中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 前言 | 第10-18页 |
·放射诱导的DNA损伤修复机制:MRN复合物 | 第11-12页 |
·腺病毒基因治疗 | 第12-15页 |
·溶瘤腺病毒与放疗协同作用的研究 | 第15-16页 |
·膀胱组织特异性溶瘤腺病毒联合放疗治疗膀胱癌 | 第15页 |
·提高膀胱组织特异性溶瘤腺病毒联合放疗的协同增敏作用的途径 | 第15-16页 |
·本实验的研究目的及研究的技术路线 | 第16-18页 |
2 材料与方法 | 第18-33页 |
·主要材料与试剂 | 第18页 |
·主要试剂的配置 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·细胞培养与处理 | 第20-21页 |
·细胞复苏 | 第20页 |
·细胞培养的培养及传代 | 第20-21页 |
·细胞冻存 | 第21页 |
·重组人膀胱癌组织特异性溶瘤腺病毒的滴度及纯度的测定 | 第21-22页 |
·PFU法的原理 | 第21页 |
·PFU法的实验步骤 | 第21-22页 |
·显微照相观察细胞形态(CPE) | 第22-23页 |
·目的和原理 | 第22页 |
·步骤 | 第22-23页 |
·MTT法检测细胞存活性 | 第23页 |
·MTT检测原理 | 第23页 |
·步骤 | 第23页 |
·Capase3活性检测肿瘤细胞的凋亡 | 第23-25页 |
·原理 | 第23-24页 |
·步骤 | 第24-25页 |
·流式细胞术(FCM)检测细胞周期及凋亡 | 第25-26页 |
·原理 | 第25页 |
·步骤 | 第25-26页 |
·电子透镜观察病毒颗粒及细胞形态变化 | 第26页 |
·实验目的 | 第26页 |
·实验步骤 | 第26页 |
·Wsetern Blot法检测蛋白水平变化 | 第26-31页 |
·实验原理 | 第26页 |
·实验试剂的配置 | 第26-28页 |
·实验步骤 | 第28-31页 |
·射线照射对病毒滴度的影响 | 第31-33页 |
·目的和原理 | 第31-32页 |
·实验步骤 | 第32-33页 |
·统计学方法 | 第33页 |
3 结果 | 第33-43页 |
·腺病毒滴度的测定 | 第33页 |
·显微镜下观察干预后细胞的形态变化 | 第33-35页 |
·MTT细胞抗增殖实验 | 第35-37页 |
·Capase3活性检测肿瘤细胞的凋亡 | 第37页 |
·电子透镜下观察进入到肿瘤细胞内的病毒颗粒和细胞形态变化 | 第37-39页 |
·流式细胞术检测细胞周期和凋亡 | 第39-41页 |
·Western blot | 第41-43页 |
·E1A蛋白、六邻体蛋白、受体CAR的表达 | 第41-42页 |
·Mre11蛋白、γ-H2AX-ser139、Chk2-thr68蛋白的表达 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
6 参考文献 | 第47-49页 |
7 成果 | 第49-50页 |
8 致谢 | 第50页 |