| 前言 | 第1-22页 |
| 技术路线图 | 第22-23页 |
| 材料与方法 | 第23-41页 |
| 一、材料 | 第23-27页 |
| 二、方法 | 第27-41页 |
| 1. 鼻咽癌差异表达基因的分析 | 第27-29页 |
| ·组织RNA 的提取 | 第27页 |
| ·QIAGEN 公司的mRNA Midikit 分离mRNA | 第27-28页 |
| ·逆转录与标记 | 第28-29页 |
| ·杂交后信号扫描和结果分析 | 第29页 |
| 2. 基因组DNA 的抽提 | 第29-30页 |
| ·外周血基因组DNA 的抽提 | 第29页 |
| ·活检组织DNA 的抽提 | 第29-30页 |
| 3. 质粒DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·质粒DNA 的小量抽提 | 第30页 |
| ·质粒DNA 的大量抽提 | 第30-31页 |
| 4. 人胚鼻咽上皮组织原代培养 | 第31页 |
| 5. 培养细胞 RNA 的提取 | 第31-32页 |
| 6. 差异RT-PCR | 第32页 |
| 7. 灰度扫描与数据处理 | 第32页 |
| 8. Northern 杂交 | 第32-33页 |
| 9. DNA 测序 | 第33页 |
| 10. NOR_1基因的生物信息学分析 | 第33页 |
| 11. PCR-SSCP 检测NOR1基因编码区的点突变 | 第33-34页 |
| 12. NOR_1真核表达载体的构建与检测 | 第34-36页 |
| 13. EGFPP/NOR_1融合蛋白的真核表达 | 第36-37页 |
| 14. GST/NOR_1融合蛋白的原核表达 | 第37-39页 |
| 15. 原位杂交 | 第39-41页 |
| 三、结果 | 第41-96页 |
| 第一章 鼻咽癌活检组织差异基因表达谱的研究 | 第41-52页 |
| ·成人鼻咽、鼻咽癌活检标本总 RNA 的抽提和mRNA 的纯化 | 第41页 |
| ·成人鼻咽、鼻咽癌活检标本mRNA 与cDNA microarray 的杂交图谱 | 第41-43页 |
| ·成人鼻咽与鼻咽癌活检标本的差异表达基因 | 第43-48页 |
| ·差异表达基因的进一步验证 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| 第二章 鼻咽癌差异表达新基因 NOR1的克隆 | 第52-75页 |
| ·EST W95442 在正常鼻咽上皮和鼻咽癌细胞株 HNE1的差异表达 | 第52页 |
| ·EST w95442 在正常鼻咽活检组织与鼻咽癌活检组织中的差异表达 | 第52-53页 |
| ·NOR_1基因的人多组织 Northern 印迹杂交 | 第53-54页 |
| ·NOR_1 基因的全长cDNA克隆及序列分析 | 第54-55页 |
| ·NOR_1蛋白质的序列结构和功能生物信息学分析 | 第55-71页 |
| ·讨论 | 第71-75页 |
| 第三章 NOR_1基因功能的初步研究 | 第75-96页 |
| ·GST/NOR_1融合表达重组体的构建和重组的鉴定 | 第75-77页 |
| ·GST/NOR_1融合蛋白的表达和检测 | 第77-78页 |
| ·目的蛋白的纯化和鉴定 | 第78-79页 |
| ·EGFPP/NOR_1融合蛋白的亚细胞定位 | 第79-80页 |
| ·NOR_1真核表达载体pcDNA3.1 (+)的构建及其功能的初步研究 | 第80-83页 |
| ·NOR_1基因转染鼻咽癌细胞系 HNE细胞的生物学行为观察 | 第83-90页 |
| ·讨论 | 第90-96页 |
| 参考文献 | 第96-110页 |
| 结论 | 第110-111页 |
| 综述 | 第111-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第117-118页 |
