英文缩略词表 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-13页 |
前言 | 第13-18页 |
第一部分 大肠杆菌DH5α菌蜕的制备 | 第18-24页 |
实验材料 | 第18-19页 |
一、菌株及质粒 | 第18页 |
二、主要试剂 | 第18页 |
三、主要培养基的配制 | 第18-19页 |
四、主要仪器 | 第19页 |
实验方法 | 第19-21页 |
一、裂解质粒pHH43 的转化及鉴定 | 第19-20页 |
二、DH5α菌蜕的制备 | 第20-21页 |
三、裂解率的计算 | 第21页 |
四、琼脂糖电泳和激光共聚焦观察 | 第21页 |
实验结果 | 第21-23页 |
一、pHH43 的鉴定 | 第21页 |
二、热诱导后的大肠杆菌裂解曲线 | 第21-22页 |
三、裂解率的计算 | 第22页 |
四、琼脂糖电泳和激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第22-23页 |
讨论 | 第23-24页 |
第二部分 BG 装载核酸片段和质粒以及转染抗原递呈细胞 | 第24-33页 |
实验材料 | 第24-25页 |
一、细胞、核酸片段和质粒 | 第24页 |
二、主要试剂 | 第24页 |
三、主要溶液的配制 | 第24-25页 |
四、主要仪器 | 第25页 |
实验方法 | 第25-27页 |
一、大肠杆菌DH5α膜囊的制备 | 第25页 |
二、BG 装载核酸片段 | 第25页 |
三、BG 装载质粒DNA | 第25-26页 |
四、转染巨噬细胞RAW264.7 | 第26-27页 |
实验结果 | 第27-31页 |
一、检测BG 装载核酸片段和质粒DNA 的效率 | 第27-29页 |
二、转染巨噬细胞RAW264.7 | 第29-31页 |
讨论 | 第31-33页 |
第三部分 基于小鼠恒定链mIi 分子的FMDV 复合多表位DNA 疫苗的构建 | 第33-50页 |
实验材料 | 第33-36页 |
一、质粒 | 第33页 |
二、主要试剂 | 第33-34页 |
三、试剂盒 | 第34页 |
四、主要溶液及其配制 | 第34-36页 |
五、主要仪器 | 第36页 |
实验方法 | 第36-44页 |
一、构建含mIi 序列的真核表达载体pDSred-mIi | 第36-38页 |
二、内源性靶向DNA 疫苗的构建 | 第38-42页 |
三、FMDV(141-160)小肽的表达与纯化 | 第42-44页 |
实验结果 | 第44-50页 |
一、pQE31-mIi 的鉴定 | 第44-45页 |
二、内源性靶向DNA 疫苗的构建 | 第45-46页 |
三、FMDV(141-160)小肽的表达与纯化 | 第46-50页 |
第四部分 细胞转染试验和动物试验 | 第50-61页 |
实验材料 | 第50-51页 |
一、实验用细胞和小鼠 | 第50页 |
二、质粒和菌种 | 第50页 |
三、主要试剂 | 第50-51页 |
四、试剂盒 | 第51页 |
五、主要仪器 | 第51页 |
实验方法 | 第51-54页 |
一、m RNA 水平检测FMDV 的表达 | 第51-52页 |
二、小鼠免疫试验 | 第52-53页 |
三、ELISA 检测小鼠血清抗体 | 第53页 |
四、流式检测BG 抗体 | 第53-54页 |
实验结果 | 第54-59页 |
一、m RNA 水平检测FMDV 的表达 | 第54-55页 |
二、小鼠免疫试验 | 第55-57页 |
三、流式检测BG 抗体 | 第57-59页 |
讨论 | 第59-61页 |
全文总结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
个人简历 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
综述 | 第67-74页 |