| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第8-18页 |
| ·哺乳动物心脏发育 | 第8-14页 |
| ·心脏的分隔与心脏瓣膜结构 | 第9-11页 |
| ·心脏瓣膜发育概述 | 第11页 |
| ·内皮间质细胞转化(EMT)的研究现状 | 第11-13页 |
| ·EMT的体外研究方法 | 第13-14页 |
| ·SUR-8与Ras/ERK信号通路 | 第14-18页 |
| ·Ras/ERK信号通路与先天性心脏缺陷 | 第14-15页 |
| ·SUR-8研究现状 | 第15-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-29页 |
| ·分子生物学实验 | 第18-23页 |
| ·打靶载体的构建 | 第18页 |
| ·Southern印迹 | 第18-19页 |
| ·小鼠基因型的鉴定 | 第19-20页 |
| ·小鼠胚胎内皮细胞分离 | 第20页 |
| ·RNA的抽提,半定量PCR和实时定量PCR | 第20-21页 |
| ·Western杂交 | 第21-23页 |
| ·细胞生物学实验 | 第23-25页 |
| ·ES细胞的培养 | 第23页 |
| ·ES细胞电穿孔转染 | 第23页 |
| ·ES克隆的鉴定 | 第23-24页 |
| ·ES细胞核型分析 | 第24页 |
| ·ES细胞嵌合体小鼠的培育 | 第24-25页 |
| ·组织学实验 | 第25-28页 |
| ·组织切片的制备 | 第25页 |
| ·苏木精伊红(H&E)染色 | 第25-26页 |
| ·抗体免疫荧光染色 | 第26页 |
| ·小鼠胚胎PECAM-1抗体整染 | 第26页 |
| ·小鼠胚胎心内膜垫体积估算 | 第26-27页 |
| ·小鼠胚胎心内膜垫体外内皮-间质细胞转化(EMT)能力检测 | 第27-28页 |
| ·小鼠的饲养与管理 | 第28页 |
| ·转基因小鼠品系来源 | 第28页 |
| ·自发活动行为测试(Open-field assay) | 第28页 |
| ·伤口愈合期上皮细胞增殖能力测试(wound healing) | 第28页 |
| ·统计学分析 | 第28-29页 |
| 第三章 SUR-8在哺乳动物心脏发育中的功能研究 | 第29-52页 |
| ·内皮细胞系特异性剔除Sur-8基因 | 第29-34页 |
| ·全身性剔除Sur-8基因导致小鼠早期胚胎死亡 | 第29页 |
| ·内皮细胞系特异性剔除Sur-8基因打靶过程 | 第29-30页 |
| ·Sur-8条件剔除小鼠突变品系的培育及鉴定 | 第30-34页 |
| ·Sur-8内皮细胞剔除导致小鼠胚胎死亡及心脏发育异常 | 第34-40页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠死于胚胎期13.5天以后 | 第34页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠胎盘,外周血管网络及大血管构成均发育正常 | 第34-35页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠出现多种心血管畸形及心脏瓣膜发育异常 | 第35-40页 |
| ·Sur-8内皮细胞剔除导致小鼠心脏房室管(AVC)心内膜垫发育异常,流出道(OFT)心内膜垫未见显著异常 | 第40-46页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠房室管心内膜垫体积减少,流出道心内膜垫体积变化不大 | 第40页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠房室管心内膜垫内皮间质细胞转化(EMT)能力下降,而流出道心内膜垫EMT能力变化不大 | 第40-41页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠房室管心内膜垫间质细胞增殖能力下降 | 第41-46页 |
| ·Sur-8可能是通过独立于Ras/ERK通路的方式来调控小鼠心脏发育的 | 第46-49页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠内皮细胞中Ras通路的活性未受到显著的影响 | 第46页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠房室管心内膜垫的Ras/ERK通路活性未有显著变化 | 第46-47页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠内皮细胞中GATA4转录活性显著下降,其他被检转录因子活性未有显著变化 | 第47-49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-52页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠出现多种心血管畸形的原因探讨 | 第49页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠房室管和流出道心内膜垫EMT表型差异原因探讨 | 第49-50页 |
| ·Sur-8~(Δ/flox);Tie2-Cre小鼠AVC心内膜垫发育异常分子机制探讨 | 第50-52页 |
| 第四章 SUR-8在哺乳动物其他系统发育中的功能初探 | 第52-60页 |
| ·SUR-8在小鼠中枢神经系统中的功能初探 | 第52-56页 |
| ·Ras信号通路与哺乳动物神经系统的发育 | 第52页 |
| ·现有的研究结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| ·SUR-8在小鼠皮肤角质细胞中的功能初探 | 第56-60页 |
| ·Ras信号通路与哺乳动物皮肤发育 | 第56页 |
| ·现有的研究结果 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-60页 |
| 总结与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-70页 |
| 发表文章 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
