| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-12页 |
| Abstract | 第12-16页 |
| 1 前言 | 第16-37页 |
| ·问题的提出 | 第16页 |
| ·前人研究进展 | 第16-31页 |
| ·柑橘遗传转化的研究进展 | 第16-25页 |
| ·转入基因的类型 | 第17-19页 |
| ·转基因的方法 | 第19页 |
| ·所用的外植体类型 | 第19-21页 |
| ·使用的菌株类型 | 第21-22页 |
| ·筛选剂的应用 | 第22页 |
| ·报告基因的应用 | 第22页 |
| ·培养条件 | 第22-23页 |
| ·转基因植株的鉴定方法 | 第23-25页 |
| ·开花调节基因及其研究进展 | 第25-31页 |
| ·植物开花途径及相关基因 | 第25-27页 |
| ·花分生组织特异基因 | 第27-30页 |
| ·花序分生组织特异基因 | 第30-31页 |
| ·开花整合基因 | 第31页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第31-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-51页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·转化受体材料 | 第37-38页 |
| ·供试农杆菌菌株和质粒 | 第38页 |
| ·转化实验所用培养基配方 | 第38-40页 |
| ·主要的生化试剂: | 第40页 |
| ·方法 | 第40-51页 |
| ·柑橘愈伤组织总多酚和PPO粗提液的提取 | 第40-41页 |
| ·总酚提取 | 第40页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)酶液制备 | 第40-41页 |
| ·实生苗上胚轴切段再生实验 | 第41页 |
| ·不同激素组合与提取物对冰糖橙再生芽的影响 | 第41页 |
| ·不同切割方式对冰糖橙再生芽的影响 | 第41页 |
| ·不同柑橘上胚轴再生试验 | 第41页 |
| ·柑橘外植体材料对Km的敏感性试验 | 第41-42页 |
| ·胚性愈伤组织对Km的敏感性试验 | 第41-42页 |
| ·上胚轴切段对Km的敏感性试验 | 第42页 |
| ·柑橘胚性愈伤组织对Cef的敏感性试验 | 第42页 |
| ·农杆菌EHA105菌株增殖曲线的测定 | 第42页 |
| ·根癌农杆菌介导的柑橘遗传转化 | 第42-44页 |
| ·柑橘外植体材料的准备 | 第42页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第42-43页 |
| ·侵染 | 第43页 |
| ·共培养 | 第43页 |
| ·不同共培养温度对转化率的影响 | 第43页 |
| ·TDZ在愈伤组织转化中的作用 | 第43页 |
| ·筛选培养、再生 | 第43-44页 |
| ·冰糖橙转AP1基因再生芽的培养 | 第44页 |
| ·嫁接及移栽 | 第44页 |
| ·GUS染色-组织化学分析 | 第44-45页 |
| ·GFP荧光检测 | 第45页 |
| ·PCR检测 | 第45-48页 |
| ·引物设计 | 第45-46页 |
| ·PCR反应体系及扩增程序 | 第46-47页 |
| ·DNA提取 | 第47-48页 |
| ·Southern blotting检测 | 第48-49页 |
| ·RNA提取及cDNA第一链的合成 | 第49-50页 |
| ·植物总RNA提取 | 第49-50页 |
| ·总RNA的浓度及琼脂糖凝胶检测 | 第50页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第50页 |
| ·目的基因在植物细胞不同发育时期的表达谱分析 | 第50页 |
| ·转基因植株和未转化植株形态比较 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-99页 |
| ·柑橘实生苗上胚轴切段的再生 | 第51-53页 |
| ·不同培养基配方对再生芽的影响 | 第51页 |
| ·不同切割方式对再生芽的影响 | 第51-53页 |
| ·其他柑橘基因型上胚轴再生能力的测试 | 第53页 |
| ·受体材料对抗生素的敏感实验 | 第53-55页 |
| ·柑橘胚性愈伤组织对卡那霉素(Km)的敏感性试验 | 第53-54页 |
| ·柑橘胚性愈伤组织对头孢霉素(Cef)的敏感性试验 | 第54-55页 |
| ·柑橘上胚轴切段对卡那霉素(Km)的敏感性试验 | 第55页 |
| ·农杆菌EHA105菌株增殖曲线的测定 | 第55页 |
| ·柑橘愈伤组织遗传转化条件的优化 | 第55-58页 |
| ·侵染时离心对转化的影响 | 第55-56页 |
| ·不同共培养温度对转化的影响 | 第56页 |
| ·TDZ在愈伤组织转化中的作用 | 第56-58页 |
| ·TDZ对愈伤组织生长的影响 | 第56-57页 |
| ·共培养培养基中附加TDZ对转化率的影响 | 第57页 |
| ·筛选培养基中附加TDZ对转化的影响 | 第57-58页 |
| ·柑橘胚性愈伤组织转化 | 第58-87页 |
| ·不同基因型柑橘愈伤组织转化特性的研究 | 第59-66页 |
| ·转化子的生长—褐化与再生 | 第59-60页 |
| ·基因型及愈伤组织的褐化对转化率的影响 | 第60-64页 |
| ·柑橘胚性愈伤组织保存年限对转化的影响 | 第64页 |
| ·胚性愈伤组织体胚发生能力对转化的影响 | 第64-65页 |
| ·不同柑橘胚性愈伤组织转化GFP的瞬时表达 | 第65-66页 |
| ·转基因冰糖橙愈伤组织的再生与鉴定 | 第66-72页 |
| ·转AP1基因植株再生与鉴定 | 第66-70页 |
| ·转化LFY基因的植株再生与鉴定 | 第70-72页 |
| ·转基因椪柑胚性愈伤组织的再生及鉴定 | 第72-81页 |
| ·转AP1基因植株的再生与鉴定 | 第72-79页 |
| ·椪柑转LFY基因的植株再生与鉴定 | 第79-81页 |
| ·茶枝柑转化AP1基因的植株再生及鉴定 | 第81-83页 |
| ·胚状体的诱导及发育 | 第81-82页 |
| ·转化子的GUS组织化学染色分析 | 第82页 |
| ·转基因植株的再生及PCR鉴定 | 第82-83页 |
| ·转基因植株的Southern blotting检测 | 第83页 |
| ·改良橙与尾张杂种转AP1基因的植株再生及PCR鉴定 | 第83-84页 |
| ·Succari甜橙转AP1基因的植株再生 | 第84-85页 |
| ·南丰蜜橘转AP1基因抗性材料的获得及鉴定 | 第85-87页 |
| ·转化子的GUS组织化学染色 | 第85-86页 |
| ·转基因植株PCR鉴定 | 第86页 |
| ·Southern blotting检测结果 | 第86-87页 |
| ·柑橘实生苗上胚轴切段转基因研究 | 第87-99页 |
| ·实生苗上胚轴转基因的概况 | 第87-88页 |
| ·金柑转AP1基因植株的再生与鉴定 | 第88-94页 |
| ·金柑上胚轴转化特性的研究 | 第88-90页 |
| ·GUS染色揭示高频率的嵌合体再生 | 第90页 |
| ·金柑上胚轴切段转基因植株的再生 | 第90页 |
| ·转基因植株的PCR鉴定 | 第90-91页 |
| ·转基因植株的Southern blotting分析 | 第91-92页 |
| ·转基因植株的形态特征与生长状况 | 第92-93页 |
| ·外源AP1基因及内源开花相关基因的表达分析 | 第93-94页 |
| ·冰糖橙实生苗上胚轴切段转LFY基因植株的再生与鉴定 | 第94-97页 |
| ·冰糖橙转基因植株的再生 | 第94-95页 |
| ·转化子的GUS组织化学染色 | 第95页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第95-96页 |
| ·转基因植株的Southern blotting分析 | 第96页 |
| ·外源LFY基因与内源开花相关基因的表达分析 | 第96-97页 |
| ·山金柑转AP1基因芽的再生与鉴定 | 第97-99页 |
| ·转基因再生芽的生长 | 第97页 |
| ·转基因芽的GUS组织化学染色 | 第97-99页 |
| 4 讨论 | 第99-106页 |
| ·提高根癌农杆菌介导柑橘遗传转化率的方法 | 第99-103页 |
| ·选择容易转化的柑橘种类(基因型)对转化至关重要 | 第99-100页 |
| ·选择合适的外植体类型是转化成功的保证 | 第100-101页 |
| ·采用最佳的培养再生方式对获得转基因植株有重要影响 | 第101-103页 |
| ·转基因群体构建的必要性 | 第103页 |
| ·LFY、AP1基因对内源开花相关基因表达的影响 | 第103-104页 |
| ·开花基因在果树童期控制中的应用前景 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
| 在读期间发表及待发表的论文题录 | 第140页 |
