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刺参(Apostichopus japonicus)感染两种病原菌前后体内凝集素的分离纯化与性质研究

摘要第1-6页
Abstract第6-15页
第一章 文献综述第15-27页
 1 凝集素研究现状第15-18页
   ·凝集素简介第15页
   ·凝集素的分布第15页
   ·凝集素的结构第15页
   ·凝集素的分类第15-16页
   ·凝集素的特性第16-17页
     ·能特异性地与受体结合第16-17页
     ·能改变受体物质的生物学特性第17页
   ·凝集素在生物学研究中的应用第17-18页
     ·凝集素可用于恶性肿瘤等疾病的诊断第17页
     ·利用凝集素来设计抗菌、抗病毒药物第17-18页
     ·利用凝集素设计“生物导弹”第18页
  2 仿刺参研究现状第18-24页
   ·海参简介第18-19页
     ·分类地位第18页
     ·生活习性第18页
     ·种类与分布第18-19页
   ·仿刺参简介第19-20页
     ·仿刺参的分类地位第19页
     ·形态特征第19-20页
     ·仿刺参分布第20页
     ·生活习性第20页
     ·生活史第20页
     ·营养价值第20页
   ·仿刺参养殖业及其对生态环境的影响第20-21页
     ·仿刺参养殖业的发展第20-21页
     ·养殖仿刺参业对生态环境的影响第21页
   ·仿刺参养殖业病害问题第21-24页
     ·研究现状第21-22页
     ·病害类型第22-24页
 3 研究目的和意义第24-27页
第二章 致病菌感染实验第27-32页
 1 实验材料与方法第27-29页
   ·实验材料第27页
   ·实验仪器设备第27-28页
   ·实验药品第28页
   ·培养基配方第28页
   ·制备菌悬液第28页
   ·准备致病菌感染场所第28页
   ·仿刺参的前处理第28页
   ·加入菌悬液第28页
   ·观察记录第28-29页
 2 实验结果及讨论第29-31页
   ·致病菌感染健康仿刺参第29-31页
   ·讨论第31页
 3 小结第31-32页
第三章 仿刺参凝集素(AJL)的分离纯化与性质鉴定第32-51页
 1 实验材料与方法第32-40页
   ·实验材料第32页
   ·实验仪器设备第32页
   ·实验药品第32-33页
   ·可溶性蛋白质浓度测定第33页
   ·凝集素活力测定方法第33页
   ·凝集素纯化鉴定路线第33-34页
   ·凝集素分离纯化第34-36页
     ·试剂配制第34-35页
     ·粗提液制备第35页
     ·硫酸铵分级第35页
     ·DEAE-离子交换层析第35-36页
     ·Sephadex G-100凝胶过滤层析第36页
   ·凝集素性质鉴定第36-40页
     ·试剂配制第36-37页
     ·亚基分子量的测定第37-39页
     ·血凝活性的测定第39页
     ·热稳定性试验第39页
     ·pH 对血凝活性的影响第39-40页
     ·EDTA 及二价金属离子对血凝活性的影响第40页
     ·糖抑制实验第40页
 2 实验结果及讨论第40-49页
   ·实验结果第40-46页
     ·凝集素的纯化第40-43页
     ·仿刺参凝集素亚基分子量第43-44页
     ·3种仿刺参凝集素的血凝活性第44页
     ·热稳定性第44-45页
     ·pH 对3组凝集素血凝活性的影响第45页
     ·EDTA 及金属离子对3组凝集素血凝活性的抑制作用第45页
     ·糖抑制试验第45-46页
   ·凝集素纯化方法讨论第46-48页
     ·有关硫酸铵分级范围第46页
     ·关于离子柱层析第46-47页
     ·关于分子筛层析第47-48页
   ·关于凝集素性质鉴定第48-49页
     ·亚基分子量的确定第48页
     ·关于温度、pH 对凝集素活性的影响第48页
     ·抑制实验第48-49页
   ·制备红细胞悬液的注意事项第49页
 3 小结第49-51页
Chapter Ⅰ Literature Review第51-63页
 1 Researching Status of Lectin第51-54页
   ·About Lectin第51页
   ·Distribution第51页
   ·Structure第51页
   ·Classification第51-52页
   ·Characteristic第52-53页
     ·Combining with receptor specifically第52-53页
     ·Change receptor’characteristic第53页
   ·Application of Lectin in Biology Research第53-54页
     ·Diagnosis of malignant tumor第53页
     ·Design the antibiont and antiviral drug by the lectin第53-54页
     ·Design "biological missile" by lectin第54页
 2 Present researches of Apostichopus japonicus第54-60页
   ·Brief introduction of sea cucumber第54-55页
     ·Status第54页
     ·Habit第54页
     ·Species and distribution第54-55页
   ·Brief introduction of Apostichopus japonicus第55-56页
     ·Status第55页
     ·Morphological Characteristics第55-56页
     ·Distribution第56页
     ·Habit第56页
     ·Life history第56页
     ·Nutritional value第56页
   ·Rearing industry of Apostichopus japonicus and the environment第56-57页
     ·Development of rearing industry第56-57页
     ·Influence on ecological environment第57页
   ·Diseases of rearing industry第57-60页
     ·Researching Status第57-58页
     ·Type of diseases第58-60页
 3 The purpose and significance第60-63页
Chapter Ⅱ Infect Apostichopus japonicus by two pathogens第63-68页
 1 Materials and Methods第63-65页
   ·Materials第63页
   ·Equipments第63-64页
   ·Reagents第64页
   ·Formula of medium第64页
   ·Prepare suspension of bacteria第64页
   ·Prepare places for infection第64页
   ·Pre-treatment of Apostichopus japonicus第64页
   ·Inject the suspension of bacteria第64-65页
   ·Observe and record第65页
 2 Results and discussion第65-67页
   ·Pathogens infect healthy Apostichopus japonicus第65-67页
   ·Discussion第67页
 3 Conclusion第67-68页
Chapter III Isolation, purification and properties of lectins from Apostichopus japonicus第68-87页
 1 Materials and Methods第68-76页
   ·Materials第68页
   ·Equipments第68页
   ·Reagents第68-69页
   ·Determine the concentration of soluble protein第69页
   ·Determine hemagglutinating activity第69页
   ·Course of purification and identification第69-70页
   ·Isolation and purification第70-72页
     ·Prepare reagents第70页
     ·Prepare crude extract第70-71页
     ·Ammonium sulfate fractionation第71页
     ·DEAE-Sepharose-F.F第71页
     ·Sephadex G-100第71-72页
   ·Characterization of lectins第72-76页
     ·Prepare reagents第72-73页
     ·Determine molecular weight of subunit第73-75页
     ·Determine hemagglutinating activity第75页
     ·Thermal stability of lectins第75页
     ·Affection of pH第75-76页
     ·Affection of EDTA and divalent metal ion第76页
     ·Inhibition of hemagglutinating activity of lectin by sugers第76页
 2 Results and discussion第76-85页
   ·Results第76-82页
     ·Purification of lectin第76-79页
     ·Molecular weight of subunit第79-80页
     ·Hemagglutinating activity of the AJL(CK,C6,TB )第80页
     ·Thermal stability of lectins第80-81页
     ·Affection of pH第81页
     ·Affection of EDTA and divalent metal ion第81页
     ·Inhibition by sugers and glycoprotein第81-82页
   ·Discussion about the purification第82-83页
     ·About the range of ammonium sulfate fractionation第82页
     ·About ion exchange chromatography第82-83页
     ·About molecular sieve chromatography第83页
   ·About the characterization of lectins第83-85页
     ·Determine molecular of the subunit第83-84页
     ·About the affection of temperature and pH第84页
     ·About the inhibition第84-85页
   ·About the Suspension of erythrocyte第85页
 3 Conclusion第85-87页
参考文献第87-94页
附录第94-95页
致谢第95-96页
攻读硕士学位期间发表学术论文第96页

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