| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-25页 |
| 1 WSSV起源 | 第9-10页 |
| 2 WSSV的形态结构 | 第10-11页 |
| 3 WSSV的流行病学 | 第11页 |
| 4 WSSV病理学研究概况 | 第11-14页 |
| ·WSSV的病症及病理变化 | 第11-12页 |
| ·WSSV在对虾体内的分布及感染顺序 | 第12-13页 |
| ·WSSV的检测 | 第13-14页 |
| ·外观症状与生物检测法 | 第13页 |
| ·病理学检测方法 | 第13页 |
| ·免疫学方法 | 第13-14页 |
| ·斑点杂交和原位杂交法 | 第14页 |
| ·PCR法 | 第14页 |
| 5 WSSV的分子生物学研究概况 | 第14-19页 |
| ·WSSV多肽 | 第14-15页 |
| ·WSSV基因组 | 第15-17页 |
| ·WSSV基因组结构 | 第15-16页 |
| ·WSSV结构蛋白研究概况 | 第16-17页 |
| ·WSSV非结构蛋白研究概况 | 第17页 |
| ·基因组学研究的一些方法 | 第17-19页 |
| ·从蛋白到基因途径 | 第17-18页 |
| ·从基因到蛋白途径 | 第18页 |
| ·蛋白相互作用的研究 | 第18-19页 |
| 6 对虾细胞培养研究进展 | 第19-20页 |
| 参考文献 | 第20-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-35页 |
| 1 实验材料 | 第25-28页 |
| ·生物材料 | 第25页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第25页 |
| ·其他试剂 | 第25页 |
| ·主要实验试剂与配制 | 第25-28页 |
| 2 实验常用仪器设备 | 第28-29页 |
| 3 常用方法 | 第29-34页 |
| ·基因组DNA提取 | 第29-30页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第30页 |
| ·碱裂解法制备质粒DNA | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·重组DNA的转化 | 第32页 |
| ·酶切反应 | 第32页 |
| ·连接反应 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-35页 |
| 第三章 罗氏沼虾WSSV VP28基因和5个未知功能ORF基因的克隆和分析 | 第35-57页 |
| 1 材料与方法 | 第36-38页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·引物设计 | 第36-37页 |
| ·克隆策略图 | 第37-38页 |
| ·VP28基因克隆策略图 | 第37页 |
| ·5个ORF的克隆策略图 | 第37-38页 |
| 2 结果和分析 | 第38-53页 |
| ·VP28基因的克隆 | 第38-39页 |
| ·WSSV ORF023、254、464、131、390和234的PCR扩增 | 第39页 |
| ·WSSV5个ORF的克隆 | 第39-41页 |
| ·WSSV VP28及5个ORF的序列分析 | 第41-46页 |
| ·WSSV VP28序列分析 | 第41-43页 |
| ·WSSV ORF023序列 | 第43页 |
| ·WSSV ORF254序列 | 第43-45页 |
| ·WSSVORF131序列 | 第45页 |
| ·WSSV ORF234序列 | 第45-46页 |
| ·WSSV ORF390序列 | 第46页 |
| ·WSSV VP28系统进化分析 | 第46-48页 |
| ·罗氏沼虾WSSV ORF023和ORF254序列的生物信息学分析 | 第48-53页 |
| ·WSSV ORF023蛋白疏水性分析和二级结构预测 | 第48-51页 |
| ·WSSV ORF254蛋白疏水性分析和二级结构预测 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| ·WSSV的诊断 | 第53-54页 |
| ·WSSV ORF023基因特点 | 第54-55页 |
| ·WSSV ORF254基因特点 | 第55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第四章 罗氏沼虾WSSV ORF023和ORF254在大肠杆菌BL21中的表达 | 第57-68页 |
| 1 材料和方法 | 第57-58页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·WSSV ORF023和ORE254的原核诱导表达 | 第58页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE和Western blot分析 | 第58页 |
| ·WSSV ORF023和ORF254稀有密码子分析方法 | 第58页 |
| 2 结果和分析 | 第58-65页 |
| ·WSSV ORF023的原核诱导表达 | 第58-61页 |
| ·WSSV ORF023的原核诱导表达 | 第58-59页 |
| ·不同浓度IPTG诱导pET-28a(+)-WSSV ORF023的SDS-PAGE分析 | 第59-60页 |
| ·诱导不同时间pET-28a(+)-WSSV ORF023的SDS-PAGE分析 | 第60-61页 |
| ·WSSV ORF254的原核诱导表达 | 第61-63页 |
| ·WSSV ORF254的原核诱导表达 | 第61页 |
| ·不同浓度IPTG诱导pET-28a(+)-WSSV ORF254的SDS-PAGE分析 | 第61-62页 |
| ·诱导不同时间pET-28a(+)-WSSV ORF254的SDS-PAGE分析 | 第62-63页 |
| ·罗氏沼虾WSSV ORF023和ORF254基因稀有密码子分析 | 第63-65页 |
| ·罗氏沼虾WSSV ORF023稀有密码子分析 | 第63-64页 |
| ·罗氏沼虾WSSV ORF254稀有密码子分析 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 第5章 罗氏沼虾WSSV ORF147真核表达载体的构建 | 第68-71页 |
| 1 材料与方法 | 第68-70页 |
| ·材料 | 第68页 |
| ·重组质粒pBacPAK-His(1)-WSSV ORF147的构建 | 第68-70页 |
| 2 结果和分析 | 第70页 |
| 3 讨论 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-71页 |
| 附录1 缩略词表 | 第71-72页 |
| 附录2 质粒图谱 | 第72-75页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 详细摘要 | 第77-79页 |
