| 第一篇 文献综述 | 第1-20页 |
| 一、关于ECM | 第9-11页 |
| ECM 的成分 | 第9-11页 |
| ECM 的功能 | 第11页 |
| 二、关于MMPs | 第11-16页 |
| MMPs 的分类 | 第12页 |
| MMPs 的结构 | 第12页 |
| MMPs 的活化 | 第12-13页 |
| MMPs 的调控 | 第13-14页 |
| MMPs 的功能 | 第14-16页 |
| 三、关于MMP-26 | 第16-20页 |
| 独特的结构和活化机制 | 第16-17页 |
| 底物特异性 | 第17页 |
| 广泛的表达和复杂的功能推测 | 第17-18页 |
| MMP-26的调控 | 第18-20页 |
| 第二篇 前言 | 第20-22页 |
| 第三篇 材料与方法 | 第22-36页 |
| 一、材料 | 第22-24页 |
| (一) 主要试剂 | 第22-23页 |
| (二) 主要仪器 | 第23-24页 |
| (三) 细胞株 | 第24页 |
| (四) 实验动物 | 第24页 |
| (五) 人乳腺组织标本 | 第24页 |
| 二、方法 | 第24-36页 |
| (一) MMP-26 基因的转染与鉴定 | 第24-29页 |
| 1 转染 | 第24-25页 |
| 2 RT-PCR | 第25-27页 |
| 3 细胞免疫荧光检测 | 第27页 |
| 4 流式细胞术 | 第27-28页 |
| 5 明胶酶谱分析 | 第28-29页 |
| (二) MMP-26 对细胞生物学性状的影响 | 第29-30页 |
| 1 透射电子显微镜观察细胞形态 | 第29-30页 |
| 2 生长曲线测定 | 第30页 |
| 3 细胞周期检测 | 第30页 |
| (三) 体外检测 MMP-26 对肿瘤细胞生物学行为的影响 | 第30-33页 |
| 1 肿瘤细胞在 ECM 上粘附的测定 | 第30-31页 |
| 2 肿瘤细胞迁移能力的检测(细胞划痕法) | 第31页 |
| 3 Boyden 小室迁移侵袭实验 | 第31-33页 |
| (四) 体内实验检测 MMP-26 对肿瘤细胞生长的影响 | 第33-34页 |
| 1 人乳腺癌裸鼠异种移植模型 | 第33页 |
| 2 Balb/c 小鼠肾被膜下移植侵袭模型 | 第33-34页 |
| 3 裸鼠尾静脉注射人工转移模型 | 第34页 |
| 4 体内肿瘤细胞诱导血管生成模型 | 第34页 |
| (五) 免疫组织化学染色检测 MMP-26 在人乳腺良恶性肿瘤中的表达及其与ER关系的研究 | 第34-35页 |
| 1 免疫组织化学染色步骤 | 第34-35页 |
| 2 结果判定 | 第35页 |
| 3 结果评分标准 | 第35页 |
| (六) 统计学处理 | 第35-36页 |
| 第四篇 结果 | 第36-58页 |
| 一、MMP-26 全长基因在MCF-7 细胞株中的稳定转染、表达及阳性克隆的筛选与鉴定 | 第36-40页 |
| 转染细胞株的选择 | 第36-37页 |
| MMP-26 基因的转染 | 第37页 |
| RT-PCR | 第37页 |
| 细胞免疫荧光检测 | 第37-38页 |
| 流式细胞术 | 第38-39页 |
| 明胶酶谱分析 | 第39-40页 |
| 二、MMP-26 的蛋白表达对MCF-7 细胞生物学性状的影响 | 第40-43页 |
| 转染细胞的形态改变 | 第40页 |
| 转染细胞的超微结构改变 | 第40-42页 |
| 生长曲线测定 | 第42页 |
| 流式细胞术检测细胞增殖周期 | 第42-43页 |
| 三、体外实验检测 MMP-26 对肿瘤细胞生物学行为的影响 | 第43-46页 |
| 肿瘤细胞的粘附与铺展 | 第43-44页 |
| 肿瘤细胞迁移划痕实验 | 第44页 |
| Boyden 小室法检测肿瘤细胞在 Matrigel 中的迁移和侵袭能力 | 第44-46页 |
| 四、体内实验检测 MMP-26 对乳腺癌生物学行为的影响 | 第46-54页 |
| 人乳腺癌裸小鼠异种移植模型 | 第46-49页 |
| 小鼠肾包膜下移植侵袭模型 | 第49-51页 |
| 人工转移模型 | 第51-52页 |
| 体内肿瘤细胞诱导血管生成模型 | 第52-54页 |
| 五、MMP-26 在人乳腺良、恶性组织中的表达及其与部分临床指标的关系 | 第54-58页 |
| MMP-26 蛋白在多种乳腺组织中的表达 | 第54-55页 |
| MMP-26 蛋白的表达与部分临床特征之间的关系 | 第55-56页 |
| MMP-26 蛋白表达与ER 表达的相关性分析 | 第56-58页 |
| 第五篇 讨论 | 第58-66页 |
| 一、MMP-26 在真核细胞中的克隆表达及意义 | 第59-60页 |
| 二、MMP-26 对乳腺癌细胞生物学性状及肿瘤生物学行为的影响 | 第60-63页 |
| 1. MMP-26 促进肿瘤细胞增殖,增加其恶性表型 | 第60-61页 |
| 2. MMP-26 促进肿瘤细胞粘附并穿透基底膜,在乳腺癌细胞早期侵袭和局部浸润中发挥重要作用 | 第61-62页 |
| 3. MMP-26 能够有效诱导肿瘤血管的新生 | 第62-63页 |
| 三、MMP-26 可能成为判断乳腺癌恶性程度、侵袭能力的检测指标之一,并进而判断乳腺癌患者的预后 | 第63-66页 |
| 1. MMP-26 可能成为判断乳腺癌恶性程度、侵袭和转移能力的检测指标之一,并进而判断乳腺癌患者的预后 | 第63-64页 |
| 2. MMP-26 对乳腺癌淋巴结转移的影响 | 第64页 |
| 3. ER 可能参与MMP-26 表达的调控 | 第64-66页 |
| 第六篇 结论 | 第66-68页 |
| 第七篇 参考文献 | 第68-73页 |
| 第八篇 攻博期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 中文摘要 | 第74-81页 |
| Abstract | 第81-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
