缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-37页 |
·玉米细胞质雄性不育及育性恢复的遗传基础研究 | 第12-23页 |
·玉米细胞质雄性不育的分类 | 第12-13页 |
·玉米细胞质雄性不育的分子生物学研究 | 第13-17页 |
·CMS育性恢复基因克隆及育性恢复机理的假说 | 第17-23页 |
·植物分子标记开发研究进展 | 第23-33页 |
·利用数据库序列信息和生物信息学手段开发新的分子标记 | 第24-27页 |
·利用分子生物学实验技术开发新的分子标记 | 第27-33页 |
·基因差异表达分析法 | 第33-36页 |
·差异显示PCR法 | 第33页 |
·消减杂交法 | 第33-34页 |
·基因芯片技术 | 第34-35页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第35-36页 |
·本研究的目的与意义 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-44页 |
·植物材料 | 第37页 |
·花粉育性鉴定 | 第37页 |
·玉米基因组总DNA的抽提纯化及DNA池的创建 | 第37页 |
·分子标记分析 | 第37-38页 |
·SSR标记分析 | 第37-38页 |
·RAPD标记分析 | 第38页 |
·AFLP标记分析 | 第38页 |
·AFLP标记向单位点PCR标记的转化 | 第38-40页 |
·目标差异片段的回收、克隆及测序 | 第38-40页 |
·SCAR标记的获得 | 第40页 |
·CAPS标记的获得 | 第40页 |
·遗传连锁分析 | 第40-41页 |
·幼穗小孢子及花粉的分离 | 第41页 |
·总RNA抽提及mRNA分离 | 第41页 |
·双链cDNA的合成 | 第41页 |
·cDNA-AFLP分析 | 第41-42页 |
·差异表达片段的回收、克隆及测序 | 第42页 |
·序列分析及引物设计 | 第42页 |
·全长cDNA的电子克隆及RT-PCR验证 | 第42-43页 |
·Real-time PCR | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-62页 |
·BC_1F_1群体花粉育性调查及遗传分析 | 第44页 |
·亲本S-Mo17~(rf3rf3)及S-Mo17~(Rf3Rf3)间多态性分子标记的筛选 | 第44-50页 |
·SSR标记的筛选 | 第44-45页 |
·RAPD标记的筛选 | 第45-46页 |
·AFLP标记的筛选 | 第46-47页 |
·AFLP标记向单位点PCR标记的转化 | 第47-50页 |
·遗传连锁分析 | 第50-51页 |
·基于cDNA-AFLP的近等基因系间不同组织相关基因的差异表达分析 | 第51-62页 |
·RNA的提取及双链cDNA的合成 | 第51-52页 |
·cDNA-AFLP筛选差异表达基因片段 | 第52-53页 |
·差异表达基因片段的回收、克隆和序列分析 | 第53-57页 |
·蛋白质降解相关基因的分析 | 第57-60页 |
·PPR相关基因表达分析 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-75页 |
·利用近等基因系及分离群体分组分析法筛选紧密连锁标记的有效性 | 第62页 |
·AFLP分析技术筛选紧密连锁分子标记的有效性 | 第62-65页 |
·AFLP与RAPD技术对筛选分子标记效率的比较 | 第62-63页 |
·AFLP低频酶切组合与高低频内切酶混合的比较 | 第63-64页 |
·对于AFLP标记转化为单位点PCR标记方法的探讨 | 第64-65页 |
·与恢复基因紧密连锁分子标记的应用价值 | 第65-68页 |
·分子标记辅助选择(MAS)选育恢复系的有效性探讨 | 第65-66页 |
·对标记SCARE12M7同时选择抗丝黑穗病和育性恢复性状潜力的探讨 | 第66-67页 |
·对利用单位点标记进行杂交种纯度鉴定的探讨 | 第67页 |
·利用Rf3紧密连锁标记染色体步移,实现图位克隆的可行性分析 | 第67-68页 |
·玉米S-CMS育性恢复机理探讨 | 第68-70页 |
·细胞凋亡抑制与育性恢复 | 第68-69页 |
·可育与败育花粉发育过程中PPR相关基因差异表达 | 第69-70页 |
·克隆Rf3基因的下一步工作建议 | 第70-75页 |
参考文献 | 第75-86页 |
附录1 玉米总DNA的提取及纯化 | 第86-87页 |
附录2 SSR分析操作方法及试剂配制 | 第87-91页 |
附录3 AFLP Procedure | 第91-95页 |
附录4 玉米雄花育性的分级标准 | 第95页 |
附录5 RNA and mRNA isolation | 第95-98页 |
附录6 Resume of author | 第98-99页 |
致谢 | 第99页 |