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壳聚糖酶分离纯化、性质及降解产物壳寡糖制备与分析

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
引言第10-11页
第一章 文献综述第11-27页
 1 壳聚糖及壳寡糖概述第11-14页
  1.1 壳聚糖概述第11-12页
  1.2 壳寡糖概述第12-14页
 2 壳寡糖的制备第14-17页
  2.1 化学降解法第14页
  2.2 物理场降解法第14-15页
  2.3 合成法第15页
  2.4 酶降解法第15-17页
 3 壳聚糖酶第17-21页
  3.1 壳聚糖酶概述第17-18页
  3.2 壳聚糖酶性质第18-21页
  3.3 壳聚糖酶的制备第21页
 4 壳聚糖酶的分离纯化第21-25页
  4.1 盐析第21-22页
  4.2 离子交换层析第22页
  4.3 亲和层析第22-23页
  4.4 凝胶过滤层析第23页
  4.5 壳聚糖酶分离纯化第23-25页
 5 展望第25-27页
第二章 壳聚糖酶的发酵生产、分离纯化与性质研究第27-51页
 第一节 壳聚糖酶的分离纯化第27-43页
  1 实验材料与仪器设备第27-30页
  2 实验方法第30-36页
   2.1 壳聚糖酶活力的测定第30-31页
   2.2 壳聚糖粗酶的制备第31-32页
   2.3 壳聚糖酶的纯化第32-36页
  3 实验结果第36-41页
   3.1 壳聚糖粗酶的制备第36-37页
   3.2 壳聚糖酶的纯化第37-41页
  4 讨论第41-43页
 第二节 壳聚糖酶的性质研究第43-51页
  1 实验材料与仪器设备第43页
  2 实验方法第43-45页
   2.1 壳聚糖酶分子量测定第43页
   2.2 壳聚糖酶活力测定第43-44页
   2.3 温度对壳聚糖酶活力及稳定性的影响第44页
   2.4 pH对酶活性的影响第44页
   2.5 金属离子对酶活力的影响第44页
   2.6 小分子物质对酶活力的影响第44页
   2.7 酶生物学稳定性第44页
   2.8 壳聚糖酶的底物专一性第44页
   2.9 米氏常数的测定第44-45页
  3 实验结果第45-50页
   3.1 分子量第45页
   3.2 温度对壳聚糖酶活力及稳定性的影响第45-47页
   3.3 pH对酶活性的影响第47页
   3.4 金属离子、小分子物质对酶活力的影响对酶活力的影响第47-48页
   3.5 其他蛋白对酶活力的影响第48-49页
   3.6 壳聚糖酶底物特异性第49页
   3.7 壳聚糖酶动力学研究第49-50页
  4 讨论第50-51页
第三章 壳聚糖酶降解壳聚糖工艺及降解产物分析第51-68页
 第一节 壳聚糖酶降解工艺第51-58页
  1 实验材料与仪器设备第51-52页
  2 实验方法第52-54页
   2.1 酶解得到壳寡糖第52页
   2.2 还原糖浓度测定第52页
   2.3 壳寡糖分子量测定第52-53页
   2.3 最适酶反应温度的测定第53页
   2.4 最适酶反应pH的测定第53页
   2.5 最适酶反应底物浓度的测定第53-54页
   2.6 最适酶量的测定第54页
   2.7 最适酶反应时间的测定第54页
   2.8 不同脱乙酰度酶解情况第54页
  3 实验结果第54-57页
   3.1 壳寡糖分子量测定第54页
   3.2 最适酶反应温度的测定第54-55页
   3.2 酶最适pH值第55页
   3.3 最适底物浓度第55页
   3.4 最适酶量第55-56页
   3.5 酶解反应所需时间第56页
   3.6 不同脱乙酰度酶解情况第56-57页
  4 讨论第57-58页
 第二节 酶解产物壳寡糖分析第58-68页
  1 实验材料与仪器设备第58页
  2 实验方法第58-60页
   2.1 HPLC分析酶解产物第58页
   2.2 酶解寡糖分离第58-59页
   2.3 薄层层析分析经P_4柱后的寡糖第59页
   2.4 壳寡糖部分质量标准与检测第59-60页
  3 实验结果第60-67页
   3.1 酶解不同脱乙酰度壳聚糖所得寡糖 HPLC图第60-65页
   3.2 P4柱分离酶解寡糖第65页
   3.3 薄层层析第65-66页
   3.4 壳寡糖部分质量标准第66-67页
  4 讨论第67-68页
第四章 壳寡糖的生物学功能第68-74页
 第一节 壳聚糖酶发酵液抑菌作用第68-71页
  1 实验材料与仪器设备第68页
  2 实验方法第68-69页
   2.1 发酵液处理第68页
   2.2 植物致病菌培养第68页
   2.3 抑菌试验第68-69页
  3 实验结果第69-70页
  4 讨论第70-71页
 第二节 分离纯化后壳寡糖对 Hela细胞的作用第71-74页
  1 实验材料与仪器设备第71-72页
  2 实验方法第72页
   2.1 Hela细胞培养第72页
   2.2 MTT检验第72页
  3 实验结果第72-73页
  4 讨论第73-74页
参考文献第74-78页
致谢第78页

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