| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第1章 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 水产养殖疾病 | 第11-12页 |
| 1.1.1 细菌性败血症 | 第11页 |
| 1.1.2 细菌性烂鳃病 | 第11-12页 |
| 1.1.3 烂尾病 | 第12页 |
| 1.2 疾病防治 | 第12-14页 |
| 1.3 基因工程应用 | 第14-15页 |
| 1.3.1 在大肠杆菌表达系统中的应用 | 第14页 |
| 1.3.2 在真核表达系统中的应用 | 第14-15页 |
| 1.4 研究内容及意义 | 第15-17页 |
| 1.4.1 研究背景 | 第15页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第15-16页 |
| 1.4.3 研究意义 | 第16-17页 |
| 第2章 鳗鲡嗜水气单胞菌外膜蛋白基因的原核表达及其免疫原性研究 | 第17-40页 |
| 2.1 主要试验材料 | 第17-22页 |
| 2.1.1 主要试验仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.2 主要试验试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 试剂配制方法 | 第18-21页 |
| 2.1.4 试验鳗鲡 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 引物设计及合成 | 第22页 |
| 2.2.2 外膜蛋白基因的扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.3 OMP基因与T载体的连接 | 第23-25页 |
| 2.2.4 重组表达载体的构建 | 第25页 |
| 2.2.5 表达载体序列分析 | 第25页 |
| 2.2.6 重组表达载体的表达与纯化 | 第25-28页 |
| 2.2.7 鳗鲡养殖与免疫 | 第28-29页 |
| 2.2.8 免疫指标测定 | 第29-31页 |
| 2.3 结果 | 第31-38页 |
| 2.3.1 目的基因扩增 | 第31页 |
| 2.3.2 重组载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 序列分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 重组载体的表达与纯化 | 第33-35页 |
| 2.3.5 免疫指标测定结果 | 第35-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-40页 |
| 2.4.1 嗜水气单胞菌OMP的克隆表达及纯化 | 第38页 |
| 2.4.2 免疫原性研究 | 第38-40页 |
| 第3章 嗜水气单胞菌外膜蛋白单链抗体的筛选 | 第40-47页 |
| 3.1 试验材料 | 第40页 |
| 3.2 试验方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 噬菌体扩增 | 第40-41页 |
| 3.2.2 单链抗体的筛选 | 第41页 |
| 3.2.3 检测抗体活性 | 第41-42页 |
| 3.2.4 特异性抗体的鉴定 | 第42页 |
| 3.3 结果 | 第42-45页 |
| 3.3.1 生物淘洗 | 第42-43页 |
| 3.3.2 抗体活性检测 | 第43页 |
| 3.3.3 噬菌体基因组的提取 | 第43页 |
| 3.3.4 特异性抗体序列分析 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-47页 |
| 3.4.1 噬菌体的筛选 | 第45-46页 |
| 3.4.2 特异性抗体片段的序列分析 | 第46-47页 |
| 第4章 单链抗体的原核表达及真核表达 | 第47-57页 |
| 4.1 试验材料 | 第47-48页 |
| 4.2 试验方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 单链抗体基因的原核表达 | 第48页 |
| 4.2.2 单链抗体基因真核表达载体的构建 | 第48页 |
| 4.2.3 重组质粒的序列分析 | 第48页 |
| 4.2.4 重组质粒pPIC9K-OMP-Scfv的电转化及检测 | 第48-49页 |
| 4.2.5 毕赤酵母的表达及检测 | 第49-51页 |
| 4.3 结果 | 第51-55页 |
| 4.3.1 单链抗体基因OMP-Scfv的扩增 | 第51页 |
| 4.3.2 重组载体的构建 | 第51-53页 |
| 4.3.3 原核重组质粒的表达 | 第53页 |
| 4.3.4 真核重组质粒的表达 | 第53-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-57页 |
| 4.4.1 大肠杆菌表达形式 | 第55页 |
| 4.4.2 酵母表达产物 | 第55-56页 |
| 4.4.3 酵母表达产物检测 | 第56-57页 |
| 第5章 总结与展望 | 第57-59页 |
| 5.1 实验总结 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第65页 |