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膀胱肿瘤特异性溶瘤腺病毒基因靶向治疗与放疗的协同作用

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 前言第10-18页
   ·放射诱导的DNA损伤修复机制:MRN复合物第11-12页
   ·腺病毒基因治疗第12-15页
   ·溶瘤腺病毒与放疗协同作用的研究第15-16页
     ·膀胱组织特异性溶瘤腺病毒联合放疗治疗膀胱癌第15页
     ·提高膀胱组织特异性溶瘤腺病毒联合放疗的协同增敏作用的途径第15-16页
   ·本实验的研究目的及研究的技术路线第16-18页
2 材料与方法第18-33页
   ·主要材料与试剂第18页
   ·主要试剂的配置第18-19页
   ·主要仪器第19-20页
   ·细胞培养与处理第20-21页
     ·细胞复苏第20页
     ·细胞培养的培养及传代第20-21页
     ·细胞冻存第21页
   ·重组人膀胱癌组织特异性溶瘤腺病毒的滴度及纯度的测定第21-22页
     ·PFU法的原理第21页
     ·PFU法的实验步骤第21-22页
   ·显微照相观察细胞形态(CPE)第22-23页
     ·目的和原理第22页
     ·步骤第22-23页
   ·MTT法检测细胞存活性第23页
     ·MTT检测原理第23页
     ·步骤第23页
   ·Capase3活性检测肿瘤细胞的凋亡第23-25页
     ·原理第23-24页
     ·步骤第24-25页
   ·流式细胞术(FCM)检测细胞周期及凋亡第25-26页
     ·原理第25页
     ·步骤第25-26页
   ·电子透镜观察病毒颗粒及细胞形态变化第26页
     ·实验目的第26页
     ·实验步骤第26页
   ·Wsetern Blot法检测蛋白水平变化第26-31页
     ·实验原理第26页
     ·实验试剂的配置第26-28页
     ·实验步骤第28-31页
   ·射线照射对病毒滴度的影响第31-33页
     ·目的和原理第31-32页
     ·实验步骤第32-33页
   ·统计学方法第33页
3 结果第33-43页
   ·腺病毒滴度的测定第33页
   ·显微镜下观察干预后细胞的形态变化第33-35页
   ·MTT细胞抗增殖实验第35-37页
   ·Capase3活性检测肿瘤细胞的凋亡第37页
   ·电子透镜下观察进入到肿瘤细胞内的病毒颗粒和细胞形态变化第37-39页
   ·流式细胞术检测细胞周期和凋亡第39-41页
   ·Western blot第41-43页
     ·E1A蛋白、六邻体蛋白、受体CAR的表达第41-42页
     ·Mre11蛋白、γ-H2AX-ser139、Chk2-thr68蛋白的表达第42-43页
4 讨论第43-46页
5 结论第46-47页
6 参考文献第47-49页
7 成果第49-50页
8 致谢第50页

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