1 前言 | 第1-35页 |
·γ-亚麻酸的研究进展 | 第9-14页 |
·多不饱和脂肪酸的生物合成途径 | 第9-10页 |
·γ-亚麻酸的发现历史 | 第10-11页 |
·γ-亚麻酸及其代谢产物的生理功能 | 第11-12页 |
·γ-亚麻酸的生物资源 | 第12-14页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶的研究进展 | 第14-18页 |
·脂肪酸脱氢酶 | 第14-15页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因(Δ~6-fatty acid desaturase,D6D)的研究 | 第15-17页 |
·基因工程研究 | 第17-18页 |
·大豆研究进展 | 第18-26页 |
·大豆转基因的受体系统 | 第18-20页 |
·大豆遗传转化方法 | 第20-24页 |
·转基因大豆生产及其生物安全性评价 | 第24-26页 |
·标记基因的安全性问题 | 第26-32页 |
·选用安全的标记基因 | 第27-28页 |
·无选择标记的转基因技术 | 第28-32页 |
·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
·表达γ-亚麻酸的无标记基因转基因大豆的培育 | 第34-35页 |
2 材料与方法 | 第35-52页 |
·材料 | 第35页 |
·植物材料 | 第35页 |
·菌种及质粒 | 第35页 |
·主要化学试剂 | 第35页 |
·方法 | 第35-52页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆与测序 | 第35-41页 |
·植物表达载体的构建 | 第41-42页 |
·大豆的遗传转化及转基因植株的分析 | 第42-52页 |
3 结果与分析 | 第52-81页 |
·Δ~6—脂肪酸脱氢酶基因克隆及其共转化表达载体的构建 | 第52-56页 |
·RT—PCR扩增 | 第52页 |
·目的片段的克隆 | 第52-53页 |
·目的片段的序列测定与分析 | 第53页 |
·表达载体pLIN61构建 | 第53-55页 |
·表达载体pLIN61的PCR鉴定和酶切鉴定 | 第55-56页 |
·大豆的遗传转化和转基因植株的分析 | 第56-81页 |
·三亲交配PCR检测与酶切鉴定 | 第56-57页 |
·不同大豆品种子叶节丛生芽诱导率的比较 | 第57-58页 |
·大豆子叶节不定芽分化和伸长的除草剂Glufosinate梯度实验 | 第58-60页 |
·大豆转化抗性再生植株的获得及转化频率 | 第60-61页 |
·大豆转化抗性再生植株除草剂Glufosinate抗性检测 | 第61页 |
·大豆转化抗性再生植株的PCR检测 | 第61-63页 |
·大豆转化抗性再生植株的Southern杂交证实 | 第63-65页 |
·转基因大豆目的基因D6D的表达 | 第65页 |
·T_1代转基因植株的PCR扩增 | 第65-68页 |
·T_1代转基因植株的Southern杂交检测 | 第68-71页 |
·T_1转基因植株除草剂抗性鉴定 | 第71-73页 |
·T_2代转基因植株的除草剂抗性鉴定和PCR扩增 | 第73-75页 |
·T_2代转基因植株的Southern blot检测 | 第75-77页 |
·无标记基因T_2代种子的Northern杂交检测 | 第77-78页 |
·转基因大豆脂肪酸的气相色谱(GC)分析 | 第78-81页 |
4 讨论 | 第81-85页 |
·无标记转基因植株的获得 | 第81-82页 |
·Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的表达 | 第82-83页 |
·转基因植株后代的分离 | 第83页 |
·转基因植物中的基因沉默现象 | 第83-85页 |
5 结论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-93页 |
缩写词及其英汉对照 | 第93-94页 |
附录 | 第94-100页 |
Ⅰ 大豆组织培养培养基配方: | 第94-98页 |
Ⅱ 彩版 | 第98-99页 |
Ⅲ 作者简历 | 第99-100页 |
致谢 | 第100页 |