| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-9页 |
| 前言 | 第9-16页 |
| 1 东毕吸虫和东毕吸虫概述 | 第9-11页 |
| 2 东毕吸虫病的诊断和防治 | 第11-13页 |
| 3 东毕吸虫分子生物学方面的研究 | 第13-16页 |
| 第一部分 土耳其斯坦东毕吸虫cDNA文库的构建 | 第16-26页 |
| 1 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16页 |
| ·主要工具酶 | 第16-17页 |
| ·主要溶液的配制 | 第17-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| 2 结果 | 第24-25页 |
| ·总RNA的提取 | 第24页 |
| ·双链cDNA鉴定结果 | 第24-25页 |
| ·文库重组率的PCR鉴定结果 | 第25页 |
| 3 结论 | 第25-26页 |
| 第二部分 土耳其斯坦东毕吸虫原肌球蛋白基因的克隆与表达 | 第26-46页 |
| 1 材料 | 第26页 |
| 2 方法 | 第26-38页 |
| ·总RNA的提取 | 第26页 |
| ·反转录(RT) | 第26页 |
| ·原肌球蛋白基因(tropomyosin，TM)中间大片段的克隆 | 第26-29页 |
| ·用5’-RACE(Rapid amplify cDNA end)克隆TM基因的5’端序列 | 第29-31页 |
| ·TM基因的3’端克隆 | 第31-32页 |
| ·TM基因全序列的拼接 | 第32页 |
| ·TM中间大片段的原核表达和动物免疫研究 | 第32-38页 |
| 3 结果 | 第38-45页 |
| ·原肌球蛋白基因TM中间大片段的克隆 | 第38页 |
| ·重组质粒pGEM-TM和pET28-TM的鉴定 | 第38-39页 |
| ·TM基因3’端序列克隆 | 第39-40页 |
| ·5’RACE克隆TM基因的5’端序列 | 第40页 |
| ·TM全长基因的拼接 | 第40-42页 |
| ·重组菌pET28-TM／BL21的诱导表达和纯化 | 第42-43页 |
| ·蛋白的纯化 | 第43页 |
| ·纯化的目的蛋白Western-blotting检测 | 第43-44页 |
| ·琼脂糖凝胶扩散试验 | 第44页 |
| ·原肌球蛋白抗体的消长规律初步研究 | 第44-45页 |
| 4 结论 | 第45-46页 |
| 全文讨论 | 第46-48页 |
| 1 关于cDNA文库构建 | 第46页 |
| 2 关于原肌球蛋白全长基因的克隆和表达 | 第46-47页 |
| 3 关于纯化的TM蛋白的免疫和抗体消长规律的初探 | 第47-48页 |
| 全文小结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
| 1 cDNA文库构建的原理和流程 | 第53-54页 |
| 2 TM基因克隆和表达的技术路线图 | 第54-55页 |
| 3 pGEM-T easy vector图谱 | 第55-56页 |
| 4 pET28a(+)表达载体图谱 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
