摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
缩写表 | 第8-10页 |
I 文献综述 | 第10-29页 |
1. 草坪草离体再生体系的研究进展 | 第11-15页 |
·培养基 | 第11页 |
·草坪草再生体系的建立 | 第11-15页 |
·胚性愈伤组织的诱导 | 第11-12页 |
·悬浮培养细胞 | 第12-13页 |
·原生质体培养 | 第13页 |
·花药培养 | 第13-14页 |
·茎尖培养 | 第14-15页 |
2. 草坪草遗传转化的主要方法 | 第15-20页 |
·直接转化原生质体 | 第15页 |
·基因枪转化法 | 第15-18页 |
·农杆菌转化法 | 第18-19页 |
·硅碳纤维介导法 | 第19页 |
·外源基因的表达调控 | 第19-20页 |
3. 草坪草遗传转化中转基因细胞或植株的筛选和鉴定 | 第20-22页 |
·报告基因 | 第20-21页 |
·选择标记基因 | 第21-22页 |
·转基因草坪草的分子生物学检测 | 第22页 |
4. 转基因技术在草坪草品种改良中的应用 | 第22-26页 |
·利用转基因技术对草坪草非生物胁迫抗性的改良 | 第22-24页 |
·抗渗透胁迫 | 第22-23页 |
·抗离子胁迫 | 第23页 |
·抗氧化胁迫 | 第23页 |
·与非生物胁迫相关的转录因子 | 第23-24页 |
·利用转基因技术对草坪草生物胁迫抗性的改良 | 第24-25页 |
·对草坪草抗病性的改良 | 第24页 |
·对草坪草抗虫性的改良 | 第24-25页 |
·利用转基因技术对草坪草除草剂抗性的改良 | 第25-26页 |
5. 草坪草遗传转化中存在的主要问题和展望 | 第26-27页 |
6. 本实验的研究目的和意义 | 第27-29页 |
II 材料与方法 | 第29-39页 |
1 黑麦草离体再生体系的建立 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29页 |
·培养基 | 第29页 |
·黑麦草成熟胚离体再生体系的建立 | 第29-30页 |
·黑麦草种子的消毒 | 第29-30页 |
·胚性愈伤组织的诱导与继代 | 第30页 |
·胚性愈伤组织的诱导 | 第30页 |
·愈伤组织的继代 | 第30页 |
·植株的再生 | 第30页 |
·炼苗和移栽 | 第30页 |
·除草剂梯度实验 | 第30-31页 |
·数据统计 | 第31页 |
2. 基因枪法转化黑麦草的研究 | 第31-36页 |
·植物材料 | 第31页 |
·质粒的构建、提取 | 第31-34页 |
·质粒的构造 | 第31-33页 |
·质粒的提取 | 第33-34页 |
·质粒的电泳检测及浓度测定 | 第34页 |
·金粉的制备 | 第34页 |
·材料的渗透处理和微弹轰击 | 第34-36页 |
·材料的渗透处理 | 第34页 |
·微弹的包被 | 第34-35页 |
·愈伤组织的基因枪轰击过程 | 第35-36页 |
·转化体的筛选和植株的再生 | 第36页 |
3. β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因表达分析 | 第36-37页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的瞬时表达分析 | 第36页 |
·β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因在转化植株中的表达分析 | 第36-37页 |
4. 再生植株的分子鉴定 | 第37-39页 |
·黑麦草基因组DNA的提取 | 第37页 |
·再生植株的PCR检测 | 第37-39页 |
III 结果与分析 | 第39-46页 |
1. 黑麦草离体再生体系的建立 | 第39-43页 |
·不同2,4-D浓度对愈伤组织形成的影响 | 第39-41页 |
·不同6-BA浓度对愈伤组织分化的影响 | 第41-42页 |
·再生植株的生根和移栽 | 第42页 |
·筛选剂浓度测定实验 | 第42-43页 |
2. 用基因枪法转化黑麦草的研究 | 第43-46页 |
·不同微弹用量和轰击次数对gus基因瞬间表达的影响 | 第43-44页 |
·黑麦草转基因植株的PCR检测 | 第44-45页 |
·转基因黑麦草的植株中β-葡糖醛酸糖苷酶(gus)基因的表达分析 | 第45页 |
·基因枪轰击的次数及结果 | 第45页 |
·除草剂涂抹转化植株实验 | 第45-46页 |
IV 分析与讨论 | 第46-49页 |
1. 黑麦草离体再生体系的建立 | 第46页 |
2. 用基因枪法将bar基因导入黑麦草中的研究 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-59页 |
附录 | 第59-61页 |
图版说明 | 第61-64页 |
图版I | 第62-63页 |
图版II | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |