| 提要 | 第1-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| 第一节 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第10-15页 |
| 一、GPX 的结构 | 第11-13页 |
| 二、GPX 的催化机制 | 第13-14页 |
| 三、GPX 的生物学作用 | 第14-15页 |
| 第二节 谷胱甘肽过氧化物酶的人工模拟 | 第15-19页 |
| 一、化学合成的小分子模拟物 | 第16-17页 |
| 二、含硒十五肽 | 第17-18页 |
| 三、以环糊精为骨架构建的GPX 模拟物 | 第18页 |
| 四、含硒抗体酶 | 第18-19页 |
| 第三节 本文设计思路 | 第19-21页 |
| 第二章 含硒五肽模拟GPX 的构建及其生物学效应的研究 | 第21-60页 |
| 第一节 实验设计 | 第21-23页 |
| 第二节 硒代半胱氨酸及其衍生物的合成 | 第23-30页 |
| 一、实验材料 | 第23页 |
| 二、实验方法 | 第23-27页 |
| 1. β–氯–丙氨酸的合成 | 第23-24页 |
| 2. 硒代胱氨酸的合成 | 第24-25页 |
| 3. H–Sec(PMB)–OH 的合成 | 第25页 |
| 4. Fmoc–Sec(PMB)–OH 的合成 | 第25-26页 |
| 5. 硒代胱氨酸及其衍生物的检测方法 | 第26页 |
| 6. 硒代胱氨酸及其衍生物的验证 | 第26-27页 |
| 三、结果和讨论 | 第27-30页 |
| 1. Fmoc–Sec(PMB)–OH 逆推结果 | 第27-28页 |
| 2. H–Sec(PMB)–OH 逆推结果 | 第28页 |
| 3. Fmoc–Sec(PMB)–OH 的质谱分析 | 第28-30页 |
| 第三节 合成具有GPX 活性的五肽 | 第30-37页 |
| 一、实验材料 | 第30页 |
| 二、实验方法 | 第30-32页 |
| 1. 多肽合成 | 第30-31页 |
| 2. GPX 活力测定 | 第31-32页 |
| 3. 稳态动力学研究 | 第32页 |
| 4. 最适反应pH 值和温度 | 第32页 |
| 三、结果 | 第32-37页 |
| 1. 5P 的设计 | 第32-33页 |
| 2. 5P 的质谱分析 | 第33页 |
| 3. 5P 的 GPX 活力 | 第33-34页 |
| 4. 5P 的最适 pH 和温度 | 第34页 |
| 5. 5P 的稳态动力学性质研究 | 第34-37页 |
| 四、讨论 | 第37页 |
| 第四节 含硒五肽生物学效应的研究 | 第37-60页 |
| 一、Se-5P 对心肌线粒体抗氧化损伤的保护作用 | 第37-42页 |
| 1. 实验材料 | 第37-38页 |
| 2. 实验方法 | 第38-39页 |
| ·牛心线粒体的制备 | 第38页 |
| ·Fe~(2+)/Vc 诱导线粒体损伤 | 第38页 |
| ·线粒体膨胀度的测定 | 第38页 |
| ·脂质过氧化水平的测定 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-41页 |
| ·5P 对损伤线粒体膨胀度的影响 | 第39-40页 |
| ·5P 抑制损伤线粒体的脂质过氧化作用 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-42页 |
| 二、5P 对过氧化氢诱导肝细胞损伤的保护作用 | 第42-49页 |
| 1. 实验材料 | 第42-43页 |
| 2. 实验方法 | 第43-45页 |
| ·细胞的原代培养 | 第43-44页 |
| ·过氧化氢对细胞的损伤 | 第44页 |
| ·自由基诱生系统中脂质过氧化物丙二醛的测定 | 第44页 |
| ·MTT 法测定细胞存活率 | 第44-45页 |
| ·细胞胞浆酶—乳酸脱氢酶（LDH）含量测定 | 第45页 |
| 3. 结果 | 第45-48页 |
| ·不同浓度的5P 对H_2O_2 诱导损伤肝细胞的MDA 含量的影响 | 第45页 |
| ·不同浓度的5P 对H_2O_2 诱导损伤肝细胞的LDH 的影响 | 第45-47页 |
| ·不同浓度的5P 对H_2O_2 诱导损伤肝细胞存活率的影响 | 第47-48页 |
| 4. 讨论 | 第48-49页 |
| 三、Se-5P 对肝缺血再灌注损伤的保护作用 | 第49-60页 |
| 1. 实验材料 | 第49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-51页 |
| ·实验动物及分组 | 第49页 |
| ·Wistar 大鼠肝缺血再灌注损伤模型的建立 | 第49-50页 |
| ·血液生化指标的检测 | 第50页 |
| ·脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量的测定 | 第50页 |
| ·谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）活力测定 | 第50-51页 |
| ·免疫组化方法检测肝组织中Bcl-2 和Bax 的表达量 | 第51页 |
| ·HE 染色观察损伤肝组织形态学的改变 | 第51页 |
| 3. 结果 | 第51-60页 |
| ·Se-5P 对肝功损伤的保护作用 | 第51-54页 |
| ·Se-5P 对损伤肝组织匀浆中MDA 含量的影响 | 第54-55页 |
| ·Se-5P 对损伤肝组织匀浆中GPX 活力的影响 | 第55-56页 |
| ·Se-5P 对损伤后肝组织中Bcl-2 和Bax 的表达量的影响 | 第56-59页 |
| ·肝组织HE 染色观察 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60页 |
| 本文结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 中文摘要 | 第69-71页 |
| 英文摘要 | 第71-72页 |
