中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-11页 |
目录 | 第11-16页 |
第一章 绪论 | 第16-52页 |
·概述 | 第16-17页 |
·植物耐盐机制和耐盐相关基因的研究进 | 第17-37页 |
·渗透调节 | 第17-27页 |
·脯氨酸 | 第18-20页 |
·甜菜碱 | 第20-22页 |
·糖醇 | 第22页 |
·果聚糖 | 第22-23页 |
·海藻糖 | 第23页 |
·胚胎发生晚期丰富蛋白 | 第23-24页 |
·调渗蛋白 | 第24-27页 |
·调节膜运输-调节离子的吸收和区域化 | 第27-35页 |
·Na~+的外排 | 第27-29页 |
·Na~+/K~+识别 | 第29-32页 |
·盐的区域化 | 第32-34页 |
·离子种类和离子浓度的感知 | 第34-35页 |
·植物水分运输的调节-水通道蛋白 | 第35-36页 |
·植物代谢途径的调节 | 第36-37页 |
·调控抗氧化防御系统 | 第37页 |
·盐胁迫调控基因的研究进展 | 第37-42页 |
·转录因子 | 第38-40页 |
·蛋白激酶 | 第40-41页 |
·磷脂酶 | 第41页 |
·脱落酸 | 第41-42页 |
·分离差异表达基因的方法和原理 | 第42-48页 |
·分离差异表达基因的方法 | 第43-48页 |
·差别筛选 | 第43页 |
·扣除杂交 | 第43-44页 |
·mRNA差异显示技术 | 第44页 |
·代表性差异分析 | 第44-45页 |
·抑制性扣除杂交 | 第45-47页 |
·cDNA微阵列和基因芯片 | 第47-48页 |
·mRNA差别显示法的优点和局限性 | 第48页 |
·应用差异性显示方法对植物抗盐、抗旱相关序列的研究进展 | 第48-49页 |
·应用差异性显示方法对小麦基因的研究进展 | 第49-50页 |
·本研究课题的提出 | 第50-52页 |
第二章 小麦盐胁迫应答基因cDNA的分离与克隆 | 第52-71页 |
·实验材料 | 第52-54页 |
·植物材料 | 第53页 |
·载体、菌株与抗生素 | 第53页 |
·试剂 | 第53-54页 |
·试剂盒 | 第54页 |
·酶及试剂 | 第54页 |
·实验方法 | 第54-63页 |
·总RNA的提取 | 第54-55页 |
·mRNA的分离 | 第55-56页 |
·RT-PCR和差异显示 | 第56-57页 |
·PCR产物的纯化 | 第57-58页 |
·连接 | 第58页 |
·感受态细胞制备 | 第58-59页 |
·重组子转化E.coli DH5α | 第59页 |
·质粒DNA的提取 | 第59-60页 |
·酶切鉴定 | 第60页 |
·Northern blotting杂交 | 第60-63页 |
·探针标记 | 第60-61页 |
·探针有效性的检测 | 第61-62页 |
·杂交 | 第62-63页 |
·cDNA序列测定和分析 | 第63页 |
·实验结果 | 第63-69页 |
·NaCl胁迫对小麦幼苗生长的影响 | 第63-64页 |
·总RNA提取 | 第64页 |
·mRNA差异显示 | 第64-66页 |
·差异条带的再扩增 | 第66页 |
·盐胁迫应答基因cDNA片段的克隆 | 第66-69页 |
·载体的选定 | 第66-67页 |
·cDNA片段克隆及酶切分析 | 第67-68页 |
·cDNA克隆片段的Northern印迹检测 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
第三章 差异表达基因cDNA的序列测定与生物信息学分析 | 第71-86页 |
·分析方法 | 第72-73页 |
·结果 | 第73-83页 |
·小麦盐胁迫差异表达基因cDNA序列测定及分析 | 第73-77页 |
·小麦盐胁迫差异表达基因的同源性分析 | 第77-78页 |
·SR07基因推测蛋白的同源性分析 | 第78-80页 |
·SR07编码的蛋白质氨基酸组成及等电点预测 | 第80页 |
·SR07编码的蛋白质二级结构预测 | 第80-81页 |
·SR07编码蛋白的亲水性分析 | 第81-82页 |
·SR07编码蛋白的跨膜分析 | 第82页 |
·SR07编码蛋白磷酸化位点预测 | 第82-83页 |
·讨论 | 第83-86页 |
第四章 SR07基因表达载体构建及烟草转化系筛选 | 第86-101页 |
·实验材料 | 第87-88页 |
·植物材料 | 第87页 |
·菌株与质粒 | 第87页 |
·酶与试剂 | 第87页 |
·培养基 | 第87-88页 |
·实验方法 | 第88-93页 |
·SR07基因的克隆 | 第88页 |
·连接 | 第88页 |
·感受态细菌的制备 | 第88页 |
·重组子转化E.coli DH5α | 第88页 |
·酶切鉴定 | 第88页 |
·植物表达载体的构建 | 第88-89页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第89页 |
·中间载体转化农杆菌 | 第89页 |
·农杆菌介导的烟草转化和再生 | 第89-90页 |
·烟草无菌苗的制备 | 第90页 |
·烟草叶片转化及抗卡那霉素再生植株筛选 | 第90页 |
·转基因烟草的PCR分析 | 第90-91页 |
·转基因烟草的Southern印迹分析 | 第91-93页 |
·植物DNA的大量提取 | 第91页 |
·烟草总DNA酶切、电泳 | 第91-92页 |
·转膜和紫外交联 | 第92页 |
·探针的标记 | 第92页 |
·Southern杂交 | 第92-93页 |
·实验结果 | 第93-98页 |
·SR07基因的克隆 | 第93-94页 |
·植物表达载体的构建 | 第94-96页 |
·烟草外植体的转化和筛选 | 第96-97页 |
·转化系再生植株的PCR检测 | 第97页 |
·转化系再生植株的Southern杂交分析 | 第97-98页 |
·讨论 | 第98-101页 |
第五章 SR07基因在烟草中的表达模式及转基因烟草对NaCl、PEG和甘露醇的抗性研究 | 第101-114页 |
·实验材料 | 第102页 |
·植物材料 | 第102页 |
·培养基 | 第102页 |
·方法 | 第102-105页 |
·转基因烟草总RNA的小量提取 | 第103页 |
·烟草总RNA电泳、转膜 | 第103-104页 |
·探针的标记和杂交 | 第104页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第104-105页 |
·样品提取液 | 第104页 |
·SDS-PAGE的组成 | 第104-105页 |
·电泳系统 | 第105页 |
·实验结果 | 第105-111页 |
·SR07基因在转基因烟草中的表达模式分析 | 第105-108页 |
·转基因烟草的Northern杂交分析 | 第105-106页 |
·不同浓度的盐处理后SR07在烟草中的表达分析 | 第106-107页 |
·SR07在转基因烟草中的时序性表达分析 | 第107-108页 |
·不同烟草转化系在盐胁迫下的SDS电泳分析 | 第108页 |
·转基因烟草的抗性分析 | 第108-111页 |
·讨论 | 第111-114页 |
论文主要结论、创新点与展望 | 第114-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-137页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第137-138页 |