中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
引言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
1 壳聚糖及壳寡糖概述 | 第11-14页 |
1.1 壳聚糖概述 | 第11-12页 |
1.2 壳寡糖概述 | 第12-14页 |
2 壳寡糖的制备 | 第14-17页 |
2.1 化学降解法 | 第14页 |
2.2 物理场降解法 | 第14-15页 |
2.3 合成法 | 第15页 |
2.4 酶降解法 | 第15-17页 |
3 壳聚糖酶 | 第17-21页 |
3.1 壳聚糖酶概述 | 第17-18页 |
3.2 壳聚糖酶性质 | 第18-21页 |
3.3 壳聚糖酶的制备 | 第21页 |
4 壳聚糖酶的分离纯化 | 第21-25页 |
4.1 盐析 | 第21-22页 |
4.2 离子交换层析 | 第22页 |
4.3 亲和层析 | 第22-23页 |
4.4 凝胶过滤层析 | 第23页 |
4.5 壳聚糖酶分离纯化 | 第23-25页 |
5 展望 | 第25-27页 |
第二章 壳聚糖酶的发酵生产、分离纯化与性质研究 | 第27-51页 |
第一节 壳聚糖酶的分离纯化 | 第27-43页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第27-30页 |
2 实验方法 | 第30-36页 |
2.1 壳聚糖酶活力的测定 | 第30-31页 |
2.2 壳聚糖粗酶的制备 | 第31-32页 |
2.3 壳聚糖酶的纯化 | 第32-36页 |
3 实验结果 | 第36-41页 |
3.1 壳聚糖粗酶的制备 | 第36-37页 |
3.2 壳聚糖酶的纯化 | 第37-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
第二节 壳聚糖酶的性质研究 | 第43-51页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
2.1 壳聚糖酶分子量测定 | 第43页 |
2.2 壳聚糖酶活力测定 | 第43-44页 |
2.3 温度对壳聚糖酶活力及稳定性的影响 | 第44页 |
2.4 pH对酶活性的影响 | 第44页 |
2.5 金属离子对酶活力的影响 | 第44页 |
2.6 小分子物质对酶活力的影响 | 第44页 |
2.7 酶生物学稳定性 | 第44页 |
2.8 壳聚糖酶的底物专一性 | 第44页 |
2.9 米氏常数的测定 | 第44-45页 |
3 实验结果 | 第45-50页 |
3.1 分子量 | 第45页 |
3.2 温度对壳聚糖酶活力及稳定性的影响 | 第45-47页 |
3.3 pH对酶活性的影响 | 第47页 |
3.4 金属离子、小分子物质对酶活力的影响对酶活力的影响 | 第47-48页 |
3.5 其他蛋白对酶活力的影响 | 第48-49页 |
3.6 壳聚糖酶底物特异性 | 第49页 |
3.7 壳聚糖酶动力学研究 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-51页 |
第三章 壳聚糖酶降解壳聚糖工艺及降解产物分析 | 第51-68页 |
第一节 壳聚糖酶降解工艺 | 第51-58页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第51-52页 |
2 实验方法 | 第52-54页 |
2.1 酶解得到壳寡糖 | 第52页 |
2.2 还原糖浓度测定 | 第52页 |
2.3 壳寡糖分子量测定 | 第52-53页 |
2.3 最适酶反应温度的测定 | 第53页 |
2.4 最适酶反应pH的测定 | 第53页 |
2.5 最适酶反应底物浓度的测定 | 第53-54页 |
2.6 最适酶量的测定 | 第54页 |
2.7 最适酶反应时间的测定 | 第54页 |
2.8 不同脱乙酰度酶解情况 | 第54页 |
3 实验结果 | 第54-57页 |
3.1 壳寡糖分子量测定 | 第54页 |
3.2 最适酶反应温度的测定 | 第54-55页 |
3.2 酶最适pH值 | 第55页 |
3.3 最适底物浓度 | 第55页 |
3.4 最适酶量 | 第55-56页 |
3.5 酶解反应所需时间 | 第56页 |
3.6 不同脱乙酰度酶解情况 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-58页 |
第二节 酶解产物壳寡糖分析 | 第58-68页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-60页 |
2.1 HPLC分析酶解产物 | 第58页 |
2.2 酶解寡糖分离 | 第58-59页 |
2.3 薄层层析分析经P_4柱后的寡糖 | 第59页 |
2.4 壳寡糖部分质量标准与检测 | 第59-60页 |
3 实验结果 | 第60-67页 |
3.1 酶解不同脱乙酰度壳聚糖所得寡糖 HPLC图 | 第60-65页 |
3.2 P4柱分离酶解寡糖 | 第65页 |
3.3 薄层层析 | 第65-66页 |
3.4 壳寡糖部分质量标准 | 第66-67页 |
4 讨论 | 第67-68页 |
第四章 壳寡糖的生物学功能 | 第68-74页 |
第一节 壳聚糖酶发酵液抑菌作用 | 第68-71页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第68页 |
2 实验方法 | 第68-69页 |
2.1 发酵液处理 | 第68页 |
2.2 植物致病菌培养 | 第68页 |
2.3 抑菌试验 | 第68-69页 |
3 实验结果 | 第69-70页 |
4 讨论 | 第70-71页 |
第二节 分离纯化后壳寡糖对 Hela细胞的作用 | 第71-74页 |
1 实验材料与仪器设备 | 第71-72页 |
2 实验方法 | 第72页 |
2.1 Hela细胞培养 | 第72页 |
2.2 MTT检验 | 第72页 |
3 实验结果 | 第72-73页 |
4 讨论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78页 |