| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文对照及缩略词 | 第8-9页 |
| 1 研究背景 | 第9-14页 |
| 1.1 骨质疏松症 | 第9-10页 |
| 1.2 破骨细胞和成骨细胞 | 第10-11页 |
| 1.3 表观遗传学调节(Epigenetic regulation)在破骨细胞及成骨细胞分化中的作用 | 第11-12页 |
| 1.4 本课题研究目的 | 第12-14页 |
| 2 实验方法与材料 | 第14-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-18页 |
| 2.2 实验试剂配制 | 第18-20页 |
| 2.3 体外破骨细胞分化及骨吸收实验 | 第20-22页 |
| 2.4 从RAW264.7和破骨细胞中抽提组蛋白(酸抽提法) | 第22-23页 |
| 2.5 慢病毒介导稳定敲低DOT1L的RAW264.7细胞株构建 | 第23-24页 |
| 2.6 基于TMT标记的蛋白质组学实验 | 第24-25页 |
| 2.7 液质联用质谱检测 | 第25-26页 |
| 2.8 生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.9 Western Blot | 第27-29页 |
| 2.10 小鼠卵巢摘除术及渗透泵载药 | 第29页 |
| 2.11 小鼠骨头TRAP染色和免疫组化 | 第29-30页 |
| 2.12 免疫荧光 | 第30-31页 |
| 2.13 流式检测氧自由基生成和自噬活性 | 第31页 |
| 2.14 Transwell细胞迁移实验 | 第31页 |
| 2.15 MTT法检测EPZ5676和EPZ004777处理后RAW264.7增殖变化 | 第31-32页 |
| 2.16 统计学分析 | 第32-33页 |
| 3 研究结果 | 第33-71页 |
| 3.1 组蛋白H3K79me1/2在破骨细胞分化中上调(1% FBS诱导模型) | 第33-35页 |
| 3.2 DOT1L抑制剂EPZ004777抑制破骨细胞分化(BMCs诱导模型) | 第35-39页 |
| 3.3 DOT1L抑制剂EPZ5676和EPZ004777不影响成骨细胞分化 | 第39-40页 |
| 3.4 BMCs诱导分化的破骨细胞中EPZ004777上调促进破骨细胞分化的因子 | 第40-44页 |
| 3.5 DOT1L抑制剂促进破骨细胞分化和骨吸收(10% FBS诱导模型) | 第44-48页 |
| 3.6 抑制DOT1L加重卵巢摘除鼠(OVX mice)骨质丢失 | 第48-52页 |
| 3.7 组蛋白H3K79me1/2甲基化在破骨细胞分化中上调(10% FBS诱导模型) | 第52-53页 |
| 3.8 EPZ5676和EPZ004777选择性抑制DOT1L的甲基转移酶活性 | 第53页 |
| 3.9 敲低DOT1L增强破骨细胞的细胞融合和骨吸收活性 | 第53-55页 |
| 3.10 DOT1L在RAW264.7和破骨细胞中调节不同的蛋白 | 第55-57页 |
| 3.11 前破骨细胞中DOT1L调节蛋白参与破骨细胞生成和细胞活力,而破骨细胞中DOT1L调节蛋白参与骨吸收 | 第57-59页 |
| 3.12 DOT1L调节前破骨细胞中细胞电子传递链、自噬和迁移相关蛋白,并上调破骨细胞中CD9和MMP9表达 | 第59-67页 |
| 3.13 DOT1L受到抑制后促进ROS生成、细胞自噬和细胞迁移 | 第67-69页 |
| 3.14 EPZ5676处理能够增强NFATc1和NF-κB转录活性 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-78页 |
| 5 综述 | 第78-83页 |
| 5.1 前言 | 第78-79页 |
| 5.2 参与骨代谢的miR-223的靶点 | 第79-80页 |
| 5.3 miR-223在破骨细胞分化中的调节作用 | 第80-81页 |
| 5.4 miR-223在成骨细胞分化中的调节作用 | 第81页 |
| 5.5 miR-223在骨相关疾病中的作用 | 第81-82页 |
| 5.6 讨论和展望 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 附录：差异表达蛋白列表 | 第95-129页 |
| 博士期间发表的论文 | 第129-132页 |
| 致谢 | 第132页 |
