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毒杀天牛的Bt基因转化菊花的研究

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-21页
   ·天牛生物学特性及危害概况第9-11页
     ·成虫和幼虫形态特征第9页
     ·生物学习性第9页
     ·危害概况第9页
     ·菊天牛的形态特征第9-11页
       ·卵第9页
       ·幼虫第9-10页
       ·蛹第10页
       ·成虫第10页
       ·菊天牛危害特点第10-11页
   ·天牛的生物防治研究进展第11-15页
     ·自然天敌防治及其人工繁育研究第12-13页
     ·昆虫生长调节剂第13页
     ·昆虫信息素的利用第13页
     ·微生物农药第13-15页
       ·细菌类杀天牛微生物第13-14页
       ·真菌类杀天牛微生物第14-15页
       ·线虫类杀天牛微生物第15页
   ·转抗虫基因植物的研究第15-21页
     ·抗虫基因分类第16页
     ·转 Bt 基因抗虫植物研究第16-17页
     ·菊花转基因研究进展第17-18页
     ·转 Bt 基因育种存在的问题及解决途径第18-21页
2 引言第21-22页
3 材料与方法第22-29页
   ·材料第22-23页
     ·供试虫源和菊花第22页
     ·菌种与质粒第22页
     ·试剂及仪器第22页
     ·常规试剂的配制第22-23页
   ·方法第23-29页
     ·试虫的饲养第23页
       ·卵孵化第23页
       ·幼虫的饲养第23页
       ·成虫的饲养第23页
     ·菊花遗传转化再生体系的建立第23-24页
       ·田间菊花外植体的处理第23页
       ·菊花不定芽的诱导和生根第23-24页
       ·不同浓度的卡那霉素和头孢噻肟钠对菊花“北京黄”茎段分化和不定芽生根的影响第24页
       ·再生苗的移栽第24页
     ·植物表达载体pBin438-mBt886cry3Aa 农杆菌介导法转化菊花“北京黄”第24-27页
       ·CaCL_2 法制备农杆菌感受态细胞及冻融法转化农杆菌第24-25页
       ·转化菌斑的 PCR 筛选第25-26页
       ·农杆菌叶盘法转化菊花“北京黄”第26页
       ·CTAB 法提取菊花 DNA 和PCR 分子检测转化植株第26-27页
     ·植物表达载体pBin438-mBt886cry3Aa 花粉管通道法转化菊花“北京黄”第27页
       ·农杆菌的培养第27页
       ·花序的浸染第27页
       ·转化子的筛选第27页
     ·转基因菊花对菊天牛室内生物测定第27-29页
4 结果与分析第29-41页
   ·菊天牛人工饲养及生物学习性观察第29-30页
     ·菊天牛人工饲养第29-30页
   ·菊花“北京黄”茎段最适分化培养基和不定芽最佳生根培养基的确定第30-37页
     ·菊花茎段最适分化培养基的确定第30-31页
     ·菊花不定芽最佳生根培养基的确定第31-32页
     ·不同浓度的卡那霉素和头孢噻肟钠对菊花茎段分化和不定芽生根的影响第32-37页
       ·卡那霉素对菊花茎段分化抑制临界耐受浓度确定第32-34页
       ·卡那霉素对菊花不定芽生根抑制临界耐受浓度确定第34-36页
       ·不同浓度头孢噻肟钠对菊花茎段诱导不定芽的影响第36-37页
   ·植物表达载体pBin438-mBt886cry3Aa 转化菊花“北京黄”第37-39页
     ·冻融法转化农杆菌及 PCR 检查转化结果第37-38页
     ·菊花茎段的浸染和共培养第38页
     ·抗性苗的移栽第38页
     ·CTAB 法提取菊花叶片 DNA 及转化植株的检测第38-39页
   ·转基因菊花对菊天牛2 龄幼虫室内生物测定第39-41页
5 结论与讨论第41-44页
   ·结论第41页
     ·菊天牛人工饲养第41页
     ·菊花遗传转化再生体系的建立第41页
     ·农杆菌介导法成功将基因mBt886Cry3Aa 转入菊花第41页
     ·转基因菊花对菊天牛表现出毒杀效果第41页
   ·讨论第41-44页
参考文献第44-51页
ABSTRACT第51-53页
附录Ⅰ第53-54页
附录Ⅱ第54页

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