| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-20页 |
| 缩略词表 | 第20-22页 |
| 第一章 前言 | 第22-25页 |
| 第二章 支气管上皮细胞感染RSV后致淋巴细胞活化作用 | 第25-45页 |
| ·材料与试剂 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-33页 |
| ·永生化人宫颈癌上皮细胞的培养 | 第27页 |
| ·永生化人支气管上皮细胞株的培养 | 第27页 |
| ·RSV病毒悬液的制备 | 第27页 |
| ·TCID50测定RSV病毒悬液的毒力 | 第27-28页 |
| ·RSV感染人支气管上皮细胞 | 第28页 |
| ·光镜下观察持续感染RSV的人支气管上皮细胞 | 第28页 |
| ·电镜下观察持续感染RSV的人支气管上皮细胞 | 第28-29页 |
| ·免疫荧光鉴定持续感染RSV的人支气管上皮细胞 | 第29页 |
| ·提取人外周血淋巴细胞 | 第29-30页 |
| ·人支气管上皮细胞与淋巴细胞共培养 | 第30页 |
| ·淋巴细胞分组 | 第30-31页 |
| ·淋巴细胞因子检测 | 第31-32页 |
| ·将支气管上皮细胞的上清液处理外周血淋巴细胞 | 第32页 |
| ·流式细胞学检测淋巴细胞中Th2、Th17以及Treg亚群的分布 | 第32-33页 |
| ·统计学方法 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-41页 |
| ·RSV病毒悬液的毒力 | 第33-34页 |
| ·光镜下观察人支气管上皮细胞感染RSV后的细胞病变 | 第34-35页 |
| ·免疫荧光鉴定RSV持续感染人支气管上皮细胞模型 | 第35页 |
| ·电镜观察感染RSV后的人支气管上皮细胞 | 第35-36页 |
| ·RSV感染人支气管上皮细胞后诱导淋巴细胞的增殖与凋亡 | 第36-38页 |
| ·RSV感染人支气管上皮细胞后诱导淋巴细胞释放细胞因子 | 第38-39页 |
| ·人支气管上皮细胞感染RSV后的上清液改变Th亚群的分布 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-45页 |
| 第三章 支气管上皮细胞感染RSV后的差异基因表达 | 第45-60页 |
| ·材料与试剂 | 第46页 |
| ·方法 | 第46-51页 |
| ·永生化人支气管上皮细胞株的培养 | 第46-47页 |
| ·RSV感染人支气管上皮细胞 | 第47页 |
| ·免疫荧光鉴定持续感染RSV的人支气管上皮细胞 | 第47页 |
| ·总RNA的提取 | 第47-48页 |
| ·RNA浓度和纯度检测 | 第48页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性 | 第48页 |
| ·cDNA的合成与纯化 | 第48-49页 |
| ·cRNA的合成与纯化 | 第49-50页 |
| ·cRNA与染料的偶联反应 | 第50-51页 |
| ·芯片杂交 | 第51页 |
| ·筛选差异基因 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·RNA质量检测 | 第51页 |
| ·芯片杂交结果 | 第51-53页 |
| ·人支气管上皮细胞感染RSV后的差异基因表达 | 第53-55页 |
| ·人支气管上皮细胞感染RSV后分泌蛋白谱改变 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-60页 |
| 第四章 IL-8和瘦素介导支气管上皮细胞感染RSV后致Th亚群漂移作用 | 第60-77页 |
| ·材料与试剂 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-67页 |
| ·永生化人支气管上皮细胞株的培养 | 第62页 |
| ·RSV感染人支气管上皮细胞 | 第62-63页 |
| ·免疫荧光鉴定持续感染RSV的人支气管上皮细胞 | 第63页 |
| ·总RNA的提取 | 第63页 |
| ·逆转录cDNA | 第63页 |
| ·荧光定量PCR检测IL-8和瘦素(leptin)mRNA的表达 | 第63-64页 |
| ·ELISA检测细胞上清液中IL-8和瘦素(leptin)的浓度 | 第64-65页 |
| ·提取人外周血淋巴细胞 | 第65页 |
| ·IL-8和瘦素作用于淋巴细胞 | 第65页 |
| ·流式细胞学检测淋巴细胞中Th2、Th17以及Treg亚群的分布 | 第65页 |
| ·Western blotting法检测淋巴细胞中ERK1/2蛋白的表达及其磷酸化程度 | 第65-66页 |
| ·免疫荧光检测淋巴细胞中ERK1/2蛋白的表达及其磷酸化程度 | 第66-67页 |
| ·统计学分析 | 第67页 |
| ·结果 | 第67-74页 |
| ·细胞总RNA质量 | 第67页 |
| ·RSV持续感染人支气管上皮细胞中IL-8和瘦素mRNA的表达 | 第67-69页 |
| ·人支气管上皮细胞持续感染RSV后分泌IL-8和瘦素的水平 | 第69-70页 |
| ·IL-8和瘦素对Th细胞亚群分布的影响 | 第70-73页 |
| ·IL-8和瘦素对ERK1/2蛋白表达及其磷酸化的影响 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-77页 |
| 第五章 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-93页 |
| 综述 | 第93-104页 |
| 参考文献 | 第99-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 在读期间主要的研究成果 | 第106页 |
