| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第8-19页 |
| ·李斯特菌属概述 | 第8页 |
| ·单增李斯特菌 LM 生物学特性 | 第8-9页 |
| ·单增李斯特菌 LM 的分型 | 第9页 |
| ·单增李斯特菌的致病机理 | 第9-10页 |
| ·单增李斯特菌的主要毒力因子 | 第10-12页 |
| ·单增李斯特菌的污染状况 | 第12-13页 |
| ·单增李斯特菌检测技术 | 第13-17页 |
| ·传统的分离、培养与鉴定方法 | 第13-14页 |
| ·分子生物学方法 | 第14-15页 |
| ·免疫学检测方法 | 第15-17页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第17-18页 |
| ·技术路线图 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19-21页 |
| ·菌种，实验动物及载体 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第21页 |
| ·单增李斯特菌全菌 DNA 提取 | 第21页 |
| ·iap、plcB、actA 基因的扩增和克隆 | 第21-23页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备以及转化 | 第23页 |
| ·表达载体的构建 | 第23-24页 |
| ·重组菌诱导表达 | 第24页 |
| ·重组蛋白表达可溶性分析 | 第24页 |
| ·SDS-PAGE | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的分离纯化及鉴定 | 第25页 |
| ·重组蛋白免疫原性分析 | 第25-26页 |
| ·重组 p60 蛋白鼠多克隆抗体的制备 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-37页 |
| ·单增李斯特菌 iap、plcB、ActA 基因 PCR 扩增结果 | 第26-27页 |
| ·pMD18-T- iap，pMD18-T- plcB 和 pMD18-T-actA 的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·PET28a(+)-iap、PET28a(+)-plcB、PET28a(+)-actA 表达载体的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白 p60、plcB、ActA 诱导表达及可溶性分析 | 第29-32页 |
| ·重组蛋白的亲和纯化 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白免疫原性分析 | 第33-35页 |
| ·P60 多抗与 LM 菌体的效价测定及其交叉反应性分析 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 5 结论与展望 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 在读期间发表论文和学术交流情况 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
