中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
Part Ⅰ 拟南芥近等基因系的建立 | 第7-26页 |
1 前言 | 第7-12页 |
·硼在我国油菜生产当中的重大意义 | 第7页 |
·十字花科植物缺硼产生的各种症状 | 第7-8页 |
·硼在植物生长发育当中的的作用机理以及假说 | 第8页 |
·拟南芥研究的历史 | 第8-9页 |
·拟南芥作为模式植物的优越性 | 第9-10页 |
·正在进行的拟南芥基因组计划(Arabidopsis genome project) | 第10-11页 |
·研究项目的组织及资助 | 第10页 |
·拟南芥计划的内容 | 第10-11页 |
·SSR分子标记的原理 | 第11-12页 |
2 材料与方法 | 第12-21页 |
·实验材料 | 第12页 |
·建立近等基因系的父母本RI高效株系与Columbia | 第12页 |
·用于加快育种速度的RI(Recombinant inbred lines) | 第12页 |
·建立近等基因系的回交流程 | 第12-13页 |
·回交的原理与流程 | 第12页 |
·RI(重组自交系)在培养近等基因系中的应用 | 第12-13页 |
·拟南芥培养方法 | 第13-14页 |
·水培法培养装置的设计 | 第13页 |
·拟南芥水培使用的营养液 | 第13-14页 |
·拟南芥水培流程 | 第14页 |
·拟南芥杂交方法 | 第14-15页 |
·作为父本母本的雌雄花的选择 | 第14页 |
·杂交具体步骤 | 第14-15页 |
·拟南芥杂交后代的鉴定 | 第15-21页 |
·形态学鉴定标准 | 第14-15页 |
·分子标记鉴定方法 | 第15-21页 |
3 结果与分析 | 第21-24页 |
·硼营养效率临界浓度的建立 | 第21页 |
·各个回交世代的检测 | 第21-23页 |
·RI的选择 | 第21页 |
·BC_1代的形态学鉴定 | 第21页 |
·BC_3代与BC_4代的形态学鉴定以及分子标记辅助选择 | 第21-23页 |
·BC_4F_1后代挑选发生分离现象的植株 | 第23页 |
·拟南芥近等基因系的建立 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-26页 |
·近等基因系在拟南芥芯片研究的作用 | 第24页 |
·芯片比较当中遗传背景的一致性要求 | 第24页 |
·芯片比较当中遗传背景的差异性要求 | 第24页 |
·近等基因系与营养缺陷系的比较 | 第24-26页 |
·近等基因系的优越性 | 第24-25页 |
·近等基因系的不足之处 | 第25-26页 |
Part Ⅱ 拟南芥硼营养效率突变体的发现 | 第26-39页 |
1 前言 | 第26-27页 |
·基因陷阱技术的起源 | 第26页 |
·利用转座子系统产生突变体文库 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-33页 |
·实验材料 | 第27页 |
·实验材料的来源:Gene-Trap Lines | 第27页 |
·实验材料的遗传背景以及硼营养效率 | 第27页 |
·拟南芥硼营养效率突变体的培养方法 | 第27页 |
·拟南芥硼营养效率突变体筛选方法 | 第27-28页 |
·拟南芥突变体的筛选流程 | 第27-28页 |
·对可能的拟南芥突变体进行育性恢复 | 第28页 |
·拟南芥硼营养效率突变体鉴定方法 | 第28-29页 |
·形态学鉴定 | 第28页 |
·显微观察鉴定 | 第28-29页 |
·拟南芥硼营养效率突变体的表达模式分析:GUS染色方法 | 第29-31页 |
·拟南芥硼营养效率突变体的分子生物学分析 | 第31-33页 |
·Gene-trap的原理 | 第31页 |
·TAIL-PCR的原理以及应用 | 第31页 |
·修改的TAIL-PCR方法 | 第31-32页 |
·运用T载体克窿扩增片段 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-37页 |
·硼营养效率突变体的获得 | 第33页 |
·GUS分析 | 第33-34页 |
·插入片段旁侧序列片段的获得 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
·Gene-trap在突变体研究当中的优缺点 | 第37页 |
·关于功能鉴定方面的讨论 | 第37页 |
·关于突变体文库的讨论 | 第37页 |
·关于TAIL-PCR的讨论 | 第37页 |
·该突变体可能机制的探讨 | 第37-39页 |
问题与展望 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
致谢 | 第44-43页 |