| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-30页 |
| ·微生物致病性共同特征 | 第10-15页 |
| ·毒素 | 第10页 |
| ·黏附 | 第10-12页 |
| ·侵袭 | 第12-13页 |
| ·胞内生活方式 | 第13页 |
| ·与宿主免疫系统相关作用 | 第13页 |
| ·毒力因子分泌的保守机制 | 第13-14页 |
| ·铁摄取 | 第14页 |
| ·毒力因子的调节 | 第14-15页 |
| ·迟缓爱德华氏菌研究进展 | 第15-24页 |
| ·概述 | 第15-16页 |
| ·致病机制 | 第16-21页 |
| ·黏附和侵袭 | 第16-18页 |
| ·与宿主免疫系统的对抗 | 第18页 |
| ·T355 | 第18-20页 |
| ·T655 | 第20-21页 |
| ·铁摄取 | 第21页 |
| ·疫苗防治 | 第21-24页 |
| ·疫苗构建的若干思路 | 第22-24页 |
| ·E.tarda 疫苗研究进展 | 第24页 |
| ·基因组文库在微生物研究中的应用 | 第24-30页 |
| ·基因组文库 | 第24-25页 |
| ·大片段基因组文库 | 第25-28页 |
| ·Cosmid 文库 | 第25-26页 |
| ·Fosmid 文库 | 第26-28页 |
| ·大片段基因组文库在微生物中的应用 | 第28-30页 |
| 第二章 迟缓爱德华氏菌基因组fosmid 文库构建及生物信息学分析 | 第30-56页 |
| 第一节 迟缓爱德华氏菌基因组fosmid 文库构建 | 第32-41页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料与试剂 | 第32页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第32-33页 |
| ·脉冲场电泳(PFGE) | 第33页 |
| ·Fosmid 文库构建 | 第33-36页 |
| ·文库质量鉴定 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·基因DNA 提取及合适片段DNA 制备 | 第36-37页 |
| ·DNA 回收 | 第37-38页 |
| ·文库质量鉴定 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第二节 迟缓爱德华氏菌基因组初探及毒力相关基因寻找 | 第41-56页 |
| ·材料与方法 | 第41页 |
| ·末端测序 | 第41页 |
| ·生物信息学分析 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-55页 |
| ·序列质量 | 第41页 |
| ·GC 含量 | 第41-42页 |
| ·相近物种分析 | 第42-43页 |
| ·KEGG 基因功能分类 | 第43-49页 |
| ·毒力相关基因寻找 | 第49-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| 第三章 从迟缓爱德华氏菌基因组fosmid文库克隆编码寡肽透过酶的opp基因簇 | 第56-64页 |
| 1. 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·菌株与质粒 | 第57页 |
| ·Fosmid 文库构建 | 第57页 |
| ·opp 基因簇克隆 | 第57-58页 |
| ·生物信息学分析 | 第58页 |
| 2 结果及讨论 | 第58-63页 |
| ·opp 基因簇克隆 | 第58-59页 |
| ·opp 基因簇序列分析 | 第59-61页 |
| ·opp 基因簇非编码区 | 第61-62页 |
| ·基于OppA 保守结构域的进化地位分析 | 第62-63页 |
| 3. 结论 | 第63-64页 |
| 第四章 迟缓爱德华氏菌aroA 基因的克隆及其缺失突变株的构建 | 第64-83页 |
| 第一节 迟缓爱德华氏菌aroA 基因的克隆及序列分析 | 第66-74页 |
| ·材料与方法 | 第66-68页 |
| ·菌种与质粒 | 第66页 |
| ·aroA 克隆筛选 | 第66-67页 |
| ·aroA 上下游扩增 | 第67-68页 |
| ·aroA ORF 确认 | 第68页 |
| ·aroA 序列分析 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-74页 |
| ·文库筛选 | 第69页 |
| ·aroA 上下游扩增 | 第69-70页 |
| ·aroA ORF 确认 | 第70-71页 |
| ·aroA 序列分析 | 第71-74页 |
| 第二节 迟缓爱德华氏菌aroA 基因缺失突变株构建 | 第74-83页 |
| ·材料与方法 | 第74-78页 |
| ·实验鱼 | 第74页 |
| ·细菌及质粒 | 第74页 |
| ·aroA 缺失 | 第74-77页 |
| ·△aroA 毒性实验 | 第77-78页 |
| ·△aroA 在牙鲆体内存活实验 | 第78页 |
| ·结果 | 第78-81页 |
| ·aroA 缺失 | 第78-80页 |
| ·毒性实验 | 第80页 |
| ·△aroA 在牙鲆体内存活实验 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
