| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-27页 |
| 一 猪增生性肠炎的研究进展 | 第12-23页 |
| 1 病原学 | 第13-16页 |
| ·研究进展 | 第13页 |
| ·分类地位 | 第13-15页 |
| ·形态与染色特性 | 第15页 |
| ·培养特性 | 第15页 |
| ·致病性 | 第15-16页 |
| 2 流行特点 | 第16页 |
| 3 发病机理 | 第16-17页 |
| 4 临床症状 | 第17-18页 |
| 5 病理变化 | 第18-19页 |
| 6 诊断方法 | 第19-21页 |
| ·涂片镜检 | 第19页 |
| ·组织学检查 | 第19页 |
| ·血清学检测技术 | 第19-20页 |
| ·分子生物学技术 | 第20-21页 |
| ·PCR 法 | 第20-21页 |
| ·核酸探针杂交法检查 | 第21页 |
| 7 防制措施 | 第21-23页 |
| ·预防 | 第21-22页 |
| ·治疗 | 第22-23页 |
| 二 聚合酶链反应（PCR）的原理和应用 | 第23-27页 |
| 1 PCR 的基本原理 | 第23-25页 |
| ·PCR 及其工作原理 | 第23页 |
| ·PCR 反应的基本步骤 | 第23-24页 |
| ·PCR 的引物设计 | 第24-25页 |
| ·PCR 引物设计的原则 | 第24页 |
| ·引物设计的方法 | 第24-25页 |
| ·PCR 模板的制备 | 第25页 |
| ·PCR 技术特点 | 第25页 |
| ·PCR 基本反应及反应条件的控制 | 第25页 |
| ·PCR 试验中注意的事项 | 第25页 |
| 2 PCR 技术的应用 | 第25-27页 |
| ·在医学上的应用 | 第26页 |
| ·在其他领域的应用 | 第26-27页 |
| 第二部分 研究内容 | 第27-55页 |
| 第一章 猪增生性肠炎临床学与病理学观察 | 第27-35页 |
| 1 材料 | 第27-29页 |
| ·病例来源 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-28页 |
| ·相关试剂及配制 | 第27-28页 |
| ·主要仪器设备和器材 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-31页 |
| ·临床观察 | 第29页 |
| ·剖检与组织切片病理学分析 | 第29-30页 |
| ·制作组织切片 | 第29页 |
| ·载玻片及盖玻片的制备 | 第29页 |
| ·组织包埋及切片 | 第29-30页 |
| ·苏木素-伊红（H.E）染色程序 | 第30页 |
| ·ZIEHL-NEELSEN 氏抗酸染色 | 第30页 |
| ·姬姆萨氏染色 | 第30页 |
| ·革兰氏染色 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-33页 |
| ·临床症状 | 第31页 |
| ·病理变化 | 第31-32页 |
| ·病理切片 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第二章 猪增生性肠炎粪便PCR 诊断方法的建立和初步应用 | 第35-54页 |
| 1 材料 | 第35-39页 |
| ·病料 | 第35页 |
| ·质粒与菌株 | 第35页 |
| ·试剂和器材 | 第35-39页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第35-36页 |
| ·主要仪器及设备 | 第36-37页 |
| ·所需试剂配制 | 第37-39页 |
| 2 方法 | 第39-46页 |
| ·胞内劳森氏菌DNA 的提取 | 第39-41页 |
| ·肠粘膜匀浆胞内劳森氏菌DNA 的提取（肠粘膜提取） | 第39-40页 |
| ·粪样中胞内劳森氏菌DNA 提取(粪便提取) | 第40页 |
| ·粪样中胞内劳森氏菌DNA 试剂盒提取法（粪便试剂盒提取）（E.Z.N.A.TM STOOL DNA KIT） | 第40-41页 |
| ·胞内劳森氏菌特异性序列的PCR 扩增 | 第41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第41-42页 |
| ·PCR 扩增条件的优化 | 第42页 |
| ·PCR 产物的回收与克隆 | 第42-45页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第42页 |
| ·目的基因的克隆 | 第42-45页 |
| ·测序与序列分析 | 第45页 |
| ·标准品浓度的测定 | 第45页 |
| ·特异性及敏感性试验 | 第45-46页 |
| ·特异性试验 | 第45-46页 |
| ·敏感性试验 | 第46页 |
| 3 胞内劳森氏菌PCR 检测技术的应用 | 第46页 |
| 4 结果 | 第46-53页 |
| ·提取方法的筛选结果 | 第46-47页 |
| ·PCR 扩增体系优化结果 | 第47-49页 |
| ·镁离子浓度的优化结果 | 第47页 |
| ·引物浓度优化结果 | 第47-48页 |
| ·模板浓度的优化结果 | 第48-49页 |
| ·退火温度优化结果 | 第49页 |
| ·特异性及敏感性试验结果 | 第49-51页 |
| ·特异性试验结果 | 第49-50页 |
| ·敏感性试验结果 | 第50-51页 |
| ·应用建立起的PCR 检测方法检测PPE 的检测结果 | 第51页 |
| ·胞内劳森氏菌PCR 检测技术的初步建立 | 第51-52页 |
| ·酶切结果 | 第52页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-54页 |
| 第三章 结论 | 第54-55页 |
| 本研究创新点及后续研究工作 | 第55-56页 |
| 1 本研究创新点 | 第55页 |
| 2 后续研究工作 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
