳 | 第32页 |
| 八 成骨肉瘤细胞凋亡相关基因免疫细胞化学观察样品制备 | 第32-33页 |
| ·人成骨肉瘤 MG-63 细胞相关抑凋亡基因突变型p53、bcl-2 产物表达观察样品制备 | 第32-33页 |
| ·人成骨肉瘤 MG-63 细胞相关促凋亡基因bax、fas 产物表达观察样品制备 | 第33页 |
| 九 核基质-中间纤维系统选择性抽提整装光镜和电镜观察样品制备 | 第33-34页 |
| ·核基质-中间纤维（NM-IF）的选择性抽提 | 第33页 |
| ·核基质-中间纤维（NM-IF）的选择性抽提光镜样品的制备与观察 | 第33-34页 |
| ·核基质-中间纤维（NM-IF）的选择性抽提电镜样品的制备与观察 | 第34页 |
| 十 核基质样品的选择性抽提 | 第34页 |
| 十一 双向凝胶电泳分析 | 第34-35页 |
| 十二 质谱生物学鉴定 | 第35-36页 |
| ·核基质蛋白点 MALDI-TOF 质谱样品制备 | 第35-36页 |
| ·核基质蛋白点 MALDI-TOF 质谱分析 | 第36页 |
| 十三 蛋白质数据库查询 | 第36-37页 |
| 实验结果 | 第37-55页 |
| 一 姜黄素对人成骨肉瘤 MG-63 细胞凋亡的诱导作用 | 第37-43页 |
| 1 姜黄素对 MG-63 细胞增殖与细胞周期的影响 | 第37-39页 |
| ·姜黄素对人成骨肉瘤 MG-63 细胞生长的影响 | 第37-38页 |
| ·姜黄素对人成骨肉瘤MG-63 细胞周期的影响 | 第38-39页 |
| 2 姜黄素对 MG-63 细胞形态与超微结构变化的影响 | 第39-40页 |
| ·光学显微镜观察 | 第39页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第39-40页 |
| 3 姜黄素对 MG-63 细胞核与 DNA 的作用 | 第40-41页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞核的裂解作用 | 第40页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞 DNA 的降解作用 | 第40-41页 |
| 4 姜黄素对 MG-63 细胞p53 、bcl-2、bax 和fas 等凋亡相关基因表达的影响 | 第41-43页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞p53 基因表达的影响 | 第41-42页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞bcl-2 基因表达的影响 | 第42页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞bax 基因表达的影响 | 第42页 |
| ·姜黄素对 MG-63 细胞fas 基因表达的影响 | 第42-43页 |
| 二 姜黄素对人成骨肉瘤 MG-63 细胞核基质－中间纤维系统构型变化的影响 | 第43-45页 |
| 1 光学显微镜观察 | 第43页 |
| 2 电子显微镜观察 | 第43-45页 |
| ·核基质 | 第44页 |
| ·核纤层 | 第44页 |
| ·中间纤维 | 第44-45页 |
| 三 姜黄素对人成骨肉瘤 MG-63 细胞核基质蛋白表达的影响 | 第45-55页 |
| 1 双向凝胶电泳分析 | 第45-48页 |
| 2 生物质谱鉴定 | 第48-55页 |
| 讨论 | 第55-74页 |
| 一 姜黄素对人成骨肉瘤 MG-63 细胞凋亡的诱导作用 | 第55-60页 |
| 1. 姜黄素对 MG-63 细胞增殖的抑制与细胞周期的影响 | 第55-56页 |
| 2. 姜黄素对 MG-63 细胞形态与超微结构的影响 | 第56-57页 |
| 3. 姜黄素对 MG-63 细胞细胞核以及 DNA 的影响 | 第57-58页 |
| 4. 姜黄素对 MG-63 细胞凋亡相关基因的作用 | 第58-60页 |
| 小结 | 第60页 |
| 二 人成骨肉瘤细胞凋亡过程中核基质－中间纤维系统的构型变化 | 第60-63页 |
| 三 人成骨肉瘤 MG-63 细胞凋亡过程中核基质蛋白的组成变化 | 第63-65页 |
| 四 差异核基质蛋白在人成骨肉瘤 MG-63 细胞凋亡过程中的功能作用 | 第65-70页 |
| ·核基质结构蛋白 Vimentin | 第65-66页 |
| ·Prohibitin | 第66-67页 |
| ·Nucleophosmin | 第67-68页 |
| ·Hsp70 | 第68-69页 |
| ·其它 | 第69页 |
| 小结 | 第69-70页 |
| 五 特异核基质蛋白在 MG-63 细胞诱导凋亡中的调控作用 | 第70-74页 |
| 结论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 版图说明 | 第86-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
