摘要 | 第1-3页 |
SUMMARY | 第3-9页 |
Ⅰ 文献综述 | 第9-20页 |
1. 植物果实软化的基因工程 | 第9-12页 |
·ACC 合成酶基因(ACS) | 第9-11页 |
·ACC 氧化酶基因 | 第11页 |
·多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因 | 第11-12页 |
2. 植物基因表达调控 | 第12-13页 |
3. 植物启动子研究进展 | 第13-14页 |
4. 组织特异性启动子 | 第14-15页 |
5. GUS 染色技术的应用 | 第15-16页 |
6. 甜瓜基因工程 | 第16页 |
7. 甜瓜ACC 氧化酶基因的研究 | 第16-17页 |
8. 本研究的目的意义 | 第17-19页 |
9. 技术路线 | 第19-20页 |
Ⅱ 材料与方法 | 第20-27页 |
1. 材料 | 第20-22页 |
·植物材料 | 第20页 |
·菌种与质粒 | 第20页 |
·药品与试剂 | 第20页 |
·培养基 | 第20-21页 |
·缓冲液 | 第21-22页 |
2. 方法 | 第22-27页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第22页 |
·酶切 | 第22页 |
·采用低熔点琼脂糖凝胶法(Sambrook J.1996)回收目的片段 | 第22-23页 |
·大片段去磷酸化 | 第23页 |
·回收片段与 Vector 的连接反应 | 第23-24页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第24页 |
·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第24页 |
·PCR 扩增 | 第24-25页 |
·根癌农杆菌介导的烟草叶盘转化法 | 第25-26页 |
·根癌农杆菌介导的甜瓜叶盘转化法 | 第26页 |
·GUS 组织化学染色法 | 第26-27页 |
Ⅲ 结果与分析 | 第27-34页 |
1. 植物表达载体的构建 | 第27-29页 |
·pCAM-ACO1-promoter 和pBI101.2 酶切鉴定 | 第28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28-29页 |
2. 植物转化载体的构建 | 第29页 |
3. 烟草转化 | 第29-31页 |
·Kana 抗性芽的筛选 | 第29-30页 |
·Kana 抗性苗的筛选 | 第30-31页 |
·烟草抗性苗的 PCR 检测 | 第31页 |
·转基因烟草的温室培育 | 第31页 |
4. 转基因甜瓜的获得 | 第31-33页 |
·甜瓜 Kana 抗性芽的获得 | 第31页 |
·甜瓜抗性苗获得 | 第31-32页 |
·甜瓜转化植株的 PCR 检测 | 第32页 |
·转基因甜瓜的温室培育 | 第32-33页 |
5. GUS 基因表达检测 | 第33-34页 |
·转基因烟草和甜瓜的瞬时表达检测 | 第33页 |
·转基因甜瓜的组织特异性表达检测 | 第33-34页 |
Ⅵ 讨论 | 第34-40页 |
1. 载体构建 | 第34-35页 |
2. 植物转化载体的构建及检测 | 第35页 |
3. 甜瓜的遗传转化 | 第35-37页 |
·细胞分裂素与抗生素之间的相互影响 | 第36-37页 |
·转化植物体内农杆菌的影响 | 第37页 |
·导入基因的整合问题 | 第37页 |
4. 植物选择标记基因 | 第37-38页 |
5. 甜瓜ACO1 启动子的特异调控 | 第38-40页 |
Ⅴ 结论 | 第40-41页 |
Ⅵ 参考文献 | 第41-49页 |
Ⅶ 图版 | 第49-52页 |
主要英文缩略词表 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
个人简历 | 第54-55页 |
导师简介 | 第55-56页 |