摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-12页 |
第一章 绪论 | 第12-22页 |
·引言 | 第12-21页 |
·杆状病毒表达载体的研究进展 | 第12-19页 |
·猪圆环病毒的疫苗的研究进展 | 第19-21页 |
·研究目的和意义 | 第21-22页 |
·研究目的 | 第21页 |
·研究意义 | 第21页 |
·研究内容 | 第21-22页 |
第二章 BmNPV 穿梭质粒(Bm-Bacmid)的构建 | 第22-43页 |
·材料与方法 | 第22-25页 |
·材料 | 第22-23页 |
·其它主要试剂 | 第23页 |
·常用试剂的配制 | 第23页 |
·杆状病毒DNA提取溶液 | 第23页 |
·Bm-Bacmid提取溶液 | 第23页 |
·本章所用引物 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-36页 |
·碱法少量快速抽提质粒DNA | 第25页 |
·病毒DNA的提取 | 第25页 |
·Bacmid的提取 | 第25-26页 |
·玻璃奶法纯化回收DNA 片段 | 第26页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
·质粒DNA 或连接产物的转化热激感受态细胞 | 第27页 |
·电激转化 | 第27-28页 |
·重组质粒的鉴定 | 第28页 |
·BmNPV的chitinase和cathepsin敲除及CopyControl pCC1ABC Vector的引入 | 第28-32页 |
·多角体基因phd, ORF1629 的敲除 | 第32-34页 |
·BmNPV的egt基因的敲除 | 第34-36页 |
·结果 | 第36-41页 |
·BmNPV的chitinase(chi)和cathepsin(cat)两个基因的敲除 | 第36-38页 |
·L-阿拉伯糖诱导多拷贝的结果 | 第38-39页 |
·BmNPV的ORF1629 的敲除 | 第39-40页 |
·BmNPV的egt基因的敲除 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第三章 II型猪圆环病毒核衣壳蛋白的表达 | 第43-54页 |
·材料与方法 | 第43-46页 |
·材料 | 第43页 |
·试剂配制 | 第43-46页 |
·方法 | 第46-50页 |
·实验总流程图 | 第46页 |
·PCV2 的ORF2 的克隆 | 第46-48页 |
·原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
·PCV核衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第49页 |
·SDS-PAGE电泳分析 | 第49-50页 |
·镍柱亲和层析纯化融合蛋白 | 第50页 |
·融合蛋白的质谱鉴定 | 第50页 |
·多克隆抗体的制备 | 第50页 |
·多克隆抗体的效价测定 | 第50页 |
·结果 | 第50-53页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
·重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
·二级质谱鉴定结果 | 第52-53页 |
·多克隆抗体的效价测定 | 第53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
第四章 全文结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简历 | 第63页 |