摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
第一章 引言 | 第7-16页 |
·阪崎克罗诺杆菌的研究进展 | 第7-9页 |
·阪崎克罗诺杆菌的系谱及生理生化性质 | 第7页 |
·阪崎克罗诺杆菌的污染与致病性 | 第7-8页 |
·阪崎克罗诺杆菌的分离与检测 | 第8-9页 |
·菌膜 | 第9-11页 |
·菌膜的概念、形成过程及危害 | 第9-10页 |
·影响菌膜形成的因素 | 第10-11页 |
·脂多糖 | 第11-14页 |
·脂多糖的组成及其生物合成途径 | 第11页 |
·脂多糖的功能 | 第11-14页 |
·立题背景与意义 | 第14页 |
·课题研究内容和研究目标 | 第14-16页 |
第二章 实验材料与方法 | 第16-26页 |
·实验材料 | 第16-18页 |
·菌株、质粒及引物 | 第16页 |
·培养基 | 第16-17页 |
·试剂、试剂盒与工具酶 | 第17页 |
·主要仪器 | 第17-18页 |
·构建LPS 结构突变株LWW02 | 第18-20页 |
·质粒及基因组的提取 | 第18页 |
·PCR 体系及反应条件 | 第18页 |
·酶切、连接反应条件 | 第18页 |
·阪崎克罗诺杆菌LPS 生物合成相关基因ESA_04107 的敲除 | 第18-20页 |
·阪崎克罗诺杆菌LPS 生物合成相关基因ESA_04107 的回补 | 第20页 |
·LPS 结构突变株LWW02 的验证 | 第20-22页 |
·LPS 的提取及SDS-PAGE 分析 | 第20-21页 |
·Kd0_2-lipid A 的提取纯化及TLC、ESI/MS 分析 | 第21-22页 |
·RT-PCR 考察waaC 基因敲除后ESA_04108 基因的表达水平差异 | 第22页 |
·分析LPS 结构突变株LWW02 的细胞生长速率、细胞形态变化 | 第22-23页 |
·生长速率的测定 | 第22-23页 |
·TEM 观察细胞形态 | 第23页 |
·分析LPS 结构突变株LWW02 的菌膜形成能力 | 第23-26页 |
·测定亲疏水介质表面的菌膜形成能力 | 第23页 |
·测定细胞表面疏水性 | 第23-24页 |
·测定细胞外膜通透性 | 第24页 |
·自凝集能力测定 | 第24页 |
·蒽酮比色法测定胞外多糖含量 | 第24-25页 |
·测定黄色素分泌量 | 第25页 |
·运动性分析 | 第25-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-42页 |
·阪崎克罗诺杆菌的庚糖基转移酶I 编码基因的鉴定 | 第26-30页 |
·LPS 结构突变株LWW02 的构建 | 第26页 |
·LPS 结构突变株LWW02 的基因水平验证 | 第26-27页 |
·突变株LWW02 的LPS 结构分析及验证 | 第27-30页 |
·阶段小结 | 第30页 |
·通过RT-PCR 考察waaC 基因敲除后ESA_04108 基因的表达水平差异 | 第30-31页 |
·RT-PCR 考察ESA_04108 基因表达水平差异 | 第30-31页 |
·阶段小结 | 第31页 |
·LPS 结构突变株LWW02 的细胞生长速率、细胞形态分析 | 第31-33页 |
·生长速率测定 | 第31-32页 |
·TEM 观察细胞形态变化 | 第32页 |
·阶段小结 | 第32-33页 |
·LPS 结构突变株LWW02 的菌膜形成能力变化的研究 | 第33-40页 |
·亲疏水介质表面的菌膜形成能力分析 | 第33-35页 |
·从细胞表面疏水性角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第35-36页 |
·从细胞外膜通透性角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第36-37页 |
·从自凝集能力角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第37-38页 |
·从胞外多糖含量角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第38-39页 |
·从黄色素产量角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第39页 |
·从运动性角度分析LWW02 的菌膜形成能力变化 | 第39-40页 |
·阶段小结 | 第40页 |
·结论 | 第40-41页 |
·展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第50页 |