第一章 引言 | 第1-30页 |
·透明质酸(HA)概述 | 第9-18页 |
·透明质酸的结构和性质 | 第9页 |
·透明质酸的分布 | 第9-10页 |
·透明质酸的生物合成 | 第10-12页 |
·透明质酸的应用 | 第12-14页 |
·透明质酸的生产 | 第14-15页 |
·代谢工程与透明质酸合成 | 第15-18页 |
·聚羟基脂肪酸(PHA)概述 | 第18-27页 |
·聚羟基脂肪酸的结构及分类 | 第18-19页 |
·PHA 的研究历史 | 第19-20页 |
·PHA 的性质和用途 | 第20-22页 |
·PHA 的生物学功能 | 第22页 |
·PHA 的生物合成 | 第22-26页 |
·PHAs 的基因工程研究 | 第26-27页 |
·课题研究目的,思路及新颖性 | 第27-30页 |
第二章 材料与方法 | 第30-40页 |
·材料和仪器 | 第30-33页 |
·菌种和质粒 | 第30页 |
·试剂 | 第30-31页 |
·试剂盒 | 第31页 |
·培养基 | 第31-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-40页 |
·菌种培养方法 | 第33-34页 |
·质粒提取方法 | 第34页 |
·基因组提取 | 第34-35页 |
·感受态细胞制备 | 第35-36页 |
·感受态细胞的电转化 | 第36-37页 |
·酶活检测方法 | 第37页 |
·细胞干重测定 | 第37页 |
·透明质酸(HA)含量测定 | 第37-38页 |
·发酵液中乳酸,乙酸含量测定 | 第38-39页 |
·PHB 的检测 | 第39-40页 |
第三章 兽疫链球菌hasB 基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 | 第40-45页 |
·兽疫链球菌hasB 基因的克隆 | 第40-42页 |
·从基因组中获取包括hasB 的DNA 片段 | 第40页 |
·hasB 编码区的确定 | 第40-41页 |
·兽疫链球菌hasB 基因的进化树 | 第41-42页 |
·兽疫链球菌hasB 基因在大肠杆菌中的表达 | 第42-43页 |
·表达质粒的构建 | 第42页 |
·hasB 基因的表达及其功能验证 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43-45页 |
第四章 在大肠杆菌中共表达PHA 合成基因和HA 合成基因 | 第45-49页 |
·质粒的构建 | 第45-47页 |
·表达phbCAB 基因的质粒pBHR68 | 第45-46页 |
·表达hasABC 基因的质粒pHAS | 第46-47页 |
·pBHR68 和pHAS 向大肠杆菌的共转化 | 第47-48页 |
·结果与讨论 | 第48-49页 |
第五章 在兽疫链球菌中表达phbCAB 基因对乳酸和透明质酸合成的影响 | 第49-63页 |
·质粒的构建 | 第49-54页 |
·质粒pEUHB 的构建(图5.1) | 第49-51页 |
·质粒pEUHBNOI 的构建(图5.2) | 第51页 |
·质粒pEU308-phbA 的构建(图5.3) | 第51-52页 |
·质粒pEU308-pha 的构建(图5.4) | 第52页 |
·质粒pDUZ1-pha 的构建(图5.5) | 第52-53页 |
·质粒pEUPQRBCA 的构建(图5.6) | 第53-54页 |
·甘氨酸对兽疫链球菌ATCC39920 的影响 | 第54-55页 |
·phbCAB 基因在兽疫链球菌中的表达验证 | 第55-56页 |
·PHA 相关基因在大肠杆菌和兽疫链球菌表达对PHA 积累的影响 | 第56-58页 |
·巨大芽孢杆菌phaRBC 操纵子的克隆及其表达效果 | 第56-57页 |
·巨大芽孢杆菌phaRBC 和phaPQ 操纵子的共克隆及其表达效果 | 第57-58页 |
·phbCAB 基因的表达在摇瓶培养中对兽疫链球菌的影响 | 第58-59页 |
·phbCAB 基因的表达在发酵罐培养中对兽疫链球菌的影响 | 第59-62页 |
·结果与讨论 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
附录A 克隆得到的Streptococcus zooepidemicus 的hasB 基因序列 | 第72-73页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第73页 |