致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
缩略词表 | 第16-19页 |
1 引言 | 第19-22页 |
2 实验材料与仪器 | 第22-26页 |
2.1 细胞株和质粒 | 第22页 |
2.2 药物与主要试剂 | 第22-25页 |
2.3 实验仪器 | 第25-26页 |
3 实验方法 | 第26-37页 |
3.1 细胞培养 | 第26页 |
3.2 Western blot法检测相关蛋白表达 | 第26-28页 |
3.3 pLKO.1-shPRDX6和Tet-pLKO-neo-shPRDX6质粒构建 | 第28-31页 |
3.4 慢病毒颗粒的包装、浓缩和感染 | 第31-33页 |
3.5 谷胱甘肽(GSH)含量检测 | 第33页 |
3.6 Real-time PCR | 第33-35页 |
3.7 流式细胞术检测脂质ROS(Lipid ROS) | 第35-36页 |
3.8 磺酰罗丹明B(SRB)比色法考察细胞增殖活性 | 第36页 |
3.9 质粒转染 | 第36页 |
3.10 数据分析 | 第36-37页 |
4 实验结果 | 第37-66页 |
4.1 PRDX6蛋白负性调控肿瘤细胞发生铁死亡(Tet-on体系) | 第37-42页 |
4.1.1 沉默PRDX6蛋白不引起肿瘤细胞发生铁死亡 | 第37-39页 |
4.1.2 沉默PRDX6蛋白增加铁死亡诱导剂诱导肿瘤细胞产生LipidROS | 第39-42页 |
4.2 PRDX6蛋白负性调控肿瘤细胞发生铁死亡(瞬时敲除体系) | 第42-53页 |
4.2.1 沉默PRDX6蛋白增加铁死亡诱导剂诱导肿瘤细胞产生Lipid ROS | 第42-48页 |
4.2.2 沉默PRDX6增加铁死亡诱导剂对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第48-50页 |
4.2.3 PRDX6蛋白过表达减少铁死亡诱导剂对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第50-52页 |
4.2.4 PRDX6蛋白过表达减少铁死亡诱导剂诱导肿瘤细胞产生Lipid ROS | 第52-53页 |
4.3 PRDX6蛋白抑制肿瘤细胞铁死亡过程中的NRF2-HMOX-1信号轴 | 第53-61页 |
4.3.1 沉默PRDX6蛋白不影响肿瘤细胞的谷胱甘肽合成 | 第53-54页 |
4.3.2 肿瘤细胞内沉默PRDX6蛋白增加NRF2蛋白的表达和转录激活HMOX-1基因 | 第54-59页 |
4.3.3 HMOX-1蛋白过表达增加铁死亡诱导剂诱导肿瘤细胞产生Lipid ROS | 第59-61页 |
4.4 PRDX6蛋白的iPLA2酶活清除肿瘤细胞发生铁死亡过程中的LipidROS | 第61-66页 |
4.4.1 MJ33提高铁死亡诱导剂诱导肿瘤细胞产生的Lipid ROS | 第61-66页 |
5 讨论 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
综述 铁死亡在肿瘤发生发展和治疗方面的研究进展 | 第76-94页 |
参考文献 | 第87-94页 |
作者简历及硕士期间科研成果 | 第94-95页 |