| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-19页 |
| 第一部分 脓毒症相关急性肺损伤小鼠模型的建立及演变特点 | 第19-32页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.3 药物溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第21页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第21页 |
| 2.2.2 LPS诱导小鼠脓毒症相关急性肺损伤模型的建立及分组 | 第21页 |
| 2.3 小鼠肺组织病理学变化及肺损伤评分 | 第21-22页 |
| 2.4 小鼠支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数测定 | 第22页 |
| 2.5 小鼠肺湿/干重比值测定 | 第22页 |
| 2.6 小鼠支气管肺泡灌洗液中总蛋白浓度测定 | 第22-23页 |
| 2.7 支气管肺泡灌洗液中TNF-α浓度测定 | 第23-24页 |
| 2.8 统计学分析 | 第24页 |
| 3 结果 | 第24-29页 |
| 3.1 LPS诱导脓毒症相关急性肺损伤小鼠一般状态、体重变化 | 第24-25页 |
| 3.2 LPS诱导脓毒症相关急性肺损伤小鼠病理学改变和肺损伤评分 | 第25-26页 |
| 3.3 LPS诱导脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺泡毛细血管屏障功能的改变 | 第26-27页 |
| 3.3.1 支气管肺泡灌洗液总蛋白浓度测定 | 第26-27页 |
| 3.3.2 肺湿/干比重(W/D)测定 | 第27页 |
| 3.4 LPS诱导脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺脏炎症的改变 | 第27-29页 |
| 3.4.1 支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数表达变化 | 第27-28页 |
| 3.4.2 支气管肺泡灌洗液中炎症因子TNF-α表达变化 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 5 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤的保护性作用 | 第32-49页 |
| 1 前言 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-38页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第33页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.3 实验溶液配制 | 第34页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第34-35页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第34页 |
| 2.2.2 脓毒症相关急性肺损伤小鼠模型的建立及分组 | 第34-35页 |
| 2.3 小鼠肺组织病理学变化及肺损伤评分 | 第35页 |
| 2.4 小鼠支气管肺泡灌洗液中性粒细胞计数测定 | 第35页 |
| 2.5 小鼠肺湿/干重比测定 | 第35页 |
| 2.6 小鼠支气管肺泡灌洗液中总蛋白浓度测定 | 第35页 |
| 2.7 小鼠RAW264.7细胞培养 | 第35页 |
| 2.8 RAW264.7细胞活性检测 | 第35-36页 |
| 2.8.1 实验分组 | 第36页 |
| 2.8.2 细胞培养 | 第36页 |
| 2.8.3 药物处理 | 第36页 |
| 2.8.4 CCK8细胞活性检测 | 第36页 |
| 2.9 培养基上清中TNF-α、IL-6及NO表达水平测定 | 第36-38页 |
| 2.9.1 培养基上清中TNF-α及NO表达水平测定 | 第36-37页 |
| 2.9.2 培养基上清中IL-6表达水平测定 | 第37-38页 |
| 2.10 数据统计 | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-46页 |
| 3.1 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺脏病理学改变的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺泡毛细血管屏障能力的影响 | 第40-42页 |
| 3.2.1 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠支气管肺泡灌洗液总蛋白浓度的影响 | 第41页 |
| 3.2.2 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺湿/干比重(W/D)的影响 | 第41-42页 |
| 3.3 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺脏炎症反应的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠体重及生存率的影响 | 第43页 |
| 3.5 RAW264.7细胞细胞活力检测 | 第43-44页 |
| 3.6 表儿茶素对LPS诱导下RAW264.7细胞生成TNF-α的影响及量效关系 | 第44-45页 |
| 3.7 表儿茶素对LPS诱导下RAW264.7细胞生成NO的影响及量效关系 | 第45-46页 |
| 3.8 表儿茶素对LPS诱导下RAW264.7细胞生成IL-6的影响 | 第46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 第三部分 表儿茶素通过P38MAPK信号通路调节脓毒症相关急性肺损伤炎症反应的机制研究 | 第49-77页 |
| 1 前言 | 第49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-63页 |
| 2.1 主要试剂和仪器 | 第49-50页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第49-50页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第50页 |
| 2.2 研究对象和分组 | 第50-51页 |
| 2.2.1 研究对象 | 第50-51页 |
| 2.2.2 脓毒症相关急性肺损伤小鼠模型的建立及分组 | 第51页 |
| 2.3 脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织基因检测 | 第51-54页 |
| 2.3.1 样品破碎匀浆 | 第51页 |
| 2.3.2 总RNA提取及DNA消化 | 第51-52页 |
| 2.3.3 RNA定量 | 第52页 |
| 2.3.4 cDNA合成 | 第52-53页 |
| 2.3.5 实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
| 2.4 Westernblot检测肺组织中蛋白表达情况 | 第54-56页 |
| 2.4.1 小鼠肺组织总蛋白样品的制备 | 第55页 |
| 2.4.2 蛋白浓度测定 | 第55页 |
| 2.4.3 配胶 | 第55页 |
| 2.4.4 目的蛋白的电泳和分离 | 第55页 |
| 2.4.5 转膜、封闭、孵育及显影 | 第55-56页 |
| 2.5 P38蛋白构建及药效团分析 | 第56-62页 |
| 2.5.1 蛋白晶体结构总结 | 第56-61页 |
| 2.5.2 准备蛋白 | 第61页 |
| 2.5.3 构建药效团 | 第61-62页 |
| 2.5.4 蛋白4L8M和表儿茶素分子对接评分 | 第62页 |
| 2.6 P38蛋白激酶活性检测 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63-72页 |
| 3.1 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织基因表达的影响 | 第63-65页 |
| 3.2 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织P38及磷酸化P38蛋白表达的影响 | 第65页 |
| 3.3 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织JNK、ERK1/2及磷酸化JNK、ERK1/2蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| 3.4 表儿茶素对脓毒症相关急性肺损伤小鼠肺组织c-Jun及磷酸化c-Jun蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.5 P38α蛋白构建及药效团分析 | 第67-72页 |
| 3.5.1 P38α蛋白三维结构及作用方式 | 第67-68页 |
| 3.5.2 P38α蛋白药效团分析结果 | 第68-70页 |
| 3.5.3 表儿茶素与Pharmacophore_04分子对接结果 | 第70-71页 |
| 3.5.4 以转录因子ATF2为底物检测表儿茶素对P38α蛋白激酶的抑制作用 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-75页 |
| 5 结论 | 第75-77页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-82页 |
| 综述 | 第82-96页 |
| 参考文献 | 第89-96页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 个人简历 | 第98页 |
