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基于与转运蛋白P-gp相互作用的抗结核药物耐药机制研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-21页
前言第21-27页
第一章 细胞模型的建立及细胞毒性试验第27-38页
 1 材料与仪器第27-28页
 2 实验方法第28-32页
   ·Caco-2及ECV304细胞的培养第28-30页
   ·细胞特性评价第30-31页
   ·MTT系列工作液的配制第31页
   ·MTT实验第31-32页
 3 数据处理第32页
 4 结果第32-36页
   ·细胞形态学考察第32-33页
   ·免疫荧光法验证第33-34页
   ·MTT实验结果第34-36页
 5 讨论第36-38页
第二章 四种抗结核药物对P-糖蛋白功能的影响第38-47页
 1 材料与仪器第38-39页
 2 实验方法第39-41页
   ·工作液的配制第39页
   ·荧光淬灭实验第39页
   ·时间对Rh-123摄取的影响第39-40页
   ·药物作用不同时间对P-gp功能的影响第40-41页
 3 结果第41-45页
   ·荧光淬灭实验第41页
   ·时间对Rh-123摄取的影响第41-42页
   ·药物作用不同时间对P-gp功能的影响第42-45页
 4 讨论第45-47页
第三章 四种抗结核药物对P-糖蛋白表达的影响第47-57页
 1 材料与仪器第47-48页
 2 实验方法第48-49页
   ·溶液配制第48页
   ·实验分组第48页
   ·实验步骤第48-49页
   ·流式细胞仪测定细胞内荧光强度第49页
   ·数据处理第49页
 3 结果第49-54页
 4 讨论第54-57页
第四章 四种抗结核药物对MDR1 mRNA表达的影响第57-69页
 1 材料与仪器第57-58页
 2 实验方法第58-63页
   ·引物设计第58-60页
   ·实验分组第60-61页
   ·实验步骤第61-63页
 3 结果第63-67页
   ·RT-PCR第63页
   ·实时定量PCR第63-67页
 4 讨论第67-69页
第五章 LC-MS/MS法测定昆明鼠血浆及不同组织中异烟肼、利福平和左氧氟沙星的浓度第69-81页
 1 材料与试药第69-70页
 2 方法与结果第70-79页
   ·色谱与质谱条件第70页
   ·对照品溶液及内标溶液的配制第70页
   ·样品处理方法第70-72页
   ·方法专属性实验第72-77页
   ·标准曲线和线性范围第77页
   ·回收率,精密度,准确度与稳定性试验第77-78页
   ·基质效应第78-79页
 3 讨论第79-81页
第六章 三种抗结核药物不同组合及不同给药周期条件下在昆明鼠的组织分布情况第81-98页
 1 材料与仪器第81-82页
   ·实验动物和饲养环境第81页
   ·仪器及试剂第81-82页
 2 实验方法第82-83页
   ·实验动物分组第82页
   ·动物试验第82-83页
   ·小鼠血浆及各组织中三种药物浓度的测定第83页
   ·统计学处理第83页
 3 结果第83-96页
   ·不同给药组血浆及组织中INH的药物浓度第83-87页
   ·不同给药组血浆及组织中RFP的药物浓度第87-91页
   ·不同给药组血浆及组织中LVX的药物浓度第91-95页
   ·不同给药组中INH的组织/血浆药物浓度比值第95-96页
 4 讨论第96-98页
第七章 三种抗结核药不同组合连续给药10d对昆明鼠不同组织mdr1a mRNA表达水平的影响第98-112页
 1 仪器与材料第98-99页
 2 实验方法第99-101页
   ·引物设计第99-100页
   ·实验步骤第100-101页
 3 结果第101-110页
   ·RNA电泳图第101-103页
   ·标准曲线第103-104页
   ·实时扩增曲线图第104页
   ·溶解曲线第104-105页
   ·各样品相对定量分析结果第105-110页
 4 讨论第110-112页
全文总结及结论第112-115页
参考文献第115-125页
综述第125-136页
 参考文献第132-136页
致谢第136-137页
攻读博士学位期间主要研究成果第137-138页

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