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黑麦草离体再生体系的建立和基因枪法介导的遗传转化研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
缩写表第8-10页
I 文献综述第10-29页
 1. 草坪草离体再生体系的研究进展第11-15页
   ·培养基第11页
   ·草坪草再生体系的建立第11-15页
     ·胚性愈伤组织的诱导第11-12页
     ·悬浮培养细胞第12-13页
     ·原生质体培养第13页
     ·花药培养第13-14页
     ·茎尖培养第14-15页
 2. 草坪草遗传转化的主要方法第15-20页
   ·直接转化原生质体第15页
   ·基因枪转化法第15-18页
   ·农杆菌转化法第18-19页
   ·硅碳纤维介导法第19页
   ·外源基因的表达调控第19-20页
 3. 草坪草遗传转化中转基因细胞或植株的筛选和鉴定第20-22页
   ·报告基因第20-21页
   ·选择标记基因第21-22页
   ·转基因草坪草的分子生物学检测第22页
 4. 转基因技术在草坪草品种改良中的应用第22-26页
   ·利用转基因技术对草坪草非生物胁迫抗性的改良第22-24页
     ·抗渗透胁迫第22-23页
     ·抗离子胁迫第23页
     ·抗氧化胁迫第23页
     ·与非生物胁迫相关的转录因子第23-24页
   ·利用转基因技术对草坪草生物胁迫抗性的改良第24-25页
     ·对草坪草抗病性的改良第24页
     ·对草坪草抗虫性的改良第24-25页
   ·利用转基因技术对草坪草除草剂抗性的改良第25-26页
 5. 草坪草遗传转化中存在的主要问题和展望第26-27页
 6. 本实验的研究目的和意义第27-29页
II 材料与方法第29-39页
 1 黑麦草离体再生体系的建立第29-31页
   ·植物材料第29页
   ·培养基第29页
   ·黑麦草成熟胚离体再生体系的建立第29-30页
     ·黑麦草种子的消毒第29-30页
     ·胚性愈伤组织的诱导与继代第30页
       ·胚性愈伤组织的诱导第30页
       ·愈伤组织的继代第30页
     ·植株的再生第30页
     ·炼苗和移栽第30页
   ·除草剂梯度实验第30-31页
   ·数据统计第31页
 2. 基因枪法转化黑麦草的研究第31-36页
   ·植物材料第31页
   ·质粒的构建、提取第31-34页
     ·质粒的构造第31-33页
     ·质粒的提取第33-34页
     ·质粒的电泳检测及浓度测定第34页
   ·金粉的制备第34页
   ·材料的渗透处理和微弹轰击第34-36页
     ·材料的渗透处理第34页
     ·微弹的包被第34-35页
     ·愈伤组织的基因枪轰击过程第35-36页
   ·转化体的筛选和植株的再生第36页
 3. β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因表达分析第36-37页
   ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的瞬时表达分析第36页
   ·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因在转化植株中的表达分析第36-37页
 4. 再生植株的分子鉴定第37-39页
   ·黑麦草基因组DNA的提取第37页
   ·再生植株的PCR检测第37-39页
III 结果与分析第39-46页
 1. 黑麦草离体再生体系的建立第39-43页
   ·不同2,4-D浓度对愈伤组织形成的影响第39-41页
   ·不同6-BA浓度对愈伤组织分化的影响第41-42页
   ·再生植株的生根和移栽第42页
   ·筛选剂浓度测定实验第42-43页
 2. 用基因枪法转化黑麦草的研究第43-46页
   ·不同微弹用量和轰击次数对gus基因瞬间表达的影响第43-44页
   ·黑麦草转基因植株的PCR检测第44-45页
   ·转基因黑麦草的植株中β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的表达分析第45页
   ·基因枪轰击的次数及结果第45页
   ·除草剂涂抹转化植株实验第45-46页
IV 分析与讨论第46-49页
 1. 黑麦草离体再生体系的建立第46页
 2. 用基因枪法将bar基因导入黑麦草中的研究第46-49页
参考文献第49-59页
附录第59-61页
图版说明第61-64页
 图版I第62-63页
 图版II第63-64页
致谢第64页

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