| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 序言 | 第12-25页 |
| ·鼻/肺免疫DNA疫苗 | 第12-13页 |
| ·口蹄疫核酸疫苗研究进展 | 第13-18页 |
| ·口蹄疫核酸疫苗的抗原形式 | 第13-14页 |
| ·口蹄疫核酸疫苗佐剂 | 第14-17页 |
| ·口蹄疫核酸疫苗的递送方式 | 第17-18页 |
| ·PLGA纳米/微球作为核酸载体的研究进展 | 第18-25页 |
| ·引言 | 第18页 |
| ·载核酸PLGA颗粒制备及其对转化的影响 | 第18-21页 |
| ·PLGA增强核酸递呈 | 第21-25页 |
| 第二章 牛IL-6基因克隆及其在大鼠体内活性预测 | 第25-31页 |
| ·材料和方法 | 第25-26页 |
| ·菌种和实验动物 | 第25页 |
| ·主要试剂、质粒及菌株 | 第25页 |
| ·牛IL-6基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·序列比对及进化分析 | 第26页 |
| ·牛IL-6、大鼠IL-6Ra和大鼠gp130蛋白的同源建模及可靠性分析 | 第26页 |
| ·活性位点分析 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-30页 |
| ·牛淋巴细胞IL-6基因的RT-PCR | 第26页 |
| ·IL-6基因片段的克隆 | 第26-27页 |
| ·IL-6进化分析结果 | 第27页 |
| ·同源建模 | 第27-28页 |
| ·活性位点 | 第28-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| 第三章 口蹄疫病毒真核表达质粒的构建 | 第31-39页 |
| ·材料与方法 | 第31-34页 |
| ·菌株与质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要溶液 | 第31-32页 |
| ·仪器 | 第32页 |
| ·引物的设计与合成 | 第32页 |
| ·限制性内切酶酶切反应 | 第32页 |
| ·纯化片段与载体的连接 | 第32-33页 |
| ·连接产物的转化 | 第33-34页 |
| ·小量提取质粒DNA | 第34页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·重组质粒的酶切和PCR鉴定结果 | 第34-36页 |
| ·测序鉴定 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 口蹄疫病毒重组质粒在BHK-21细胞中的表达 | 第39-43页 |
| ·材料与方法 | 第39-40页 |
| ·主要材料 | 第39页 |
| ·重组质粒的纯化回收 | 第39页 |
| ·BHK-21细胞的转染 | 第39页 |
| ·间接免疫荧光检测 | 第39-40页 |
| ·双抗体夹心ELISA检测口蹄疫衣壳蛋白 | 第40页 |
| ·病毒空衣壳的电镜观察 | 第40页 |
| ·结果 | 第40-42页 |
| ·夹心ELISA的结果 | 第40-41页 |
| ·间接免疫荧光检测结果 | 第41页 |
| ·口蹄疫病毒空衣壳的电镜观察 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第五章 吸附壳聚糖PLGA纳米/微球的制备及质粒吸附的相关研究 | 第43-49页 |
| ·方法与材料 | 第43-44页 |
| ·材料与仪器 | 第43页 |
| ·吸附壳聚糖PLGA纳米球的制备 | 第43-44页 |
| ·颗粒直径和表面电势的测定 | 第44页 |
| ·DNase Ⅰ降解质粒-纳米颗粒结合物 | 第44页 |
| ·pH值对颗粒吸附质粒的影响 | 第44页 |
| ·壳聚糖浓度对颗粒吸附质粒的影响 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·颗粒直径和表面电势的测定 | 第44-45页 |
| ·颗粒的形态结构 | 第45页 |
| ·DNase Ⅰ降解质粒-纳米颗粒结合物 | 第45-46页 |
| ·pH值影响颗粒对质粒的吸附率 | 第46-47页 |
| ·壳聚糖浓度对颗粒吸附质粒的影响 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 吸附壳聚糖PLGA纳米/微米球载口蹄疫核酸疫苗对豚鼠的免疫效果研究 | 第49-54页 |
| ·材料与方法 | 第49-50页 |
| ·病毒、实验动物 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·质粒的大量提取 | 第49-50页 |
| ·实验动物免疫 | 第50页 |
| ·FMDV特异抗体的检测 | 第50页 |
| ·攻毒试验 | 第50页 |
| ·统计分析 | 第50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·抗口蹄疫特异性抗体 | 第50-51页 |
| ·攻毒试验 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-65页 |
| 附录 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
