| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一部分 综述:染色质重构及人Brg1蛋白质生物学功能 | 第12-49页 |
| 第一章 真核生物的染色质重构 | 第12-26页 |
| 1.染色质重构的定义 | 第12-13页 |
| 2.ATP依赖的染色质重构复合物至少可分为四类 | 第13-18页 |
| ·SWI2/SNF2亚类 | 第14-16页 |
| ·ISWI亚类 | 第16页 |
| ·Mi-2亚类 | 第16-17页 |
| ·DOMINO亚类 | 第17页 |
| ·INO80复合物 | 第17-18页 |
| 3.ATP依赖的染色质重构机理 | 第18-22页 |
| ·染色质重构复合物与DNA和核小体的结合 | 第18-19页 |
| ·ATP依赖的核小体解聚 | 第19-20页 |
| ·ATP依赖的染色质重构 | 第20-22页 |
| 4.染色质重构复合物在细胞周期中的作用 | 第22-23页 |
| 5.染色质重构复合物在启动子的定位 | 第23-26页 |
| 第二章 组蛋白密码 | 第26-34页 |
| 1.表观遗传 | 第26页 |
| 2.组蛋白的化学修饰 | 第26-29页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第28页 |
| ·组蛋白甲基化 | 第28页 |
| ·组蛋白磷酸化 | 第28-29页 |
| ·组蛋白的泛素化 | 第29页 |
| 3.组蛋白密码 | 第29-31页 |
| 4.组蛋白密码的解读 | 第31-32页 |
| 5.乙酰化的生物学功能 | 第32-34页 |
| 第三章 人Brg1的生物学功能 | 第34-42页 |
| 1.hBrg1在细胞周期调控中的作用 | 第34-37页 |
| 2.Brg1在肿瘤发生中的作用 | 第37-38页 |
| ·Brg1与肺癌 | 第38页 |
| ·Brg1与乳腺癌 | 第38页 |
| 3.Brg1在发育和分化中的作用 | 第38-42页 |
| ·Brg1与肌肉细胞的发育与分化 | 第38-40页 |
| ·Brg1与神经细胞的发育与分化 | 第40-41页 |
| ·Brg1与淋巴细胞的发育与分化 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 第二部分 人Brg1 Bromodomain结构域的溶液结构及其与乙酰化组蛋白相互作用的研究 | 第49-99页 |
| 第四章 Brg1 Bromodomain简介 | 第49-56页 |
| 1.人Brg1蛋白质 | 第49页 |
| 2.Bromodomain的分类 | 第49-50页 |
| 3.Bromodomain的结构 | 第50-51页 |
| 4.Bromodomain是乙酰化赖氨酸结合结构域 | 第51页 |
| 5.Bromodomain的配基选择性 | 第51-53页 |
| 6.Bromodomain的生物学功能 | 第53-54页 |
| 7.染色质重构复合物和组蛋白乙酰化复合物(HATs) | 第54-55页 |
| 8.本研究课题的内容与意义 | 第55-56页 |
| 第五章 材料和方法 | 第56-76页 |
| 1.人Brg1蛋白质Bromodomain结构域基因的亚克隆 | 第56-60页 |
| ·Brg1 Bromodomain基因的引物设计及PCR扩增 | 第56-57页 |
| ·PCR产物胶回收 | 第57页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第57-58页 |
| ·重组Bromodomain-pGEM-T质粒的构建与扩增 | 第58-59页 |
| ·载体pET-22b(+)的中量制备(碱裂解法) | 第59-60页 |
| ·人Brg1 Bromodomain表达质粒(BD-pET-22b)的构建 | 第60页 |
| 2.人Brg1 Bromodomain结构域的表达与纯化 | 第60-61页 |
| 3.蛋白质分子量鉴定 | 第61-63页 |
| ·%SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第61-62页 |
| ·小肽电泳 | 第62-63页 |
| 4.蛋白质浓度的测定 | 第63页 |
| 5.圆二色光谱(CD) | 第63页 |
| 6.多肽合成与纯化 | 第63-64页 |
| 7.NMR波谱解析人Brg1 Bromodomain结构域的三维溶液空间结构 | 第64-74页 |
| ·~(15)N-标记和~(15)N/~(13)C双标记Bromodomain结构域的样品制备 | 第64-65页 |
| ·NMR实验与数据变换 | 第65-69页 |
| ·主链顺序认证及侧链化学位移的获得 | 第69-71页 |
| ·二级结构的确定 | 第71-72页 |
| ·结构计算 | 第72-74页 |
| 8.化学位移干扰实验 | 第74-75页 |
| 9.人Brg1 Bromodomain与乙酰化H3-K14的分子动力学模拟 | 第75页 |
| 10.Brg1 Bromodomain突变体的制备 | 第75-76页 |
| 第六章 实验结果与讨论 | 第76-97页 |
| 1.Brg1 Bromodomain的基因克隆和表达载体构建 | 第76页 |
| 2.Brg1 Bromodomain结构域的表达和纯化 | 第76-77页 |
| 3.Brg1 Bromodomain蛋白质的稳定性研究 | 第77-79页 |
| 4.NMR波谱解析人Brg1 Bromodomain蛋白质的三维溶液结构 | 第79-85页 |
| ·Brg1 Bromodomain主链和侧链的化学位移认证 | 第79-81页 |
| ·Brg1 Bromodomain的氢氘交换实验和二级结构预测 | 第81-82页 |
| ·Bromodomain的蛋白质的结构计算 | 第82-85页 |
| 5.Brg1 Bromodomain的结构描述 | 第85-87页 |
| 6.Brg1 Bromodomain与其它Bromodomain的结构比较 | 第87-88页 |
| 7.Brg1 Bromodomain与乙酰化组蛋白多肽的结合 | 第88-92页 |
| 8.Brg1 Bromodomain与H3-AcK14的复合物模型 | 第92-93页 |
| 9.Brg1 Bromodomain与乙酰化组蛋白的突变研究 | 第93-95页 |
| 10.讨论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 发表论文 | 第100页 |
| 学术会议 | 第100页 |
