| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-17页 |
| 1. 同源异型框基因(homeobox genes)简介 | 第10页 |
| 2. Rhox基因家族简介 | 第10-12页 |
| 3. Rhox5的研究进展 | 第12-14页 |
| ·Rhox5的发现及命名 | 第12页 |
| ·Rhox5基因及其表达调控 | 第12-13页 |
| ·Rhox5与生殖 | 第13-14页 |
| ·Rhox5与癌症 | 第14页 |
| 4. PI3K/Akt信号通路简介 | 第14-15页 |
| 5. 鞘脂激活蛋白原(Prosaposin,PSAP)简介 | 第15-16页 |
| 6. 研究目的、意义及创新点 | 第16-17页 |
| ·研究目的 | 第16页 |
| ·研究意义及创新点 | 第16-17页 |
| 第二章 实验仪器与材料 | 第17-22页 |
| 1. 主要仪器 | 第17页 |
| 2. 实验材料 | 第17-22页 |
| ·细胞、菌种及质粒 | 第17-18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要溶液的配制 | 第18-22页 |
| 第三章 Rhox5在前列腺癌细胞中的表达及其稳定沉默细胞系的建立 | 第22-42页 |
| 1. 实验方法 | 第22-34页 |
| ·前列腺癌细胞TRAMP-C2的培养 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测TRAMP-C2细胞中Rhox5的表达 | 第22-24页 |
| ·Western Blot检测TRAMP-C2细胞中Rhox5的表达 | 第24-26页 |
| ·靶向Rhox5的有效siRNA序列的筛选 | 第26-28页 |
| ·靶向Rhox5的shRNA真核表达载体的构建 | 第28-32页 |
| ·Rhox5稳定沉默细胞系的构建 | 第32-34页 |
| 2. 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·TRAMP-C2细胞的培养 | 第34-35页 |
| ·Rhox5在TRAMP-C2细胞中的表达 | 第35-36页 |
| ·靶向Rhox5的siRNA筛选结果 | 第36-38页 |
| ·psilencer 2.1 U6-shRNA重组质粒的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| ·Rhox5稳定沉默细胞系鉴定结果 | 第39-40页 |
| 3. 讨论 | 第40-41页 |
| 4. 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 Rhox5抑制前列腺癌细胞的增殖并促进其凋亡 | 第42-49页 |
| 1. 实验方法 | 第42-43页 |
| ·MTT法检测Rhox5对前列腺癌细胞增殖的影响 | 第42页 |
| ·Annexin V/PI双染法检测Rhox5对前列腺癌细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
| ·Western blot检测Rhox5稳定沉默细胞系中Akt的磷酸化水平 | 第43页 |
| 2. 结果与分析 | 第43-47页 |
| ·Rhox5对前列腺癌细胞增殖的影响 | 第43-45页 |
| ·Rhox5对前列腺癌细胞凋亡的影响 | 第45-46页 |
| ·Rhox5对Akt磷酸化水平的影响 | 第46-47页 |
| 3. 讨论 | 第47-48页 |
| 4. 小结 | 第48-49页 |
| 第五章 Rhox5作用机制探讨 | 第49-57页 |
| 1. 实验方法 | 第49-51页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第49-50页 |
| ·Western blot检测Rhox5稳定沉默细胞系培养上清中PSAP的表达 | 第50页 |
| ·靶向PSAP的有效siRNA序列的筛选 | 第50-51页 |
| ·Western blot检测PSAP对Akt信号通路的影响 | 第51页 |
| 2. 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·Rhox5与PSAP在前列腺癌细胞中存在内源性相互作用 | 第51-52页 |
| ·Rhox5对PSAP胞外表达的影响 | 第52-53页 |
| ·靶向PSAP的siRNA筛选结果 | 第53-54页 |
| ·PSAP对Akt信号通路磷酸化水平的影响 | 第54-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-56页 |
| 4. 小结 | 第56-57页 |
| 第六章 全文小结与展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
