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马链球菌兽疫亚种融合蛋白亚单位疫苗的研制

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一篇 文献综述第10-24页
 第一章 猪链球菌病的研究进展第10-24页
  1 病原第10-11页
  2 流行病学第11页
  3 临床症状第11-12页
  4 毒力因子第12-15页
  5 发病机理第15-16页
  6 猪链球菌的诊断与鉴定第16-18页
  7 结束语第18页
  参考文献第18-24页
第二篇 实验研究第24-54页
 第二章 马链球菌兽疫亚种ATCC35246菌株SzP、FNZ、ZAG部分片段的原核表达及免疫保护试验第24-37页
  1 材料与方法第25-31页
   ·菌株,培养基及培养条件第25页
   ·酶和试剂第25页
   ·PCR引物设计第25-26页
   ·细菌基因组的提取第26页
   ·PCR扩增第26页
   ·PCR产物酶切与回收第26-27页
   ·连接反应第27-28页
   ·BL21感受态细胞的制备第28页
   ·连接产物的转化(热激法)第28页
   ·阳性克隆的筛选第28-29页
   ·重组蛋白的表达第29-30页
   ·Western blot检测融合蛋白第30-31页
   ·免疫保护试验第31页
  2 结果第31-34页
   ·PCR结果第31-32页
   ·重组质粒的鉴定第32页
   ·重组质粒的表达第32页
   ·重组蛋白的纯化及Western blot分析第32页
   ·重组蛋白的免疫效力第32-34页
  3 讨论第34-35页
  参考文献第35-37页
 第三章 马链球菌兽疫亚种ATCC35246菌株SzP、FNZ、ZAG基因融合载体的构建与表达第37-47页
  1 材料与方法第37-42页
   ·菌株,培养基及培养条件第37-38页
   ·酶和试剂第38页
   ·PCR引物设计第38页
   ·细菌基因组的提取第38-39页
   ·PCR扩增第39页
   ·串联表达载体pET32a-szp-fnz-zag的构建及鉴定第39-40页
   ·重组质粒在大肠杆菌中的表达第40页
   ·目的蛋白的纯化第40-41页
   ·重组蛋白的Western blot分析第41-42页
  2 结果第42页
   ·PCR第42页
   ·重组质粒的双酶切鉴定第42页
   ·重组质粒的表达第42页
   ·Western blot分析第42页
  3 讨论第42-44页
  参考文献第44-47页
 第四章 动物保护试验第47-54页
  1 材料和方法第47-50页
   ·菌种第47页
   ·引物的设计第47-48页
   ·重组质粒在大肠杆菌的表达第48页
   ·目的蛋白的纯化第48页
   ·重组蛋白免疫原性分析第48-50页
  2 结果第50-51页
   ·重组蛋白的免疫效力第50页
   ·重组蛋白引起的细胞免疫应答第50-51页
  3 讨论第51-52页
  参考文献第52-54页
附录 常用试剂的配制第54-56页
全文总结第56-57页
致谢第57页

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