摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-26页 |
·木霉菌研究进展 | 第11-15页 |
·木霉菌在生防中的作用 | 第11-12页 |
·木霉菌分子生物学研究进展 | 第12-15页 |
·研究厚垣孢子萌发相关基因的方法 | 第15-18页 |
·mRNA差异显示技术(DDRT-PCR) | 第15-16页 |
·抑制性消减杂交(SSH) | 第16-17页 |
·cDNA代表性差异分析 | 第17页 |
·基因表达系列分析技术(serial analysis of gene expression,SAGE) | 第17-18页 |
·转座子标签技术 | 第18页 |
·cDNA扩增片段长度多态性技术(cDNA-AFLP) | 第18页 |
·cDNA-AFLP技术简介 | 第18-21页 |
·cDNA-AFLP技术的基本原理和方法 | 第19页 |
·cDNA-AFLP技术的特点 | 第19-20页 |
·cDNA-AFLP技术的应用及发展前景 | 第20-21页 |
·生物信息学的应用 | 第21-24页 |
·生物信息学数据库 | 第22-23页 |
·生物信息学在基因研究中的应用 | 第23-24页 |
·研究目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 利用CDNA-AFLP技术分析产生厚垣孢子相关基因 | 第26-36页 |
·实验材料 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·总RNA的提取和cDNA的制备 | 第27-28页 |
·cDNA-AFLP分析 | 第28-30页 |
·聚丙烯酸胺凝胶中差异片段的回收 | 第30页 |
·二次PCR扩增 | 第30-31页 |
·PCR产物的纯化 | 第31页 |
·反向Northern杂交 | 第31-32页 |
·Northern杂交 | 第32-34页 |
·特异片段的连接、转化 | 第34-35页 |
·阳性克隆的鉴定菌液PCR检测 | 第35页 |
·序列测定 | 第35-36页 |
第三章 结果与分析 | 第36-43页 |
·木霉菌丝的培养 | 第36页 |
·木霉菌丝总RNA的提取 | 第36-37页 |
·双链cDNA的合成 | 第37页 |
·cDNA酶切片段的预扩增 | 第37页 |
·选择性扩增 | 第37-39页 |
·差异条带回收 | 第39页 |
·二次 PCR扩增 | 第39页 |
·反向NORTHERN杂交 | 第39-40页 |
·差异片段的克隆 | 第40页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第40-41页 |
·差异片段的序列分析与比较 | 第41-42页 |
·NORTHERN杂交 | 第42-43页 |
第四章 讨论 | 第43-46页 |
·木霉菌菌丝总 RNA的提取方法 | 第43页 |
·木霉菌cDNA-AFLP技术中预扩增及选择性扩增条件的筛选 | 第43页 |
·二次扩增结果 | 第43-44页 |
·REVERSE NORTHERN杂交 | 第44页 |
·木霉菌厚垣孢子生成相关特异cDNA片段序列分析 | 第44-45页 |
·展望 | 第45-46页 |
第五章 全文结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简历 | 第54-55页 |
附录: 主要试剂配方 | 第55-58页 |