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Bm-Bacmid的构建和Ⅱ型猪圆环病毒核衣壳蛋白的原核表达

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第一章 绪论第12-22页
   ·引言第12-21页
     ·杆状病毒表达载体的研究进展第12-19页
     ·猪圆环病毒的疫苗的研究进展第19-21页
   ·研究目的和意义第21-22页
     ·研究目的第21页
     ·研究意义第21页
     ·研究内容第21-22页
 第二章 BmNPV 穿梭质粒(Bm-Bacmid)的构建第22-43页
   ·材料与方法第22-25页
     ·材料第22-23页
     ·其它主要试剂第23页
     ·常用试剂的配制第23页
     ·杆状病毒DNA提取溶液第23页
     ·Bm-Bacmid提取溶液第23页
     ·本章所用引物第23-25页
   ·方法第25-36页
     ·碱法少量快速抽提质粒DNA第25页
     ·病毒DNA的提取第25页
     ·Bacmid的提取第25-26页
     ·玻璃奶法纯化回收DNA 片段第26页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第26-27页
     ·质粒DNA 或连接产物的转化热激感受态细胞第27页
     ·电激转化第27-28页
     ·重组质粒的鉴定第28页
     ·BmNPV的chitinase和cathepsin敲除及CopyControl pCC1ABC Vector的引入第28-32页
     ·多角体基因phd, ORF1629 的敲除第32-34页
     ·BmNPV的egt基因的敲除第34-36页
   ·结果第36-41页
     ·BmNPV的chitinase(chi)和cathepsin(cat)两个基因的敲除第36-38页
     ·L-阿拉伯糖诱导多拷贝的结果第38-39页
     ·BmNPV的ORF1629 的敲除第39-40页
     ·BmNPV的egt基因的敲除第40-41页
   ·讨论第41-43页
第三章 II型猪圆环病毒核衣壳蛋白的表达第43-54页
   ·材料与方法第43-46页
     ·材料第43页
     ·试剂配制第43-46页
   ·方法第46-50页
     ·实验总流程图第46页
     ·PCV2 的ORF2 的克隆第46-48页
     ·原核表达载体的构建第48-49页
     ·PCV核衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达第49页
     ·SDS-PAGE电泳分析第49-50页
     ·镍柱亲和层析纯化融合蛋白第50页
     ·融合蛋白的质谱鉴定第50页
     ·多克隆抗体的制备第50页
     ·多克隆抗体的效价测定第50页
   ·结果第50-53页
     ·重组蛋白的诱导表达第50-51页
     ·重组蛋白的纯化第51-52页
     ·二级质谱鉴定结果第52-53页
     ·多克隆抗体的效价测定第53页
   ·讨论第53-54页
第四章 全文结论第54-55页
参考文献第55-62页
致谢第62-63页
作者简历第63页

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