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水稻新型Ac/Ds标签突变体库的构建与分析

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
缩略词表第12-14页
第一章 文献综述第14-35页
   ·水稻基因组学研究第14-18页
     ·水稻结构基因组学研究第14-16页
       ·水稻高密度遗传图谱和物理图谱第14-15页
       ·水稻基因组测序进展第15-16页
     ·水稻功能基因组学研究第16-18页
       ·水稻功能基因组学研究内容第16页
       ·水稻功能基因组学研究策略第16-18页
   ·研究植物功能基因组的几种突变体库第18-21页
     ·构建突变体库的意义第18-19页
     ·突变体库的种类及各自的特点第19-21页
       ·自发突变体库及其特点第20页
       ·理化诱变突变体库及其特点第20页
       ·插入突变体库及其特点第20-21页
   ·Ac/Ds标签系统研究进展第21-34页
     ·植物转座子概况第21-26页
       ·DNA介导的转座元件类型、结构及特点第22-23页
       ·逆转座子类型、结构及特点及生物学意义第23-26页
     ·Ac/Ds结构及利用该系统克隆的基因第26-28页
     ·Ac/Ds标签系统的转座行为及其插入突变群体第28-34页
       ·Ac/Ds标签转化载体的改良和完善第28-30页
       ·Ac/Ds系统的转座行为第30-32页
       ·转座元件活性的恢复第32页
       ·转座距离和转座热点问题第32-33页
       ·插入突变体库容量及插入突变体的表型问题第33-34页
   ·本研究的目的意义第34-35页
第二章 水稻大规模Ds插入突变体库的构建第35-59页
   ·引言第35-36页
   ·材料与方法第36-43页
     ·材料第36-38页
       ·植物材料第36页
       ·本试验所用转化载体第36-38页
     ·实验方法第38-43页
       ·Ac和Ds转基因株系的拷贝数的Southern杂交分析第38-39页
       ·水稻基因组DNA的微量提取第39页
       ·PCR检测第39-41页
       ·Basta检测第41页
       ·旁测序列分析第41-43页
       ·GUS表达分析第43页
       ·全基因组甲基化分析第43页
       ·序列分析软件或工具第43页
   ·结果第43-56页
     ·组配杂交组合的Ac和Ds转基因亲本系的拷贝数第43-44页
     ·F1代植株Ds元件的转座行为第44-45页
     ·F2代Ds插入标签群体的产生及Ds元件转座行为第45-50页
       ·F2植株田间Basta选择及PCR鉴定第45-47页
       ·F2插入标签群体及其转座频率第47-50页
     ·不同的杂交组合方式及Ac亲本系的拷贝数对Ds转座频率的影响第50-51页
     ·Ds旁测序列标签的定位与分析第51-54页
     ·GUS在插入标签系中的表达模式第54-56页
   ·讨论第56-59页
     ·实用的、高效的大规模构建水稻插入突变体库的Ac/Ds标签系统第56-57页
     ·转座元件的失活第57-58页
     ·转座发生的时间及插入位点在水稻基因组中的分布第58-59页
第三章 Ac/Ds标签系统产生的突变体及分析第59-76页
   ·引言第59页
   ·材料与方法第59-62页
     ·材料第59页
     ·方法第59-62页
       ·突变体的形态观察第59页
       ·水稻基因DAN的提取第59-60页
       ·突变体与野生型Ac及Ds元件的PCR检测第60页
       ·OsPI-PLC2标签系旁测序列的PCR验证第60页
       ·植物材料的诱导处理第60-61页
       ·GA3处理第61页
       ·植株总RNA的提取第61页
       ·反转录PCR反应(RT-PCR)第61-62页
       ·序列分析软件或工具第62页
   ·结果第62-73页
     ·Ac/Ds标签系统所产生的突变体第62-65页
     ·F2代突变体的表型及农艺性状调查第65页
     ·一个矮杆卷叶突变体的遗传及生理的初步分析第65-68页
       ·矮杆卷叶突变体的发现及表型第65-66页
       ·矮杆卷叶突变体初步遗传分析第66-67页
       ·矮杆卷叶突变体对外源激素GA3的反应第67-68页
     ·一个表型无明显变化插入标签系OsPI-PLC2的反向遗传学分析第68-73页
       ·标签系OsPI-PLC2旁测序列及插入位点第68-69页
       ·标签系OsPI-PLC2插入位点的验证第69-70页
       ·OsPI-PLC2基因所编码蛋白质及同源性比较第70-72页
       ·OsPI-PLC2基因的表达第72-73页
   ·讨论第73-76页
     ·Ac/Ds标签系统产生可见突变体频率问题第73页
     ·反向遗传学在Ac/Ds标签系统中的应用第73-74页
     ·Ds标签突变体的鉴定第74页
     ·OsPI-PLC2插入突变体及水稻PI-PLC基因功能第74-76页
第四章 进一步研究计划第76-77页
第五章 全文结论第77-78页
参考文献第78-94页
附录 主要试剂配方第94-97页
致谢第97-98页
作者简历第98页

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