| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词简表(Abbreviations) | 第10-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 手性药物 | 第15-16页 |
| 1.1.1 手性药物的概述 | 第15页 |
| 1.1.2 手性药物的药理活性 | 第15-16页 |
| 1.1.3 手性药物的市场发展 | 第16页 |
| 1.2 手性醇在制药领域的应用及制备 | 第16-18页 |
| 1.2.1 手性醇在制药领域的应用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 手性醇的制备 | 第17-18页 |
| 1.3 微生物细胞不对称合成手性醇 | 第18-20页 |
| 1.3.1 微生物细胞不对称还原合成手性醇的特点 | 第18-19页 |
| 1.3.2 用于不对称还原合成手性醇的微生物 | 第19-20页 |
| 1.4 酶法不对称还原合成手性醇 | 第20-21页 |
| 1.4.1 应用于手性醇合成的氧化还原酶 | 第20页 |
| 1.4.2 羰基化合物的酶不对称催化还原反应机理 | 第20-21页 |
| 1.4.3 氧化还原酶的分离纯化 | 第21页 |
| 1.5 托莫西汀 | 第21-23页 |
| 1.5.1 ADHD的概述 | 第21页 |
| 1.5.2 托莫西汀的概述 | 第21-22页 |
| 1.5.3 托莫西汀的药理作用 | 第22页 |
| 1.5.4 托莫西汀中间体(R)-3-羟基-3-苯基丙酸乙酯的概述 | 第22-23页 |
| 1.6 本论文的研究内容 | 第23-24页 |
| 1.7 本论文的研究意义 | 第24-25页 |
| 第二章 微生物法不对称合成(R)-β-羟基苯丙酸乙酯 | 第25-35页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.2.1 样品来源 | 第25页 |
| 2.2.2 试剂与仪器 | 第25-27页 |
| 2.2.3 培养基 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.3.1 培养方法 | 第27页 |
| 2.3.2 土壤样品的稀释 | 第27页 |
| 2.3.3 菌种筛选 | 第27-28页 |
| 2.3.4 数据处理分析 | 第28页 |
| 2.3.5 菌种鉴定 | 第28-29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-34页 |
| 2.4.1 分析方法 | 第29-31页 |
| 2.4.2 菌种筛选 | 第31页 |
| 2.4.3 菌种鉴定 | 第31-33页 |
| 2.4.4 菌种生长曲线的测定 | 第33-34页 |
| 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章 响应面法优化C.tropicaliszjut412的发酵培养条件 | 第35-49页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.2.1 菌种 | 第35页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第35页 |
| 3.2.3 培养基 | 第35-36页 |
| 3.3 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.3.1 培养方法 | 第36页 |
| 3.3.2 分析方法 | 第36页 |
| 3.3.3 单因素试验 | 第36-37页 |
| 3.3.4 实验设计 | 第37-38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-48页 |
| 3.4.1 单因素试验结果 | 第38-41页 |
| 3.4.2 PB实验设计及分析 | 第41-44页 |
| 3.4.3 最陡爬坡实验结果及分析 | 第44-45页 |
| 3.4.4 响应面分析 | 第45-47页 |
| 3.4.5 验证实验结果及分析 | 第47-48页 |
| 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 微生物法制备产物(R)-β-羟基苯丙酸乙酯的转化条件优化 | 第49-56页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料 | 第49页 |
| 4.2.1 菌种 | 第49页 |
| 4.2.2 试剂与仪器 | 第49页 |
| 4.2.3 培养基 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 培养方法 | 第49-50页 |
| 4.3.2 还原反应的最适转化条件的测定 | 第50-51页 |
| 4.3.3 分析方法 | 第51页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第51-55页 |
| 4.4.1 还原反应的转化条件优化 | 第51-55页 |
| 本章小结 | 第55-56页 |
| 第五章 C.tropicaliszjut412中羰基还原酶的分离纯化 | 第56-66页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 实验材料 | 第56-57页 |
| 5.2.1 菌种 | 第56页 |
| 5.2.2 培养基 | 第56页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第56页 |
| 5.2.4 主要溶液 | 第56-57页 |
| 5.2.5 主要仪器 | 第57页 |
| 5.3 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.3.1 培养方法及菌体收集 | 第57页 |
| 5.3.2 粗酶液的制备 | 第57页 |
| 5.3.3 硫酸铵分级沉淀 | 第57页 |
| 5.3.4 超滤浓缩 | 第57-58页 |
| 5.3.5 DEAEsepharoseFF阴离子交换柱 | 第58页 |
| 5.3.6 Bluesepharose6FF亲和层析柱 | 第58页 |
| 5.3.7 羰基还原酶酶活力的测定 | 第58页 |
| 5.3.8 蛋白含量的测定 | 第58-59页 |
| 5.3.9 纯度检测 | 第59页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 5.4.1 牛血清白蛋白的标准曲线 | 第59页 |
| 5.4.2 羰基还原酶的产生部位及辅酶依赖性研究 | 第59-60页 |
| 5.4.3 DEAEsepharoseFF离子交换层析上样缓冲液pH值的确定 | 第60-61页 |
| 5.4.4 DEAEsepharoseFF阴离子交换层析 | 第61-62页 |
| 5.4.5 Bluesepharose6FF亲和层析 | 第62-64页 |
| 5.4.6 羰基还原酶的纯化结果 | 第64-65页 |
| 本章小结 | 第65-66页 |
| 第六章 羰基还原酶的酶学性质 | 第66-73页 |
| 6.1 引言 | 第66页 |
| 6.2 实验材料 | 第66页 |
| 6.2.1 菌种 | 第66页 |
| 6.2.2 培养基 | 第66页 |
| 6.2.3 主要试剂 | 第66页 |
| 6.2.4 主要仪器 | 第66页 |
| 6.3 实验方法 | 第66-67页 |
| 6.3.1 羰基还原酶的制备 | 第66-67页 |
| 6.3.2 酶活的测定 | 第67页 |
| 6.3.3 辅酶依赖性研究 | 第67页 |
| 6.3.4 酶反应的最适温度及热稳定性的测定 | 第67页 |
| 6.3.5 酶反应的最适pH及pH稳定性的测定 | 第67页 |
| 6.3.6 金属离子对酶反应的影响 | 第67页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第67-72页 |
| 6.4.1 羰基还原酶的最适催化温度及热稳定性 | 第67-69页 |
| 6.4.2 羰基还原酶的最适pH及pH稳定性 | 第69-70页 |
| 6.4.3 金属离子及EDTA对羰基还原酶酶活的影响 | 第70-72页 |
| 本章小结 | 第72-73页 |
| 总结与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-80页 |
