| 全文摘要 | 第1-7页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 第一篇 文献综述 | 第8-36页 |
| 第一章 促黄体素释放激素 | 第8-15页 |
| 一 LHRH的分子结构及特性 | 第8-9页 |
| 二 LHRH的类似物 | 第9-11页 |
| 三 LHRH的主要生理作用 | 第11-12页 |
| 四 LHRH的抗生育作用 | 第12-15页 |
| 第二章 LHRH疫苗研究进展 | 第15-32页 |
| 一 LHRH合成肽疫苗 | 第15-18页 |
| 二 LHRH基因工程疫苗 | 第18-19页 |
| 三 LHRH疫苗的佐剂及抗原输送系统的研究 | 第19-20页 |
| 四 LHRH疫苗对动物机体产生的影响及其应用 | 第20-24页 |
| 五 LHRH疫苗前景展望 | 第24-32页 |
| 第三章 硫氧还蛋白融合表达系统 | 第32-36页 |
| 第二篇 试验部分 | 第36-95页 |
| 第一章 家畜促黄体素释放激素（LHRH）基因在大肠杆菌中的克隆与表达 | 第36-46页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 1．1 质粒与菌株 | 第37页 |
| 1．2 主要试剂 | 第37页 |
| 1．3 家畜LHRH基因的人工合成 | 第37页 |
| 1．4 LHRH/pET-32c重组质粒的构建 | 第37-39页 |
| 1．5 LHRH/pET-32c重组质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-42页 |
| 2．1 LHRH/pET-32c重组质粒的构建 | 第39-42页 |
| 2．2 LHRH/pET-32c重组质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-46页 |
| 第二章 重组质粒LHRH/pET-32c在大肠杆菌中表达特性的研究 | 第46-63页 |
| 1 材料与方法 | 第47-49页 |
| 1．1 质粒、菌株和主要试剂 | 第47页 |
| 1．2 诱导时间对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第47页 |
| 1．3 IPTG浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第47页 |
| 1．4 Amp浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第47-48页 |
| 1．5 乳糖浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第48页 |
| 1．6 TRX-LHRH融合蛋白的可溶性研究 | 第48页 |
| 1．7 TRX-LHRH融合蛋白的提取 | 第48-49页 |
| 1．8 pET-32c质粒的改造及改造后质粒的表达 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-55页 |
| 2．1 诱导时间对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第49-51页 |
| 2．2 IPTG浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第51页 |
| 2．3 Amp浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第51-52页 |
| 2．4 乳糖浓度对TRX-LHRH融合蛋白表达产量的影响 | 第52-53页 |
| 2．5 TRX-LHRH融合蛋白的可溶性研究 | 第53-55页 |
| 2．6 TRX-LHRH融合蛋白的提取 | 第55页 |
| 2．7 对pET-32c质粒的改造及改造后质粒的表达 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-63页 |
| 3．1 关于IPTG的用量 | 第58页 |
| 3．2 关于Amp的用量 | 第58页 |
| 3．3 乳糖作为诱导剂的可行性及其作用机理 | 第58-59页 |
| 3．4 关于融合蛋白的可溶性 | 第59页 |
| 3．5 关于渗透休克方法及其作用机理 | 第59-63页 |
| 第三章 两种不同偶联载体制备LHRH抗体的比较 | 第63-71页 |
| 1 材料与方法 | 第63-65页 |
| 1．1 主要试剂及菌株 | 第63-64页 |
| 1．2 LHRH与载体蛋白的戊二醛两步法偶联 | 第64页 |
| 1．3 免疫动物 | 第64页 |
| 1．4 LHRH抗体效价的测定 | 第64-65页 |
| 1．5 LHRH抗体的特异性检验 | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-66页 |
| 2．1 间接ELISA方法测定LHRH抗体的效价 | 第65-66页 |
| 2．2 间接ELISA抑制试验鉴定兔抗LHRH抗体的特异性 | 第66页 |
| 3 讨论 | 第66-71页 |
| 第四章 TRX-LHRH融合蛋白的抗原性鉴定 | 第71-83页 |
| 1 材料与方法 | 第72-74页 |
| 1．1 质粒、菌株和主要试剂 | 第72页 |
| 1．2 TRX-LHRH融合蛋白及空载的TRX蛋白的提取 | 第72页 |
| 1．3 TRX-LHRH融合蛋白的反应原性鉴定 | 第72-73页 |
| 1．4 TRX-LHRH融合蛋白的免疫原性鉴定 | 第73-74页 |
| 2 结果 | 第74-79页 |
| 2．1 TRX-LHRH及TRX蛋白的提取： | 第74-75页 |
| 2．2 TRX-LHRH融合蛋白的反应原性鉴定 | 第75页 |
| 2．3 TRX-LHRH融合蛋白的免疫原性鉴定 | 第75-79页 |
| 3 讨论 | 第79-83页 |
| 第五章 禽型和哺乳型LHRH基因在大肠杆菌中的串联表达 | 第83-95页 |
| 1 材料与方法 | 第84-86页 |
| 1．1 质粒及菌株 | 第84页 |
| 1．2 主要试剂 | 第84页 |
| 1．3 禽型及哺乳型LHRH串联基因的人工合成 | 第84-85页 |
| 1．4 串联LHRH基因与pET-32c质粒的重组 | 第85页 |
| 1．5 重组质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达 | 第85-86页 |
| 1．6 TRX-mLHRH-aLHRH-mLHRH融合蛋白的反应原性鉴定 | 第86页 |
| 2 结果 | 第86-91页 |
| 2．1 禽型及哺乳型LHRH串联基因的人工合成 | 第86页 |
| 2．2 重组质粒的酶切筛选及序列分析 | 第86-87页 |
| 2．3 禽型及哺乳型LHRH串联基因在大肠杆菌中的表达 | 第87-88页 |
| 2．4 TRX-mLHR-aLHRH-mLHRH融合蛋白的反应原性鉴定 | 第88-91页 |
| 3 讨论 | 第91-95页 |
| 全文总结 | 第95-96页 |
| 英文摘要 | 第96-98页 |
| 附录A 家兔睾丸组织病理切片 | 第98-101页 |
| 附录B 读研期间发表论文 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
