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人脐带来源MSCs通过外泌体对A549细胞的调控作用及机制研究

致谢第5-6页
摘要第6-10页
缩略词简表 (Abbreviations)第10-14页
第一章 绪论第14-18页
    1.1 间充质干细胞简介第14页
    1.2 MSCs对肿瘤细胞的调控作用第14-15页
    1.3 MSCs来源外泌体第15-18页
第二章 MSCs能够抑制A549细胞增殖并促进凋亡同时诱导其发生EMT第18-30页
    2.1 引言第18页
    2.2 实验材料第18-19页
        2.2.1 实验对象第18页
        2.2.2 实验仪器第18-19页
        2.2.3 实验试剂第19页
    2.3 实验方法第19-25页
        2.3.1 细胞培养第19-20页
        2.3.2 MSC-CM准备第20页
        2.3.3 CCK-8 法检测细胞活力第20-21页
        2.3.4 LDH法检测细胞毒性第21页
        2.3.5 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡第21-22页
        2.3.6 细胞划痕实验检测细胞迁移第22页
        2.3.7 transwell实验检测细胞浸润第22-23页
        2.3.8 q PCR检测m RNA的表达水平第23-24页
        2.3.9 western blot检测蛋白表达水平第24-25页
        2.3.10 数据统计分析第25页
    2.4 实验结果与分析第25-28页
        2.4.1 MSC-CM抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡第25-26页
        2.4.2 MSC-CM能够诱导A549细胞发生EMT第26-27页
        2.4.3 MSC-CM促进A549细胞的迁移及侵袭能力第27-28页
    2.5 讨论与小结第28-30页
第三章 MSCs通过其来源外泌体诱导A549细胞发生EMT第30-39页
    3.1 引言第30页
    3.2 实验材料第30-31页
        3.2.1 实验试剂第30-31页
        3.2.2 实验仪器第31页
    3.3 实验方法第31-33页
        3.3.1 GW4869处理的MSC-CM的收集第31页
        3.3.2 MSC-exo提取第31-32页
        3.3.3 外泌体蛋白浓度测定第32页
        3.3.4 外泌体标志性蛋白检测第32页
        3.3.5 外泌体透射电镜检测第32页
        3.3.6 外泌体荧光标记第32-33页
    3.4 实验结果与分析第33-37页
        3.4.1 GW4869对MSCs诱导的A549细胞的EMT的影响第33-34页
        3.4.2 GW4869对MSCs诱导的A549细胞迁移和侵袭能力的影响第34-35页
        3.4.3 MSC-exo的提取与鉴定第35-36页
        3.4.4 MSC-exo诱导A549细胞发生EMT第36-37页
        3.4.5 MSC-exo促进A549细胞迁移及侵袭第37页
    3.5 讨论与小结第37-39页
第四章 抑制TGF-β1 的表达逆转MSC-exo对肿瘤EMT的促进并增强对肿瘤生长的抑制作用第39-54页
    4.1 引言第39页
    4.2 实验材料第39-40页
        4.2.1 实验试剂第39-40页
        4.2.2 实验仪器第40页
    4.3 实验方法第40-41页
        4.3.1 TGF-β1 si RNA转染第40页
        4.3.2 si-TGF-β1 干扰的MSC-exo提取第40-41页
        4.3.3 细胞免疫荧光第41页
        4.3.4 数据统计分析第41页
    4.4 实验结果与分析第41-51页
        4.4.1 干扰TGF-β1 逆转MSC-CM对A549细胞EMT、迁移和侵袭的促进作用第41-44页
        4.4.2 干扰TGF-β1 增强MSC-CM对A549细胞生长的抑制作用第44-45页
        4.4.3 干扰TGF-β1 逆转MSC-exo对A549细胞EMT、迁移和侵袭的促进作用第45-48页
        4.4.4 干扰TGF-β1 增强MSC-exo对A549细胞生长的抑制作用第48-49页
        4.4.5 MSC-exo通过激活Smad2/Smad3信号通路诱导A549细胞发生EMT,干扰MSCs中TGF-β1 的表达逆转MSC-exo对Smad2/Smad3信号通路的活化第49-50页
        4.4.6 MSC-exo通过激活Smad非依赖性途径中的AKT、MAPK及NF-κB信号通路诱导A549细胞发生EMT,干扰MSCs中TGF-β1 的表达逆转MSC-exo对AKT、MAPK及NF-κB信号通路的活化第50-51页
    4.5 讨论与小结第51-54页
第五章 总结与展望第54-56页
    5.1 总结第54页
    5.2 展望第54-56页
参考文献第56-68页
硕士期间发表的论文第68-69页

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