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表达phbCAB基因对兽疫链球菌中乳酸及透明质酸产量的影响

第一章 引言第1-30页
   ·透明质酸(HA)概述第9-18页
     ·透明质酸的结构和性质第9页
     ·透明质酸的分布第9-10页
     ·透明质酸的生物合成第10-12页
     ·透明质酸的应用第12-14页
     ·透明质酸的生产第14-15页
     ·代谢工程与透明质酸合成第15-18页
   ·聚羟基脂肪酸(PHA)概述第18-27页
     ·聚羟基脂肪酸的结构及分类第18-19页
     ·PHA 的研究历史第19-20页
     ·PHA 的性质和用途第20-22页
     ·PHA 的生物学功能第22页
     ·PHA 的生物合成第22-26页
     ·PHAs 的基因工程研究第26-27页
   ·课题研究目的,思路及新颖性第27-30页
第二章 材料与方法第30-40页
   ·材料和仪器第30-33页
     ·菌种和质粒第30页
     ·试剂第30-31页
     ·试剂盒第31页
     ·培养基第31-33页
     ·主要仪器第33页
   ·实验方法第33-40页
     ·菌种培养方法第33-34页
     ·质粒提取方法第34页
     ·基因组提取第34-35页
     ·感受态细胞制备第35-36页
     ·感受态细胞的电转化第36-37页
     ·酶活检测方法第37页
     ·细胞干重测定第37页
     ·透明质酸(HA)含量测定第37-38页
     ·发酵液中乳酸,乙酸含量测定第38-39页
     ·PHB 的检测第39-40页
第三章 兽疫链球菌hasB 基因的克隆和在大肠杆菌中的表达第40-45页
   ·兽疫链球菌hasB 基因的克隆第40-42页
     ·从基因组中获取包括hasB 的DNA 片段第40页
     ·hasB 编码区的确定第40-41页
     ·兽疫链球菌hasB 基因的进化树第41-42页
   ·兽疫链球菌hasB 基因在大肠杆菌中的表达第42-43页
     ·表达质粒的构建第42页
     ·hasB 基因的表达及其功能验证第42-43页
   ·结果与讨论第43-45页
第四章 在大肠杆菌中共表达PHA 合成基因和HA 合成基因第45-49页
   ·质粒的构建第45-47页
     ·表达phbCAB 基因的质粒pBHR68第45-46页
     ·表达hasABC 基因的质粒pHAS第46-47页
   ·pBHR68 和pHAS 向大肠杆菌的共转化第47-48页
   ·结果与讨论第48-49页
第五章 在兽疫链球菌中表达phbCAB 基因对乳酸和透明质酸合成的影响第49-63页
   ·质粒的构建第49-54页
     ·质粒pEUHB 的构建(图5.1)第49-51页
     ·质粒pEUHBNOI 的构建(图5.2)第51页
     ·质粒pEU308-phbA 的构建(图5.3)第51-52页
     ·质粒pEU308-pha 的构建(图5.4)第52页
     ·质粒pDUZ1-pha 的构建(图5.5)第52-53页
     ·质粒pEUPQRBCA 的构建(图5.6)第53-54页
   ·甘氨酸对兽疫链球菌ATCC39920 的影响第54-55页
   ·phbCAB 基因在兽疫链球菌中的表达验证第55-56页
   ·PHA 相关基因在大肠杆菌和兽疫链球菌表达对PHA 积累的影响第56-58页
     ·巨大芽孢杆菌phaRBC 操纵子的克隆及其表达效果第56-57页
     ·巨大芽孢杆菌phaRBC 和phaPQ 操纵子的共克隆及其表达效果第57-58页
   ·phbCAB 基因的表达在摇瓶培养中对兽疫链球菌的影响第58-59页
   ·phbCAB 基因的表达在发酵罐培养中对兽疫链球菌的影响第59-62页
   ·结果与讨论第62-63页
结论第63-64页
参考文献第64-71页
致谢第71-72页
附录A 克隆得到的Streptococcus zooepidemicus 的hasB 基因序列第72-73页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第73页

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