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茎特异表达基因EST测序分析及RNA微阵列验证

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
引言第10-13页
1 文献综述第13-22页
 1.1 EST技术及其应用第13-20页
  1.1.1 EST技术的形成第13-14页
  1.1.2 EST技术的原理和方法第14-15页
  1.1.3 EST技术的应用第15-19页
   1.1.3.1 构建遗传学图谱第15-16页
   1.1.3.2 分离与鉴定新基因第16-17页
   1.1.3.3 基因表达谱的研究第17-18页
   1.1.3.4 比较基因组学研究第18-19页
   1.1.3.5 用于制备DNA芯片第19页
  1.1.4 小结第19-20页
 1.2 生物信息学在EST技术中的应用第20-22页
  1.2.1 生物信息学第20页
  1.2.2 EST数据库第20-21页
  1.2.3 EST序列分析软件第21-22页
2 材料与方法第22-30页
 2.1 实验材料第22-24页
  2.1.1 水稻茎cDNA文库第22页
  2.1.2 水稻材料第22-23页
  2.1.3 酶、主要试剂及部分实验器材第23-24页
 2.2 96孔板大量质粒抽提和纯化第24-25页
  2.2.1 细菌培养第24页
  2.2.2 质粒抽提第24-25页
 2.3 cDNA序列测定第25页
 2.4 生物信息学分析第25-26页
  2.4.1 序列编辑第25-26页
  2.4.2 序列格式转化及GenBank数据库提交17第26页
  2.4.3 序列同一性分析及Cluster归类第26页
  2.4.4 茎Unique genes数据库的构建第26页
 2.5 总RNA的抽提第26-27页
 2.6 探针的同位素标记第27页
 2.7 RNA微阵列杂交膜制备第27-28页
 2.8 RNA微阵列杂交和数据分析第28-30页
  2.8.1 预杂交第28页
  2.8.2 杂交第28页
  2.8.3 洗膜第28页
  2.8.4 RNA微阵列杂交数据分析第28-30页
3 结果与分析第30-54页
 3.1 大规模质粒提取纯化及测序结果概况第30页
 3.2 序列提交第30页
 3.3 序列同一性分析及Cluster归类第30-33页
 3.4 基因表达丰度分析第33-34页
 3.5 与NCBI水稻数据库Blast n查询结果第34-36页
 3.6 对已知功能和具有推测功能的EST分析第36-39页
 3.7 高丰度表达中已知功能基因分析第39-48页
  3.7.1 光合作用相关基因第39页
  3.7.2 细胞骨架蛋白基因第39-40页
  3.7.3 逆境反应相关基因第40-43页
   3.7.3.1 苯丙氨酸解氨酶第40-41页
   3.7.3.2 细胞壁蛋白基因第41-42页
   3.7.3.3 脱落酸和逆境诱导蛋白第42页
   3.7.3.4 脂类转运蛋白第42-43页
  3.7.4 信号转导相关基因第43页
  3.7.5 转录和翻译相关基因第43-46页
   3.7.5.1 高度移动性群体蛋白第43页
   3.7.5.2 翻译起始因子第43-44页
   3.7.5.3 伸长因子第44页
   3.7.5.4 核糖体蛋白第44-45页
   3.7.5.5 遍在蛋白第45-46页
  3.7.6 核基因组第46页
  3.7.7 糖代谢基因第46-48页
 3.8 RNA微阵列杂交结果分析第48-54页
  3.8.1 RNA微阵列数据的可靠性和重现性分析第48-49页
  3.8.2 基因表达变化总体趋势第49-51页
  3.8.3 茎组织中基因表达情况第51-54页
4 讨论第54-58页
 4.1 EST测序、cDNA文库和处理方法的探讨第54页
 4.2 水稻茎组织基因表达谱第54-55页
 4.3 茎组织特异性高表达基因分析第55-58页
参考文献第58-64页
致谢第64页

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