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温氏附红细胞体对牛血液生化指标的影响及双抗体夹心ELISA、PCR诊断方法的建立

1 引言第1-13页
   ·病原特性第9-10页
     ·附红细胞体的分类第9页
     ·形态与结构第9-10页
     ·生物学特性第10页
   ·流行病学第10页
   ·诊断方法第10-13页
     ·直接镜检第10-11页
     ·血清学诊断第11页
     ·分子生物学诊断第11-13页
2 材料与方法第13-24页
   ·材料及溶液配制第13-16页
     ·实验动物第13页
     ·血样来源第13页
     ·血浆生化指标测定所需材料第13页
     ·抗体和免疫球蛋白IgG制备所需主要试剂第13页
     ·酶标抗体制备及双抗体夹心ELISA所需主要试剂第13页
     ·PCR所需主要化学试剂第13-14页
     ·PCR所需主要生物学试剂第14页
     ·所需主要仪器第14页
     ·分析软件的使用第14-15页
     ·主要溶液的配制第15-16页
   ·附红细胞体形态学观察及其自然感染奶牛血液学指标的研究第16-17页
     ·附红细胞体形态学观察第16-17页
     ·自然感染附红细胞体奶牛血液生化指标的检测第17页
   ·双抗体夹心ELISA诊断方法的建立第17-20页
     ·温氏附红细胞体抗原的制备第17页
     ·阴性血清的制备第17-18页
     ·阳性血清的制备第18页
     ·阳性血清效价的测定第18页
     ·辛酸硫酸铵法纯化IgG第18页
     ·辣根过氧化物酶(HRP)标记IgG抗体第18-19页
     ·双抗体夹心ELISA的主要操作程序第19页
     ·双抗体夹心ELISA试验条件的选择第19-20页
     ·双抗体夹心ELISA的特异性试验第20页
     ·双抗体夹心ELISA法的初步应用第20页
   ·聚合酶链式反应检测温氏附红细胞体的研究第20-24页
     ·引物的设计与合成第20页
     ·温氏附红细胞体的分离纯化第20-21页
     ·模板的制备第21页
     ·PCR反应体系第21-22页
     ·PCR扩增产物的检测第22页
     ·扩增产物的酶切鉴定第22页
     ·敏感性试验第22页
     ·特异性试验第22页
     ·重复性试验第22-23页
     ·扩大性试验第23-24页
3 结果第24-34页
   ·附红细胞体形态学观察及其自然感染奶牛血液生化指标的研究第24-26页
     ·附红细胞体形态学观察结果第24-25页
     ·自然感染附红细胞体奶牛血液生化指标的检测结果第25-26页
   ·双抗体夹心ELISA诊断方法的建立第26-30页
     ·阳性血清效价的测定结果第26页
     ·免疫球蛋白IgG含量的测定结果第26页
     ·酶标抗体的制备结果第26页
     ·双抗体夹心ELISA试验条件的选择结果第26-29页
     ·双抗体夹心ELISA的特异性试验结果第29-30页
     ·双抗体夹心ELISA法初步应用结果第30页
   ·聚合酶链式反应检测温氏附红细胞体的研究第30-34页
     ·模板DNA提取的结果第30-31页
     ·PCR扩增结果第31页
     ·PCR扩增产物的酶切鉴定结果第31页
     ·敏感性试验结果第31-32页
     ·特异性试验结果第32页
     ·重复性试验结果第32-33页
     ·扩大性试验结果第33-34页
4 讨论第34-38页
   ·附红细胞体形态学观察及其自然感染奶牛血液生化指标的研究第34页
   ·免疫球蛋白的提取和酶标抗体的制备第34-35页
   ·双抗体夹心ELISA方法的建立第35-36页
   ·聚合酶链式反应检测温氏附红细胞体的研究第36-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-44页
在读期间发表的学术论文第44-45页
作者简历第45-46页
致谢第46-49页

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