| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一部分 | 第9-34页 |
| 1 文献综述 | 第10-14页 |
| ·PPO 的生理功能 | 第10页 |
| ·PPO 的酶催化机制 | 第10-11页 |
| ·PPO 的分子生物学研究进展 | 第11-14页 |
| ·PPO 基因的克隆 | 第11-12页 |
| ·PPO 基因的表达 | 第12-14页 |
| 2 引言 | 第14-16页 |
| ·本研究的主要内容及意义 | 第14页 |
| ·研究内容 | 第14页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第14页 |
| ·本研究的技术路线 | 第14-16页 |
| ·双孢蘑菇酶促褐变的相关因素分析 | 第14-15页 |
| ·双孢蘑菇PPO 基因组及其启动子序列克隆和分析 | 第15-16页 |
| 3 材料与方法 | 第16-21页 |
| ·双孢蘑菇酶促褐变相关酶活性变化 | 第16-17页 |
| ·试验材料及处理 | 第16页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第16页 |
| ·比色度测定 | 第16页 |
| ·Folin-酚比色法测定总酚含量 | 第16-17页 |
| ·多酚氧化酶(PPO)活性测定 | 第17页 |
| ·苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性测定 | 第17页 |
| ·双孢蘑菇 PPO 基因及其启动子序列克隆 | 第17-20页 |
| ·试验材料 | 第17-18页 |
| ·酶、试剂盒和相关试剂 | 第18页 |
| ·主要数据库及软件 | 第18页 |
| ·PCR 扩增双孢蘑菇PPO 基因组全长序列 | 第18-19页 |
| ·启动子序列全长获得 | 第19-20页 |
| ·同源性分析及系统进化树构建 | 第20页 |
| ·基因表达的半定量RT-PCR 分析 | 第20-21页 |
| 4 结果与分析 | 第21-30页 |
| ·双孢蘑菇酶促褐变相关酶活性变化 | 第21-23页 |
| ·双孢蘑菇储藏期间褐变度的变化 | 第21页 |
| ·双孢蘑菇储藏期间总酚含量的变化 | 第21-22页 |
| ·双孢蘑菇储藏期间PPO 活性的变化 | 第22-23页 |
| ·双孢蘑菇储藏期间PAL 活性的变化 | 第23页 |
| ·双孢蘑菇PPO 基因及其启动子序列克隆和功能分析 | 第23-30页 |
| ·PPO 基因组全长的获得及序列分析 | 第23-24页 |
| ·PPO 启动子的克隆及序列分析 | 第24-27页 |
| ·进化树分析 | 第27-29页 |
| ·双孢蘑菇PP03 和PP04 基因的表达分析 | 第29-30页 |
| 5 讨论 | 第30-33页 |
| ·双孢蘑菇的褐变与多酚氧化酶的关系 | 第30页 |
| ·双孢蘑菇PPO 基因组序列的克隆 | 第30-31页 |
| ·双孢蘑菇PPO 基因的启动子序列的克隆 | 第31-33页 |
| ·植物启动子核苷酸序列的保守性 | 第31页 |
| ·利用PPO 基因启动子抑制褐变 | 第31-33页 |
| 6 结论 | 第33-34页 |
| 第二部分 | 第34-62页 |
| 1 文献综述 | 第35-42页 |
| ·第一代分子标记及在香菇中的应用 | 第35-36页 |
| ·RFLP | 第35-36页 |
| ·RAPD | 第36页 |
| ·AFLP | 第36页 |
| ·第二代分子标记及在香菇中应用 | 第36-38页 |
| ·ISSR | 第36-37页 |
| ·SSR | 第37-38页 |
| ·第三代分子标记及在香菇中的应用 | 第38-39页 |
| ·SNP | 第38页 |
| ·EST | 第38-39页 |
| ·EST-SSR 的开发过程 | 第39-40页 |
| ·EST-SSR 的研究进展 | 第40-42页 |
| ·EST-SSR 的用途 | 第40-41页 |
| ·EST-SSR 与基因组SSR（gSSR）的比较 | 第41-42页 |
| 2 引言 | 第42-43页 |
| ·本研究的主要内容、目标及意义 | 第42页 |
| ·研究内容和目标 | 第42页 |
| ·研究意义 | 第42页 |
| ·本研究所采取的技术路线 | 第42-43页 |
| 3 材料与方法 | 第43-46页 |
| ·香菇EST 和基因序列的获得 | 第43页 |
| ·香菇EST 和基因序列的前处理 | 第43页 |
| ·序列的组装 | 第43页 |
| ·EST-SSR 位点的搜索 | 第43页 |
| ·EST-SSR 引物的设计 | 第43页 |
| ·ORF 的确定 | 第43页 |
| ·EST-SSR 多态性的分析 | 第43-45页 |
| ·所选香菇材料 | 第43-44页 |
| ·材料DNA 的提取 | 第44页 |
| ·PCR 扩增 | 第44-45页 |
| ·最适退火温度的确定 | 第45页 |
| ·电泳检测 | 第45页 |
| ·统计数据聚类分析 | 第45-46页 |
| 4 结果与分析 | 第46-59页 |
| ·香菇 EST-SSR 信息的处理与分析 | 第46-50页 |
| ·香菇EST 序列的获得与处理 | 第46页 |
| ·EST-SSR 的分布频率和分布特点 | 第46-47页 |
| ·EST-SSR 不同基序类型的分布特点 | 第47-48页 |
| ·EST-SSR 基序不同长度的分布特点 | 第48页 |
| ·EST-SSR 基序重复次数的分布特点 | 第48-49页 |
| ·SSR 在Unigene 上的分布特点 | 第49-50页 |
| ·EST-SSR 标记的开发 | 第50-55页 |
| ·EST-SSR 引物的设计 | 第50页 |
| ·最适退火温度的确定与引物的筛选 | 第50-51页 |
| ·EST-SSR 标记的多态性 | 第51-55页 |
| ·应用EST-SSR 多态性标记检测香菇品种的遗传多样性 | 第55-59页 |
| ·EST-SSR 标记的多态性信息含量（PIC） | 第56页 |
| ·香菇品种的聚类分析 | 第56-59页 |
| 5 讨论 | 第59-61页 |
| ·EST 数据库的应用价值 | 第59页 |
| ·EST-SSR 的分布特征 | 第59-60页 |
| ·EST-SSR 的分布频率 | 第59页 |
| ·EST-SSR 的分布类型 | 第59-60页 |
| ·EST-SSR 引物的扩增率和多态性 | 第60-61页 |
| 6 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简介 | 第74页 |
