中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-23页 |
·植物细胞雄性不育研究进展 | 第10-17页 |
·植物细胞雄性不育的类型 | 第10-11页 |
·植物细胞雄性不育的遗传机制 | 第11-12页 |
·植物花药发育研究概况以及败育的研究进展 | 第12-17页 |
·鉴定和分离油菜细胞核雄性不育基因的方法 | 第17-18页 |
·差异表达基因的分离方法 | 第17-18页 |
·基因同源序列法 | 第18页 |
·差异显示研究概况 | 第18-23页 |
·DDRT-PCR技术 | 第19页 |
·利用复性动力学理论建立的CDNA-RDA、SSH等技术 | 第19-21页 |
·以大规模杂交为基础的技术方法 | 第21页 |
·利用分子标记多态性原理建立的RFD、CDNA-AFLP技术 | 第21-23页 |
2 目的和意义 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-31页 |
·实验材料 | 第24页 |
·取样方法 | 第24页 |
·切片材料取样 | 第24页 |
·花药的获取 | 第24页 |
·总RNA抽提及纯化 | 第24-25页 |
·cDNA-AFLP程序 | 第25-27页 |
·cDNA的合成 | 第25-26页 |
·AFLP的扩增反应 | 第26页 |
·DNA的差异片段的回收 | 第26-27页 |
·差异片段的验证 | 第27-29页 |
·Reverse Northern Blot | 第27-28页 |
·Northern Blot | 第28-29页 |
·克隆 | 第29-30页 |
·同源片段克隆及序列分析 | 第30-31页 |
4 结果与分析 | 第31-46页 |
·细胞观察 | 第31页 |
·总RNA的提取及检测 | 第31页 |
·cDNA合成 | 第31-32页 |
·cDNA LD-PCR扩增循环数的确立 | 第32-33页 |
·AFLP反应体系的优化 | 第33-34页 |
·可育株与败育株之间的部分差异显示结果代表图 | 第34-35页 |
·cDNA差异片段回收 | 第35-36页 |
·差异片段的重扩鉴定 | 第36-37页 |
·Reverse Northern Blot and Northern Blot效果图 | 第37-38页 |
·cDNA序列的结构分析与同源性比较 | 第38-41页 |
·同源序列分析法结果 | 第41-46页 |
5 讨论 | 第46-54页 |
·对cDNA-AFLP差异显示法的分析 | 第46-47页 |
·对cDNA-AFLP的带纹图谱的分析及探讨 | 第46页 |
·酶切位点对cDNA-AFLP的影响 | 第46-47页 |
·实验中取材的控制 | 第47-48页 |
·对cDNA-AFLP中假阳性的新认识 | 第48页 |
·对油菜中与拟南芥不育基因同源的基因的探讨 | 第48-54页 |
6 参考文献 | 第54-60页 |
7 缩略语表 | 第60-61页 |
8 致谢 | 第61页 |