| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·Bt 毒蛋白抗虫植物基因工程研究 | 第11-13页 |
| ·Bt 来源及分类 | 第11页 |
| ·Bt 杀虫晶体蛋白的分子结构与功能 | 第11-12页 |
| ·苏云金芽孢杆菌ICP 的杀虫机理 | 第12页 |
| ·Bt 抗虫基因工程研究进展 | 第12-13页 |
| ·存在问题 | 第13页 |
| ·苹果属植物叶片再生不定芽技术研究 | 第13-14页 |
| ·苹果属植物遗传转化研究进展 | 第14-17页 |
| ·遗传转化的基本方法 | 第14-15页 |
| ·苹果属植物转基因研究进展 | 第15页 |
| ·苹果属植物遗传转化存在问题 | 第15-17页 |
| 第二章 材料和方法 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·仪器 | 第17页 |
| ·化学试剂 | 第17-18页 |
| ·工具酶和试剂盒 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18-19页 |
| ·载体 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-29页 |
| ·PCR 引物的设计及合成 | 第21页 |
| ·PCR 反应 | 第21-22页 |
| ·目的片段分离回收 | 第22页 |
| ·双酶切反应 | 第22-23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·CaCl_2 法制备感受态细胞和连接产物转化 | 第23页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·表达载体的构建和鉴定 | 第24-25页 |
| ·外源基因在 E.coli 中的表达和检测分析 | 第25页 |
| ·生物活性测定 | 第25-26页 |
| ·海棠花高效再生体系的建立与优化 | 第26-27页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第27-28页 |
| ·转基因植株检测 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-39页 |
| ·Cry1Ab 基因的克隆与测序 | 第29页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第29-31页 |
| ·pET-28a-cry1Ab 重组原核表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·pBI121-egt-F 重组中间载体的构建 | 第30页 |
| ·pBI121-cry1Ab重组植物表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白在BL21(DE3) 中的表达 | 第31-32页 |
| ·表达蛋白的杀虫活性测定 | 第32页 |
| ·植物组织培养 | 第32-37页 |
| ·IBA 与6-BA 不同浓度配比对芽增值及生长的影响 | 第32-33页 |
| ·IBA 与TDZ 不同浓度配比对叶盘芽分化的的影响 | 第33-35页 |
| ·叶片愈伤组织的形成及不定芽的分化 | 第35页 |
| ·海棠花的生根诱导 | 第35-36页 |
| ·叶片极性对海棠花叶再生的影响 | 第36-37页 |
| ·抗生素浓度对海棠花叶盘再生不定芽的影响 | 第37页 |
| ·转基因植株鉴定 | 第37-39页 |
| ·GUS 检测 | 第37-38页 |
| ·PCR 检测 | 第38-39页 |
| 第四章 结论 | 第39-40页 |
| ·海棠花离体再生体系的建立与优化 | 第39页 |
| ·苏云金芽孢杆菌Cry1Ab 基因的克隆和原核表达 | 第39页 |
| ·根癌农杆菌介导的遗传转化 | 第39-40页 |
| 第五章 讨论 | 第40-42页 |
| ·海棠花叶片高效再生体系的优化 | 第40-41页 |
| ·海棠花遗传转化体系的建立 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 作者简介 | 第48页 |
