| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 前言 | 第15-26页 |
| ·根结线虫及其危害 | 第15-16页 |
| ·分类地位 | 第15页 |
| ·形态特征 | 第15页 |
| ·侵染及危害 | 第15-16页 |
| ·根结线虫的防治 | 第16页 |
| ·Ras 蛋白及其信号途径的研究进展 | 第16-21页 |
| ·Ras 蛋白 | 第17页 |
| ·Ras 信号途径 | 第17-18页 |
| ·Ras 信号途径对线虫C.elegans 生长发育的调控 | 第18-21页 |
| ·Ras 信号途径与其他信号途径的互作 | 第21页 |
| ·RNAi 研究现状 | 第21-24页 |
| ·RNAi 的发现 | 第21-22页 |
| ·RNAi 的机制 | 第22页 |
| ·RNAi 技术的应用 | 第22-24页 |
| ·科学问题的提出 | 第24页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 let-60 基因克隆、结构分析及生物信息学分析 | 第26-53页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·生物材料 | 第26页 |
| ·主要试剂盒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·试剂配制 | 第27页 |
| ·试验器材 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-39页 |
| ·植物材料培养 | 第28页 |
| ·南方根结线虫接种 | 第28页 |
| ·南方根结线虫二龄幼虫的收集 | 第28页 |
| ·南方根结线虫总RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第29页 |
| ·let-60 基因片段的克隆 | 第29-32页 |
| ·RACE 法扩增let-60 cDNA 全长 | 第32-34页 |
| ·PCR 扩增获得let-60 基因开放阅读框序列 | 第34-35页 |
| ·let-60 基因内含子的扩增 | 第35-36页 |
| ·let-60 基因的Southern 杂交 | 第36-39页 |
| ·Ras 蛋白的生物信息学分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-51页 |
| ·RNA 的质量 | 第39-40页 |
| ·目的基因扩增结果 | 第40-41页 |
| ·RACE 结果与分析 | 第41页 |
| ·let-60 开放阅读框（ORF）序列的扩增 | 第41-42页 |
| ·南方根结线虫let-60 基因的编码区序列及预测的氨基酸序列 | 第42-44页 |
| ·let-60 内含子的扩增结果与分析 | 第44-45页 |
| ·Southern 杂交结果与分析 | 第45-47页 |
| ·let-60 基因编码的Ras 蛋白的结构分析及功能预测 | 第47-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 let-60 基因原核表达及其在不同虫态中的表达分析 | 第53-62页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·生物材料 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53页 |
| ·溶液配制 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-58页 |
| ·南方根结线虫的收集 | 第53-54页 |
| ·let-60 基因的原核表达 | 第54-57页 |
| ·let-60 基因在南方根结线虫不同发育态虫体中的表达分析 | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-60页 |
| ·let-60 基因的原核表达结果分析 | 第58-59页 |
| ·let-60 在南方根结线虫不同发育虫态中的表达分析 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 RNAi 介导的 let-60 功能初步分析 | 第62-72页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·生物材料 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·溶液配制 | 第62页 |
| ·试验方法 | 第62-67页 |
| ·dsRNA 的合成 | 第62-66页 |
| ·南方根结线虫二龄幼虫的干扰 | 第66页 |
| ·半定量PCR 分析RNAi 后靶标基因表达量 | 第66-67页 |
| ·结果与分析 | 第67-71页 |
| ·dsRNA 的合成质量分析 | 第67-68页 |
| ·dsRNA 浸泡体系的建立 | 第68页 |
| ·dsRNA 的干扰效应验证 | 第68-69页 |
| ·RNAi 后let-60 基因的mRNA 表达分析 | 第69-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| 第五章 全文总结 | 第72-75页 |
| ·结论 | 第72-73页 |
| ·创新点 | 第73-74页 |
| ·需要继续研究的内容 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 作者简历 | 第84页 |
