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甜瓜ACO1启动子的组织特异调控研究

摘要第1-3页
SUMMARY第3-9页
Ⅰ 文献综述第9-20页
 1. 植物果实软化的基因工程第9-12页
   ·ACC 合成酶基因(ACS)第9-11页
   ·ACC 氧化酶基因第11页
   ·多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因第11-12页
 2. 植物基因表达调控第12-13页
 3. 植物启动子研究进展第13-14页
 4. 组织特异性启动子第14-15页
 5. GUS 染色技术的应用第15-16页
 6. 甜瓜基因工程第16页
 7. 甜瓜ACC 氧化酶基因的研究第16-17页
 8. 本研究的目的意义第17-19页
 9. 技术路线第19-20页
Ⅱ 材料与方法第20-27页
 1. 材料第20-22页
   ·植物材料第20页
   ·菌种与质粒第20页
   ·药品与试剂第20页
   ·培养基第20-21页
   ·缓冲液第21-22页
 2. 方法第22-27页
   ·质粒 DNA 的提取第22页
   ·酶切第22页
   ·采用低熔点琼脂糖凝胶法(Sambrook J.1996)回收目的片段第22-23页
   ·大片段去磷酸化第23页
   ·回收片段与 Vector 的连接反应第23-24页
   ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化第24页
   ·农杆菌感受态细胞的制备与转化第24页
   ·PCR 扩增第24-25页
   ·根癌农杆菌介导的烟草叶盘转化法第25-26页
   ·根癌农杆菌介导的甜瓜叶盘转化法第26页
   ·GUS 组织化学染色法第26-27页
Ⅲ 结果与分析第27-34页
 1. 植物表达载体的构建第27-29页
   ·pCAM-ACO1-promoter 和pBI101.2 酶切鉴定第28页
   ·重组质粒的鉴定第28-29页
 2. 植物转化载体的构建第29页
 3. 烟草转化第29-31页
   ·Kana 抗性芽的筛选第29-30页
   ·Kana 抗性苗的筛选第30-31页
   ·烟草抗性苗的 PCR 检测第31页
   ·转基因烟草的温室培育第31页
 4. 转基因甜瓜的获得第31-33页
   ·甜瓜 Kana 抗性芽的获得第31页
   ·甜瓜抗性苗获得第31-32页
   ·甜瓜转化植株的 PCR 检测第32页
   ·转基因甜瓜的温室培育第32-33页
 5. GUS 基因表达检测第33-34页
   ·转基因烟草和甜瓜的瞬时表达检测第33页
   ·转基因甜瓜的组织特异性表达检测第33-34页
Ⅵ 讨论第34-40页
 1. 载体构建第34-35页
 2. 植物转化载体的构建及检测第35页
 3. 甜瓜的遗传转化第35-37页
   ·细胞分裂素与抗生素之间的相互影响第36-37页
   ·转化植物体内农杆菌的影响第37页
   ·导入基因的整合问题第37页
 4. 植物选择标记基因第37-38页
 5. 甜瓜ACO1 启动子的特异调控第38-40页
Ⅴ 结论第40-41页
Ⅵ 参考文献第41-49页
Ⅶ 图版第49-52页
主要英文缩略词表第52-53页
致谢第53-54页
个人简历第54-55页
导师简介第55-56页

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